目的優化HSP65-MUC1融合蛋白的中試生產工藝，并建立穩定的生物學活性檢測方法。 方法通過發酵技術獲得大量表達HSP65-MUC1的大腸桿菌，高壓均質機破菌獲得上清液，經不同濃度的飽和硫酸銨、疏水層析、離子交換層析三步純化后，以期獲得高純度、高質量的融合蛋白HSP65-MUC1；利用流式細胞儀檢測HSP65-MUC1作用后，人外周血來源的樹突狀細胞（DC）表達CD86分子的能力。 結果含有pET28a-HSP65-MUC1重組質粒的大腸桿菌BL21（DE3）能有效表達目的蛋白，10 g發酵菌體經飽和硫酸銨沉淀、phenyl sepharose FF層析柱和Q FF離子交換層析柱純化后，可獲得413.7 mg、純度高達96%的目的蛋白；同時與陰性對照相比（10.13%±0.89%），純化的HSP65-MUC1能顯著提高DC細胞表面CD86分子的表達（29.98%±1.02%）。 結論HSP65-MUC1的中試生產工藝得到了有效的優化，同時鑒定了其生物學活性，從而為臨床研究提供基礎。