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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 作者 包含"甘慧敏" 1條結果
        • 基質細胞衍生因子 1α 修飾促進大鼠脂肪干細胞遷移能力的體外實驗研究

          目的通過使用腺病毒構建基質細胞衍生因子 1α(stromal cell-derived factor 1α,SDF-1α)過表達的大鼠脂肪干細胞(rat adipose derived stem cells,rADSCs),研究 SDF-1α 修飾促進 rADSCs 遷移能力的效果。方法取 6 周齡 SPF 級 SD 大鼠脂肪組織分離培養 rADSCs,行細胞形態觀察、多向分化(成骨、成脂、成軟骨)及流式細胞儀鑒定。取第 3 代 rADSCs,采用 Transwell 細胞遷移實驗觀察和篩選出優化 rADSCs 遷移能力的外源性 SDF-1α 最佳刺激濃度;通過觀察轉染后細胞狀態和熒光表達情況篩選出 rADSCs 的最佳感染復數(multiplicity of infection,MOI)。然后取第 3 代 rADSCs 分為 4 組,A 組為單純 rADSCs;B 組于 rADSCs 中加入最佳濃度 SDF-1α 共培養;C 組為攜帶綠色熒光蛋白的腺病毒載體(recombinant adenovirus-mediated green fluorescent protein,Adv-GFP)以最佳 MOI 感染 rADSCs;D 組采用 Adv-GFP-SDF-1α 過表達腺病毒以最佳 MOI 感染 rADSCs。通過細胞計數試劑盒 8(cell counting kit 8,CCK-8)法、Transwell 細胞遷移實驗檢測內外源性 SDF-1α 優化 rADSCs 增殖和遷移的能力。結果經細胞形態觀察、多向分化檢測以及流式細胞儀檢測顯示所培養細胞為 rADSCs。經篩選,優化 rADSCs 遷移能力的外源性 SDF-1α 最佳刺激濃度為 12.5 nmol/L;Adv-GFP 腺病毒最佳 MOI 為 200,Adv-GFP-SDF-1α 過表達腺病毒最佳 MOI 為 400。CCK-8 法和 Transwell 細胞遷移實驗檢測示,與 A、C 組比較,B、D 組均可顯著提高 rADSCs 的增殖、遷移能力(P<0.05);D 組提高 rADSCs 遷移能力的作用弱于 B 組,但促進 rADSCs 增殖能力的作用強于 D 組,差異均有統計學意義(P<0.05)。結論SDF-1α 修飾 rADSCs 可明顯促進其增殖、趨化性遷移能力,可優化 ADSCs 在組織再生、創傷修復治療中的療效。

          發表時間:2020-11-02 06:24 導出 下載 收藏 掃碼
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