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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 關鍵詞 包含"瑞香素" 1條結果
        • 瑞香素聯合IGF-1對大鼠脂肪間充質干細胞成軟骨分化的影響

          目的初步研究瑞香素(dephnetin,DAP)聯合 IGF-1 基因轉染對大鼠脂肪間充質干細胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)成軟骨分化的影響。方法采用酶消化法分離培養大鼠 ADSCs。取第 3 代 ADSCs 以 IGF-1 基因轉染作為實驗組,未轉染的 ADSCs 作為對照組。兩組細胞分別用不同濃度 DAP(0、30、60、90 μg/mL)處理,培養 72 h 后采用細胞計數試劑盒 8(cell counting kit 8,CCK-8)法檢測細胞增殖活性;培養 14 d 分別采用實時熒光定量 PCR 和 Western blot 檢測Ⅱ型膠原和蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA 和蛋白表達,并行甲苯胺藍染色及Ⅱ型膠原免疫組織化學染色觀察。結果CCK-8 法檢測示,隨 DAP 作用濃度增加,對照組和實驗組細胞吸光度(A)值均逐漸增加(P<0.05);相同 DAP 濃度下,實驗組細胞A值顯著高于對照組(P<0.05)。實時熒光定量 PCR 和 Western blot 檢測示,隨 DAP 作用濃度增加,對照組細胞Ⅱ型膠原和 Aggrecan 的 mRNA 和蛋白相對表達量無明顯變化,各濃度組間差異無統計學意義(P>0.05);實驗組細胞Ⅱ型膠原和 Aggrecan 的 mRNA 和蛋白相對表達量逐漸增加,其中 60、90 μg/mL DAP 濃度組顯著高于 0 μg/mL DAP 濃度組(P<0.05)。相同 DAP 濃度下,實驗組細胞Ⅱ型膠原和 Aggrecan 的 mRNA 和蛋白相對表達量顯著高于對照組(P<0.05)。甲苯胺藍染色示,隨 DAP 作用濃度增加,對照組內和實驗組內細胞著色無明顯差異;相同 DAP 濃度下,實驗組比對照組細胞著色略深。Ⅱ型膠原免疫組織化學染色示,隨 DAP 作用濃度增加,對照組細胞的細胞質內著色無明顯差異;實驗組細胞的細胞質內著色逐漸加深,其中 60、90 μg/mL DAP 濃度組明顯深于 0 μg/mL DAP 濃度組。相同 DAP 濃度下,實驗組比對照組細胞著色明顯加深。結論DAP 對大鼠 ADSCs 增殖有一定促進作用;單獨使用 DAP 誘導大鼠 ADSCs 向軟骨細胞分化作用極微弱,但 DAP 聯合 IGF-1 基因轉染有明顯協同作用,促進 ADSCs 成軟骨分化。

          發表時間:2019-06-04 02:16 導出 下載 收藏 掃碼
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