目的 探討M2型巨噬細胞/小膠質細胞來源線粒體移植治療小鼠脊髓損傷的效果。方法 取小鼠小膠質細胞(BV2細胞)分別采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、IL-4誘導其向M1型(M1組)及M2型(M2組)極化,以未作任何干預的細胞作為對照(M0組);光鏡下觀察細胞形態,免疫熒光染色 [精氨酸酶 1(Arginase 1,Arg-1)] 及流式細胞術 [誘導型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、Arg-1] 鑒定極化后細胞類型,并通過MitoSox Red與DCFH-DA染色評估細胞線粒體功能。使用差速離心法提取M2組BV2細胞來源線粒體,Western blot法測量氧化磷酸酶鏈(oxidative phosphorylation,OXPHOS)內各相關復合物(復合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ與Ⅴ)的表達水平,并與M2型BV2細胞比較,以評估是否獲得所需線粒體。取36只雌性C57BL/6小鼠隨機分為3組(n=12),其中假手術組僅切除T10椎板,脊髓損傷組及線粒體移植組制備T10脊髓損傷模型后,于損傷節段分別注射線粒體儲存液及M2型BV2細胞來源線粒體(100 μg)。術后采用BMS(Basso Mouse Scale)評分評價小鼠后肢運動功能,取材行免疫熒光染色(iNOS)、LEA-FITC染色及ELISA檢測(VEGFA)。結果 極化誘導后,M1組及M2組BV2細胞分別呈現M1型及M2型巨噬細胞特異性形態改變;免疫熒光染色示M2組的M2型巨噬細胞標志物Arg-1染色陽性表達高于M0組及M1組(P<0.05);流式細胞術檢測示M1組的M1型巨噬細胞標志物iNOS表達高于M0組及M2組(P<0.05),M2組Arg-1表達高于M0及M1組(P<0.05)。MitoSox Red及DCFH-DA染色示M2組熒光強度均低于M1組(P<0.05),與M0組差異無統計學意義(P>0.05)。Western blot法鑒定成功提取M2型BV2細胞來源線粒體。動物實驗示,線粒體移植組術后21、28 d BMS評分高于脊髓損傷組(P<0.05);術后14 d損傷局部iNOS陽性細胞數低于脊髓損傷組(P<0.05),但仍高于假手術組(P<0.05); LEA陽性細胞較其余兩組增多;VEGFA表達亦高于其余兩組(P<0.05)。 結論 M2型巨噬細胞/小膠質細胞來源線粒體可通過促進損傷局部血管新生并抑制炎癥性M1型巨噬細胞極化,促進小鼠脊髓損傷修復。