目的 觀察用碳化二亞胺 [1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride chemistry,EDC] 法共價結合血管內皮細胞生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)+堿性成纖維細胞生長因子(basicfibroblast growth factor,bFGF)或VEGF的膠原補片對接種于其上的人骨髓間充質干細胞(human bone marrow mesen-chymal stem cells, hBM-MSCs) 作用的體內外表現。 方法 將EDC法活化的膠原補片作對照組,將活化后與VEGF或VEGF+bFGF共價結合的膠原補片作實驗組(VEGF組、VEGF+bFGF組),以hBM-MSCs作種子細胞(0.5×106/補片),構建工程化心肌片(engineered heart tissue,EHT)。利用MTT法評價hBM-MSCs在3種支架上的體外增殖情況;結扎雄性SD大鼠左冠狀動脈前降支制作心肌梗死后室壁瘤模型,以構建的3種EHT分別行左心室重建術。術后4周取材,抗α平滑肌動蛋白(α-SMA)免疫熒光染色觀察EHT功能血管再生情況,抗人線粒體抗體(anti-h-mitochondria)免疫熒光染色觀察移植細胞生存情況。 結果 (1) hBM-MSCs在VEGF組及VEGF+bFGF組的增殖在移植后2 d、4 d均明顯優于對照組(P<0.05)。(2) EHT移植后4周,抗α-SMA免疫熒光染色證明VEGF組及VEGF+bFGF組新生小動脈密度高于對照組(P<0.05); (3)抗h-mitochondria抗體免疫熒光染色示VEGF組及VEGF+bFGF組移植細胞的生存率均高于對照組(P<0.05); (4)相關性分析顯示,補片上存留的移植細胞數目與補片新生小動脈密度存在明顯的正相關性(r 2=0.99,P=0.02)。 結論 共價結合VEGF或VEGF+bFGF的膠原補片可促進hBM-MSCs的體外增殖;可通過改善局部功能血管的形成改善移植細胞的存活率。