目的探討基于肌肉脫細胞基質（acellular musclar matrix，AMM）制備雙重交聯可注射水凝膠用于促進肌母細胞增殖和成肌分化的可行性。方法先將透明質酸通過高碘酸鈉氧化處理并甲基化制備甲基丙烯酰胺氧化透明質酸（methacrylamidated oxidized hyaluronic acid，MOHA）水凝膠；再采用洗滌酶法獲得AMM，并經氨基活化以制備氨基化AMM（aminated AMM，AAMM）。將MOHA水凝膠和AAMM通過席夫堿反應和紫外光交聯，制備一種雙重交聯可注射的MOHA/AAMM水凝膠。采用傅立葉變換紅外吸收光譜儀（Fourier transform infrared spectroscopy，FTIR）分別對MOHA、AAMM和MOHA/AAMM水凝膠樣品進行表征；通過手動注射和紫外光交聯分別檢測MOHA/AAMM水凝膠的可注射性和成膠性能；采用力學測試檢測水凝膠的流變性能和楊氏模量，并將水凝膠浸沒于PBS中15 d檢測其降解性能。通過免疫熒光染色和ELISA法檢測水凝膠的活性成分。將MOHA和MOHA/AAMM水凝膠分別與C2C12肌母細胞體外共培養9 d，通過活/死細胞染色和細胞計數試劑盒8（cell counting kit 8，CCK-8）法檢測水凝膠促進肌母細胞的增殖作用，通過免疫熒光染色和定量聚合酶鏈反應（real time quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR）檢測水凝膠促進肌母細胞的成肌分化能力。結果FTIR圖譜示MOHA/AAMM水凝膠成功制備，且表現出良好的可注射性和成膠能力。相較于MOHA水凝膠，MOHA/AAMM水凝膠具有更高的黏度和楊氏模量，更緩慢的降解速率，并且含有更多膠原蛋白（包括Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原）和生物活性因子（包括EGF、FGF-2、VEGF和IGF-1），差異有統計學意義（P<0.05）。活/死細胞染色和CCK-8檢測示，MOHA/AAMM水凝膠中C2C12肌母細胞隨培養時間延長活細胞明顯增多且死細胞減少，各時間點與MOHA組比較差異有統計學意義（P<0.05）。免疫熒光染色和RT-qPCR檢測示，相較于MOHA水凝膠，MOHA/AAMM水凝膠中IGF-1沉積量和成肌相關基因（肌原蛋白、肌鈣蛋白T和肌球蛋白）表達量顯著提高，差異有統計學意義（P<0.05）。 結論基于AMM制備的MOHA/AAMM水凝膠可以促進肌母細胞增殖和成肌分化，為肌肉組織工程提供一種新的雙重交聯可注射水凝膠。