目的 探討體外快速培養犬膀胱平滑肌細胞的方法及觀察膀胱 平滑肌細胞在脫細胞小腸黏膜下層（small intestinal submucosa, SIS）上的生長狀況， 為構建組織工程膀胱平滑肌組織提供實驗依據。方法 分別采用酶消化 法和組織塊培養法分離、獲取和原代培養犬膀胱平滑肌細胞，倒置相差顯微鏡下觀察細胞的 生長情況，透射電鏡觀察細胞的超微結構，免疫組織化學染色進行細胞鑒定。將犬膀胱平滑 肌細胞接種到SIS支架材料上，于復合培養5、7及9d 取材，行蘇木素染色、石蠟切片HE 染色和掃描電鏡觀察膀胱平滑肌細胞在SIS上的生長狀況。以細胞SIS復合培養組為實驗組 ，以膀胱平滑肌細胞為對照組，每組各設9孔，分別于接種后3、5及7d取材，酶消化后收集 細胞并計數。結果酶消化法原代培養獲取犬膀胱平滑肌細胞數量 多， 細胞生長速度快，形態良好，培養5d細胞在培養瓶底生長匯合。組織塊培養法接種3d見長 梭形的膀胱平滑肌細胞從植塊邊緣萌出，獲取的細胞數量較少。透射電鏡下見膀胱平滑肌細 胞胞質中有特征性細肌絲和細胞膜的密斑。抗α-肌動蛋白免疫組織化學染色胞漿呈棕黃色 陽性反應。膀胱平滑肌細胞在SIS表面能黏附、生長和增殖。體外復合培養5d后，膀胱平滑 肌細胞鋪滿SIS表面，呈單層細胞結構。7、9d細胞形態與5d相似。實驗組3、5及7d的細 胞計數分別為（16.85±0.79）×105、（39.74±2.16）×105及（37.15±2.02）×10 5個，對照組分別為（19.43±0.54）×105、（34.50±1.85）×105及（33.07±1.31 ）×105個。兩組5d細胞計數差異有統計學意義（P＜0.05）。結論 酶消化法原代培養膀胱平滑肌細胞可提供大量活性良好的種子細胞。SIS支持膀胱平滑 肌細胞黏附和生長，可為構建組織工程膀胱平滑肌組織提供良好支架。
目的 應用犬自體肺組織瓣直接包繞或內襯金屬支架修補胸段食管壁部分缺損，探討其胸段食管重建的可行性。方法 24只雜種犬，體重10～15 kg, 雌雄不限。將其制成食管壁長約4～6 cm、寬為環1/2～2/3周徑部分缺損的動物模型，結扎右中葉支氣管使肺萎陷，制成肺組織瓣。隨機分為2組，每組12只。實驗組，肺組織瓣直接修補食管缺損；對照組，肺組織瓣內襯金屬支架修補食管缺損。術后于第2、4、6、8、10和12周每組各處死1只犬，行大體觀察、組織學和鋇餐等檢查。結果 實驗組術后第5、7天死于吻合口瘺各1只，膿胸1只；對照組術后第6、9、23天死于吻合口瘺各1只，潰瘍穿孔2只，膿胸2只。術后實驗組發生吻合口瘺2只，無明顯食管狹窄，術后4周吻合口處有3～5層上皮細胞，術后8周肺組織瓣表面完全上皮化，電鏡觀察細胞間以緊密連接為主。對照組術后第6、9、23天發生吻合口瘺3只，潰瘍穿孔2只，支架周圍炎性反應較重，上皮細胞爬行較不完全，對肺組織瓣的壓迫較重。兩組存活8周以上的犬各1只，鋇餐透視顯示替代物中央的管腔輕度狹窄，蠕動減弱，但黏膜光滑，鋇劑通過順利，無梗阻和瘺，吻合口上端無擴張。結論 肺組織瓣能為食管上皮細胞提供良好再生環境，用以重建犬胸段食管具有可行性，但金屬支架對組織有損傷，尚需尋找合理支架材料并對替代節段性缺損進行研究。
目的 建立犬自體睪丸移植術的改進方法。方法 健康成年雄性雜種犬30只，年齡1.5~2.0歲，體重14～17 kg。切取帶腹主動脈瓣和下腔靜脈瓣的睪丸動、靜脈，并進行灌注及冷保存。將睪丸動、靜脈分別與同側髂外動、靜脈進行端側吻合，行自體睪丸移植術30只。對睪丸灌注、帶瓣睪丸血管的切取及血管吻合等關鍵步驟進行了改進。觀察術后犬生存情況，對移植的睪丸進行影像學及組織學檢查，測定犬術后不同時間點的性激素水平。結果 自體睪丸移植30只，成功27只，成功率90%。其中睪丸熱缺血4.5±0.9 min，冷缺血50.0±10.0 min，睪丸血管吻合35.5±5.5 min，總手術時間3.5±0.5 h。數字減影動脈造影（digital subtraction arteriography, DSA）證實成活睪丸血供良好；組織學檢查顯示精曲小管的各期生精細胞形態無異常，層次及數量無減少，管腔內有少量精子；術后各時間點，黃體生成素較術前明顯升高，差異有統計學意義（P＜0.05），睪酮及卵泡刺激素與術前差異均無統計學意義（P＞0.05）。結論 建立了改進后穩定而可行的犬自體睪丸移植的手術方法，為研究人睪丸移植提供了可靠的依據。