【摘要】 目的 優選出紫冰栓中紫草油的最佳提取工藝。 方法 以左旋紫草素的含量為工藝考察指標,使用高效液相色譜建立左旋紫草素含量測定方法,采用L9(34)正交試驗法優化紫草油的提取條件。 結果 選用紫草,加8倍菜籽油,溫度140 ℃,加熱0.5 h為最優提取工藝。 結論 優選的提取工藝合理、可行,質量可控。【Abstract】 Objective To optimize the preparation process of extracting arnebiae oil from Zibing suppository. Methods The optimum preparation process of extracting arnebiae oil was investigated by L9(34) orthogonal design as the shikonin content index. Results The optimum technical condition: added eight times rape oil and cooked for half an hour with the temperature of 140 ℃. Conclusion The optimized preparation procedure is feasible and the quality of the product can be controled.
目的:觀察艾灸聯合蘆薈、紅花、當歸酒精提取液治療輸液并發靜脈炎的臨床療效。方法:將60例靜脈炎患者隨機分為兩組,觀察組采用艾灸聯合蘆薈、紅花、當歸酒精提取液治療,對照組采用50%硫酸鎂治療,并進行療效對比。結果: 觀察組痊愈22例、顯效6例、有效2例、無效0例,有效率100%;對照組痊愈13例、顯效8例、有效3例、無效6例,有效率80%;兩組相比差異有統計學意義(Plt;0005)。結論:艾灸聯合蘆薈、紅花、當歸酒精提取液具有活血化瘀、散結止痛、抗炎解毒、促進損傷組織細胞修復作用。
目的 探討銀杏葉提取物(GBE)對COPD大鼠氣道及肺血管重塑的干預作用。方法 Wistar大鼠40只,隨機分為正常對照組(A組)、造模不干預組(B組)、造模GBE早期干預組(C組)和造模GBE后期干預組(D組)。B、C和D三組采用慢性煙熏+脂多糖氣管內注射建立COPD模型,C和D組分別在1~14 d和29~42 d腹腔內注射GBE(0.40 mL/kg),43 d后對各組大鼠肺臟行病理學檢測。結果 B、C和D三組均有COPD特征性改變,但程度不同。A、B、C和D各組間肺泡平均面積、標準肺泡數比較均有顯著差異(P均lt;0.01)。C和D組管壁結構輕度改變,支氣管平滑肌厚度/支氣管壁厚度比值、支氣管壁面積/支氣管面積比值與A、B兩組比較均有顯著差異(P均lt;0.01)。C和D組血管平滑肌細胞輕度增生,管壁輕度增厚,血管平滑肌細胞厚度/血管壁厚度比值、血管壁面積/血管面積比值與A、B兩組比較均有顯著差異(P均lt;0.01)。結論 GBE對COPD大鼠模型氣道重塑及肺血管重塑有抑制作用。
目的 觀察香煙煙霧提取物( CSE) 對轉化生長因子β1 ( TGF-β1 ) 刺激的人肺成纖維細胞( HLF) 增殖及分泌過氧化氫( H2O2 ) 的影響, 探討CSE 可能參與肺纖維化發病的機制。方法 將體外分離培養的HLF 細胞分為對照組和TGF-β1 ( 5 ng/mL) 刺激組, 用不同濃度的CSE( 0% 、2. 5% 、5% 、10% ) 進行干預。應用Brdu ELISA 法檢測細胞增殖; 熒光分光光度法測定細胞分泌的H2O2 ; 免疫熒光標記分泌的H2O2 和細胞α-平滑肌肌動蛋白( α-SMA) 表達。結果 TGF-β1 刺激組細胞經免疫熒光標記顯示α-SMA 陽性表達, 說明HLF 在TGF-β1 刺激下轉化為肌成纖維細胞( MF) 。TGF-β1刺激組中, 與0% 濃度CSE 比較, 2. 