目的 探討核定位信號肽偶聯核激酶底物短肽（nucleus localization signal linked nucleic kinase substrate short peptide，NNS）修飾殼聚糖（chitosan，CS）（NNSCS），介導人微小 RNA-140（microRNA-140，miR-140）基因轉染，對體外培養的兔關節軟骨細胞的作用。 方法 將重組質粒 GV268-miR-140 和空質粒 GV268 分別與 NNSCS 復合形成 NNSCS/pDNA 納米復合物。取新生新西蘭大耳白兔膝關節軟骨，采用胰蛋白酶和膠原酶聯合消化法分離培養原代軟骨細胞。取第 2 代軟骨細胞分為 3 組：正常細胞對照組（A 組）、NNSCS/GV268 空質粒轉染組（B 組）、NNSCS/GV268-miR-140 轉染組（C 組），B、C 組細胞分別以 NNSCS/GV268 及 NNSCS/GV268-miR-140 納米復合物瞬時轉染。轉染后，實時熒光定量 PCR（real-time fluorescent quantitative PCR，RT-qPCR）檢測外源 miR-140 的表達；Annexin Ⅴ-FITC/PI 雙染色法及 MTT 法分別檢測外源 miR-140 對軟骨細胞凋亡及增殖活力的影響；RT-qPCR 檢測軟骨細胞中 Sox9、聚集蛋白聚糖（Aggrecan）、組蛋白去乙酰化酶 4 （histone deacetylase 4，Hdac4）基因表達。 結果 RT-qPCR 檢測示，C 組外源 miR-140 表達水平較 A、B 組明顯上調（P<0.05）。與 A、B 組比較，C 組軟骨細胞凋亡率明顯降低，細胞增殖活力明顯增加，細胞內 Sox9、Aggrecan 基因相對表達量明顯上調、Hdac4 基因相對表達量明顯下調（P<0.05）；A、B 組間以上指標比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。 結論 NNSCS 可攜帶外源基因進入軟骨細胞并高效表達，高表達的 miR-140 能提高體外培養軟骨細胞的生物活性，為其用于治療軟骨損傷性疾病提供了實驗依據。