目的建立聚氯乙烯(polyvinyl chloride,PVC)材料表面白色念珠菌-表皮葡萄球菌混合生物膜體外模型,觀察混合生物膜的形成與微觀結構。 方法取表皮葡萄球菌(ATCC35984)與白色念珠菌(ATCC10231),分別制備濃度為1×106 CFU/mL的懸液并混合后,與直徑0.5 cm PVC膜在胰蛋白胨大豆肉湯(tryptic soy broth,TSB)培養基中共培養形成混合生物膜(實驗組)。培養2、6、12、24、48、72 h時取PVC膜,激光共聚焦顯微鏡檢測生物膜厚度、單位視野菌落數,并于48 h時測量生物膜內活菌百分比、三維重建PVC膜表面生物膜圖像;掃描電鏡觀察各時間點混合生物膜結構。以單純PVC膜置于TSB培養基中培養作為對照組。 結果對照組各時間點PVC材料表面無病原菌黏附。實驗組激光共聚焦顯微鏡觀察示,培養6 h時可見菌落及生物膜形成,隨時間延長均逐漸增加,24 h時菌落達高峰,48 h時生物膜厚度達峰值。實驗組PVC膜表面菌落數比較,2、6、24 h間以及2、6 h與48、72 h間比較差異有統計學意義(P<0.05),24、48、72 h間比較差異無統計學意義(P>0.05);生物膜厚度除48、72 h間比較差異無統計學意義外(P>0.05),其余各時間點間比較差異均有統計學意義(P<0.05)。培養48 h時,混合生物膜外層活菌百分比明顯高于內層及中間層(P<0.05)。三維重建顯示混合生物膜表面凹凸不平,突起部分活菌數量較多。掃描電鏡觀察示,實驗組隨培養時間增加,PVC膜表面白色念珠菌由孢子狀逐漸伸長出現假絲狀及菌絲狀,表皮葡萄球菌黏附于白色念珠菌周圍,逐漸形成復雜的多層次網狀混合生物膜。 結論白色念珠菌-葡萄球菌混合培養可在PVC材料表面形成結構復雜的混合生物膜,激光共聚焦顯微鏡、掃描電鏡與三維圖像重建技術的結合是研究混合生物膜的理想方法。
目的 調查四川大學華西醫院抗生素相關性腹瀉(antibiotic-associated diarrhea,AAD)患者產毒艱難梭菌和白色念珠菌感染率,分析其臨床特征并調查目前臨床醫師對 AAD 患者的治療情況,為臨床診治提供參考依據。 方法 收集 2014 年 9 月—2015 年 1 月四川大學華西醫院 AAD 患者大便標本。通過聚合酶鏈反應檢測并鑒定產毒艱難梭菌和白色念珠菌,收集患者相關臨床資料并進行分析。 結果 126 例 AAD 患者中檢測出艱難梭菌 28 例,其中產毒艱難梭菌者 20 例(15.9%),A+B+型 35.7%(10/28),A-B+型 35.7%(10/28),A-B-型 28.6%(8/28)。檢出酵母菌者 54 例(42.9%),其中白色念珠菌 20.6%(26/126),光滑念珠菌 8.7%(11/126),熱帶念珠菌 7.9%(10/126),近平滑念珠菌 2.4%(3/126),釀酒酵母 1.6%(2/126),奧默柯達酵母菌 0.8%(1/126),畢赤酵母菌 0.8%(1/126)。其中 2.4%(3/126)同時檢測出產毒艱難梭菌和白色念珠菌。AAD 患者使用的抗菌藥物主要是青霉素類、碳青酶烯類、第 3 代頭孢菌素類、喹諾酮類,均伴有不同程度的基礎疾病。AAD 患者臨床上主要使用益生菌和蒙脫石散治療。 結論 AAD 患者白色念珠菌和產毒艱難梭菌感染率較高,影響因素復雜,需加強臨床醫師對 AAD 的診治意識。