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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 作者 包含"戴越" 1條結果
        • CDM3對人誘導多能干細胞與覆有基質膠的聚己內酯共培養制作心肌補片的影響

          目的通過標準的化學定義和基于小分子誘導方案(CDM3)促進人誘導多能干細胞心肌向分化,初步制備心肌補片,為進一步通過其他體外實驗研究心肌補片成熟度以及體內動物實驗研究其安全性提供實驗數據和理論依據。方法復蘇、培養和鑒定人誘導多能干細胞(human induced pluripotent stem cells,hiPSCs)后,將hiPSCs接種到覆有基質膠的聚己內酯(polycaprolactone,PCL)上,24 h后在熒光顯微鏡下通過DAPI熒光觀察細胞生長情況,并通過OCT4熒光進行hiPSCs干性鑒定,固定后進行電鏡掃描觀察補片表面細胞形態。培養的第1 d、3 d、5 d、7 d分別通過CCK-8法測定細胞活力,繪制生長曲線觀察細胞生長增殖情況。hiPSCs與PCL共培養24 h后,分為對照組、CDM3組,繼續培養6 d,第8 d在熒光顯微鏡下通過DAPI熒光觀察細胞生長情況,并通過OCT4熒光進行hiPSCs干性鑒定,通過cTnT和α-actin進行心肌細胞標志物鑒定。結果hiPSCs與PCL共培養24 h免疫熒光顯示:OCT4發出綠色熒光,hiPSCs在PCL支架上保持干性。DAPI發出藍色熒光,細胞呈克隆生長,細胞形態均一。掃描電鏡顯示,hiPSCs在覆有基質膠的PCL上黏附生長,細胞輪廓清晰可見,形態正常。CCK-8法細胞活力測定繪制生長曲線顯示:hiPSCs在覆有基質膠的PCL支架上增殖生長。對照組與CDM3組繼續培養6 d后,免疫熒光顯示:對照組hiPSCs高表達干細胞干性標志物OCT4,不表達心肌標志物cTnT和α-actin;CDM3組明顯表達心肌標志物cTnT和α-actin,不表達干細胞干性標志物OCT4。 結論hiPSCs可以在覆有基質膠的PCL支架上增殖生長,在CDM3作用下,促進hiPSCs分化為心肌樣細胞,初步制成心肌補片,為進一步臨床治療心肌梗死提供一種更好的治療方法。

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