5%、5% 濃度的CSE 干預可以顯著促進細胞增殖( P lt; 0. 01 或0. 05) , 10% 濃度的CSE 干預抑制細胞增殖( P lt;0. 01) 。對照組中, 與0% 濃度CSE 比較, 2. 5%、5% 、10% 濃度的CSE 均使細胞增殖顯著減弱( P lt;0. 01 或P lt;0. 05) , 并呈劑量依賴性。TGF-β1 刺激HLF細胞能產生一定量的H2O2, CSE 干預后分泌產生的H2O2 明顯增加( P lt; 0. 01) , 經NADPH 氧化酶抑制劑二苯基碘( DPI) 預處理后檢測不到H2O2。免疫熒光標記顯示分泌的H2O2 來源于α-SMA 陽性表達的MF 細胞。結論 低濃度的CSE 能夠促進TGF-β1 刺激HLF 細胞轉化的MF細胞增殖, 并顯著增加MF 細胞向細胞外分泌H2O2 , 提示CSE 可能通過氧化應激參與肺纖維化的發生、發展。
目的 通過研究鋅指Krüppel 樣轉錄因子2( Klf2) 及紅系衍生核因子相關因子2 ( Nrf2) /BTB-CNC 異體同源體1( Bach1) 在經香煙煙霧提取物( CSE) 刺激的大鼠氣道上皮細胞中的表達, 了解其感受氧化應激對靶基因γ-谷氨酰半胱氨酸合酶( γ-GCS) 的調控作用。方法 采用酶消化法提取大鼠原代氣管-支氣管上皮細胞, 并用10% CSE 干預細胞6 h, 收集細胞, 雙酶法檢測γ-GCS 活性; 通過免疫細胞化學法觀察Nrf2 /Bach1 的核轉位; 采用Western blot 和RT-PCR 技術研究細胞中 Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS 的蛋白及mRNA 表達。結果 大鼠氣管-支氣管上皮細胞經CSE 誘導后其 γ-GCS活性明顯增高。免疫細胞化學結果顯示Nrf2 經CSE 刺激后出現由核外向核內的轉位, Bach1 經CSE 刺激后出現由核內向核外的轉位。Western blot 結果顯示CSE 處理組中Klf2、Nrf2、Bach1、 γ-GCS蛋白水平較對照組顯著升高( Plt;0.05) ; RT-PCR 結果顯示CSE 處理組中Klf2、Nrf2、Bach1、 γ-GCS mRNA 水平較對照組顯著升高( Plt;0.05) 。直線相關分析表明γ-GCS 蛋白表達與Klf2、Nrf2、 Bach1 呈正相關( Plt;0.05) 。結論 CSE 可能通過轉錄因子Klf2、Nrf2、Bach1 調節γ-GCS 的表達。
目的 探討蘇木水提取物在心臟移植中的免疫抑制作用及其機制。方法 以Wistar大鼠為供者、SD大鼠為受者,建立異位(腹腔)心臟移植模型。96只SD大鼠隨機分為4組,每組24只。對照組:術前給橄欖油(8ml/kg·d);A組:給環孢菌素A(5mg/kg·d);B組:給蘇木水提取物(37.5g/kg·d);C組:給蘇木水提取物(25g/kg·d)+半量環孢菌素A(2.5mg/kg·d)。術后觀察移植心的存活時間,心肌組織學和超微結構改變,術后3d和7d用逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT—PCR)檢測移植心臟白細胞介素-2(IL-2)信使核糖核酸(mRNA)、白細胞介素-10(IL-10)mRNA的表達,用酶聯免疫吸附測定法(ELISA)檢測血清IL-2和IL-10的含量。結果 與對照組比較,A組、B組、C組移植心存活時間延長(P〈0.01),淋巴細胞浸潤和心肌壞死程度較對照組輕,心肌IL-2mRNA表達較對照組減弱(P〈0.01),IL-10mRNA表達較對照組增強(P〈0.01)。A組術后3d和7d,B組、C組術后3d血清IL-2水平較對照組明顯降低(P〈0.01),A組術后7d,B組術后3d血清IL-10較對照組增高(P〈0.05)。結論 蘇木水提取物在心臟移植后具有免疫抑制作用,可引起Th1向Th2免疫偏移。
