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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 作者 包含"林田" 1條結果
        • BMP-2 和地塞米松對人牙髓細胞增殖和分化的影響

          目的 通過將 BMP-2 和地塞米松分別及聯合作用于體外培養的人牙髓細胞,探討兩者對牙髓細胞增殖和分化能力的影響。 方法 取 25 歲以下患者因正畸原因拔出的無病變牙牙髓組織,采用組織塊法體外培養人牙髓細胞并傳至第3代,行波形蛋白和角蛋白免疫細胞化學染色鑒定。取生長狀況良好的第 3~5 代牙髓細胞分為 4 組,A、B、C 組分別加入 100 ng/mL BMP-2、1×10–8 mol/L 地塞米松、100 ng/mL BMP-2 以及 1×10–8 mol/L 地塞米松,D 組不添加誘導劑作為對照組。培養 1、3、5、7 d 繪制細胞生長曲線;培養 5、7 d 行 RT-PCR 檢測成牙本質細胞形成標記基因表達情況,包括牙本質涎磷蛋白(dentin sialophoshoprotein,DSPP)、牙本質基質蛋白 1(dentin matrix protein 1,DMP-1)、ALP;培養 14 d 行 ALP 染色并計算陽性染色面積占總面積比值;培養 21 d 行茜素紅染色并測定 562 nm 波長處吸光度(A)值。 結果 成功分離培養呈長梭形的人牙髓細胞,經波形蛋白和角蛋白免疫細胞化學染色鑒定顯示符合牙髓細胞的生物學特征。隨培養時間延長,各組細胞均逐漸增加,5 d 時達峰值,7 d 時降至 3 d 水平。培養 5 d,A、B、C 組細胞顯著多于 D 組,C 組多于 A 組,A 組多于 B 組,比較差異均有統計學意義(P<0.05)。RT-PCR 檢測示,培養 5 d,A、B、C 組 ALP、DSPP、DMP-1 mRNA 相對表達量均顯著高于 D 組,C 組顯著高于 A、B 組,差異均有統計學意義(P<0.05);A、B 組間比較差異無統計學意義(P>0.05)。培養 7 d,除 A、B、C 組 DSPP mRNA 相對表達量顯著高于 D 組(P<0.05)外,其余各組間各基因相對表達量比較差異均無統計學意義(P>0.05)。培養 14 d ALP 染色示,各組可見紫黑色沉淀,其中 C 組著色程度最深;經半定量測定,C 組陽性染色面積占總面積比值顯著高于 A、B、D 組,A、B 組高于 D 組,差異均有統計學意義(P<0.05);A、B 組間差異無統計學意義(P>0.05)。培養 21 d 茜素紅染色示,C 組礦化結節呈片狀大面積分布,A、B 組呈散在分布,D 組無礦化結節形成;各組間A 值比較差異均有統計學意義(P<0.05)。 結論 BMP-2 對牙髓細胞的增殖作用比地塞米松更明顯,兩者對牙髓細胞分化作用差異不明顯;但與單獨應用相比,兩者聯合應用對牙髓細胞的增殖和分化有明顯促進作用。

          發表時間:2017-06-15 10:04 導出 下載 收藏 掃碼
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