目的探索氧化應激活化RAW264.7巨噬細胞對MC3T3-E1成骨細胞遷移、增殖及成骨基因表達的影響。 方法取MC3T3-E1細胞系及RAW264.7細胞系，分別培養傳至第7代進行實驗。利用不同濃度（0、25、50、100 μmol/L）H2O2刺激RAW264.7細胞，MTS檢測培養1、3、6 h后細胞增殖率，采用超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）檢測試劑盒檢測培養1 h時細胞內SOD含量，篩選H2O2引起RAW264.7細胞氧化應激的最佳濃度和作用時間，并對應收集RAW264.7細胞（加或不加H2O2處理）24 h上清液。取第7代MC3T3-E1細胞，分別以100 μL無血清DMEM培養基（A組）、未氧化應激RAW264.7細胞上清液（B組）、氧化應激RAW264.7細胞上清液（C組）培養，采用MTS法檢測細胞增殖情況，行劃痕實驗檢測細胞遷移能力；另取細胞分為4組，空白對照組，以完全培養基培養；陽性對照組，以含50 μg/mL維生素C及10nmol/L的β甘油磷酸鈉的完全培養基進行成骨誘導培養；正常對照組，以含50 μg/mL維生素C及10nmol/L的β甘油磷酸鈉的完全培養基及未氧化應激RAW264.7細胞上清液培養；實驗組，以含50 μg/mL維生素C及10nmol/L的β甘油磷酸鈉的完全培養基及氧化應激RAW264.7細胞上清液培養。培養3、7、14 d，RT-PCR檢測細胞內成骨相關基因ALP、Runx2、骨橋蛋白（osteopontin，OPN）、Ⅰ型膠原蛋白（collagen typeⅠ，COL-Ⅰ）、骨鈣素（osteocalcin，OC）、骨唾液酸蛋白（bone sialoprotein，BSP）表達水平。 結果MTS和SOD檢測結果顯示：25μmol/L H2O2刺激1h為構建RAW264.7細胞氧化應激模型最佳濃度和作用時間。細胞生長檢測顯示：1、2、3 d B、C組細胞增殖率顯著高于A組（P＜0.05），C組低于B組，其中2、3 d時組間比較差異有統計學意義（P＜0.05）。劃痕實驗顯示12h時B、C組MC3T3-E1細胞遷移顯著快于A組，C組快于B組，細胞遷移距離比較差異有統計學意義（P＜0.05）；24h時B、C組劃痕已被細胞爬滿。除3 d外，實驗組各時間點ALP、Runx2、OC、BSP mRNA相對表達量均較陽性對照組明顯降低，OPN、COL-ⅠmRNA相對表達量較空白對照組降低，差異有統計學意義（P＜0.05）。 結論H2O2構建RAW264.7細胞氧化應激模型的最佳濃度為25μmol/L、作用時間為1 h。氧化應激活化RAW264.7巨噬細胞上清液能促進MC3T3-E1成骨細胞遷移、抑制其增殖及成骨相關基因的表達。