目的 了解神經再生條件液(never regeneration conditioned fluid,NRCF)中蛋白質成分組成及相對分子質量為220×103的蛋白帶中是否存在一類新的尚未知的神經活性因子。方法 新西蘭大白兔25只,體重1.8~2.5 kg,取坐骨神經建立神經再生室模型。術后1周采集NRCF,采用凝膠過濾法分離NRCF中蛋白質,主要分離相對分子質量為220×103的蛋白帶,應用自然聚丙烯酰胺凝膠電泳(native-polyacrylamide gel electrophoresis,Native-PAGE)法檢測其相對分子質量。并對取得的相對分子質量為220×103(a峰)和(20~40)×103(c峰)的蛋白帶,分別應用已知的神經活性因子抗體:抗神經生長因子(nerve growth factor, NGF)抗體、抗膠質細胞源性神經營養因子(glial cell-derived neurotrophic factor, GDNF)抗體、抗腦源神經營養因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)抗體、抗神經營養素3(neurotrophin 3,NT-3)抗體、抗NT-4抗體、抗睫狀神經營養因子(ciliang neurotrophic factor,CNTF)抗體,采用Western blot免疫印跡法和ELISA檢測,觀察抗原抗體反應。結果 經凝膠過濾法分離的NRCF蛋白質,多集中在相對分子質量為(20~40)×103和220×103。相對分子質量為(20~40)×103蛋白帶中神經營養因子與抗NGF、抗BDNF、抗NT-3、抗CNTF等抗體反應,相對分子質量為220×103的蛋白帶所含神經營養因子僅與抗NT-4抗體反應。結論 NRCF中相對分子質量為220×103的蛋白帶僅與抗NT-4抗體反應,且生物活性遠強于NT-4,該蛋白帶中可能存在一類新的神經活性因子。
資料提取表是原始研究與系統評價最終報告之間的橋梁,是資料分析的基礎,直接關系到系統評價的結果結論,在系統評價中有著重要的地位和作用。Cochrane系統評價對資料提取表有嚴格要求,本文介紹筆者在進行Cochrane系統評價時設計資料提取表的一些經驗和體會。
目的 比較評價磁珠法、柱子吸附法和煮沸裂解法3種不同的核酸提取方法對淋病奈瑟菌(淋球菌)DNA提取效率的差異。 方法 對已確診的淋球菌培養基挑取20個小菌落制成懸液,做1︰1~1︰100 000稀釋度稀釋,分別使用磁珠法、柱子吸附法和煮沸裂解法進行DNA提取,用實時熒光定量PCR對其提取效率進行評價。 結果 在不同濃度淋球菌的DNA提取中,以磁珠法的敏感性和重復性最高,而柱子吸附法和煮沸裂解法次之,<1×105 copies /mL以下的拷貝數,3種DNA提取方法之間重復性和敏感性差異明顯,磁珠法的提取效率最高,柱子吸附法次之,煮沸裂解法最差;>1×105 copies/mL的細菌拷貝數的樣本,3種方法差異隨濃度增高不斷縮小。 結論 磁珠法提取淋球菌DNA的效率、敏感性和重復性最高,在實際臨床科研工作中,各實驗室可根據自身實際情況選擇不同的DNA提取方法。
目的 探討銀杏葉提取物與雙嘧達莫復方制劑銀杏達莫注射液對冠心病的療效及安全性。 方法 2007年-2009年確診冠心病患者106例,隨機分為對照組和治療組各53例。兩組常規給予吸氧,硝酸酯類藥物,受體阻滯劑,鈣拮抗劑,抗血小板制劑等治療,治療組在常規治療的基礎上應用銀杏達莫注射液治療2周。檢測治療前后心絞痛控制率、心電圖改善等指標。 結果 治療組總有效率為88.7%(47/53),對照組總有效率為67.9%(36/53),兩組比較有統計學意義(P<0.05)。治療組心電圖總有效率為66.0%(35/53),高于對照組(23/53,43.4%),兩組間有統計學意義(P<0.05)。治療組發生靜脈炎1例,實驗室檢查發現無明顯異常。 結論 銀杏達莫治療冠心病不穩定性心絞痛有效且安全。