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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 作者 包含"彭明慧" 1條結果
        • 過氧化氫誘導慢性氧化應激參與小膠質細胞衰老的作用及機制

          目的 探索過氧化氫(hydrogen peroxide, H2O2)誘導慢性氧化應激在小膠質細胞衰老中的作用。方法 選擇購自 ATCC 的 10 代以內 BV2 小膠質細胞,采用 0、50、100、200 μmol/L 不同濃度的 H2O2 處理 BV2 小膠質細胞。根據 H2O2 使用濃度將其分為對照組、H2O2-50 μmol/L 組、H2O2-100 μmol/L 組、H2O2-200 μmol/L 組。應用 CCK8 細胞增殖實驗測定細胞增殖,通過衰老相關 β 半乳糖苷酶(senescence associated β galactosidase, SA-β-gal)染色實驗和實時熒光定量聚合酶鏈反應檢測衰老相關周期蛋白分子 p16、p21、p53 及衰老相關分泌表型基因[白細胞介素-1β(interleukin-1 beta, IL-1β)、轉化生長因子 β(transforming growth factor-β, TGF-β)、基質金屬蛋白酶 9(matrix metalloprotein 9, MMP9)]的表達變化來測定細胞衰老。結果 在誘導過程中,H2O2-200 μmol/L 對 BV2 小膠質細胞損傷較大,因此未進行后續檢測。最終收集對照組、H2O2-50 μmol/L 組和 H2O2-100 μmol/L 組細胞。對照組、H2O2-50 μmol/L 組、H2O2-100 μmol/L 組的細胞存活率(F=46.176,P<0.001)、SA-β-gal 染色陽性率(F=553.1,P<0.001)比較,差異均有統計學意義。H2O2-50 μmol/L 組細胞存活率無明顯改變(P>0.05),H2O2-100 μmol/L 組細胞存活率明顯下降(P<0.001)。H2O2-50 μmol/L 組、H2O2-100 μmol/L 組細胞 SA-β-gal 染色陽性率均升高(P<0.001),且 H2O2-100 μmol/L 組 SA-β-gal 染色陽性率高于 H2O2-50 μmol/L 組(P<0.001)。在 50、100 μmol/L H2O2 誘導下,p16、p21、p53 的 mRNA 水平均升高(P<0.05),IL-1B、TGF-β、MMP9 mRNA 均上調(P < 0.05),且 H2O2-100 μmol/L 組更明顯(P < 0.05)。結論 使用 100 μmol/L H2O2 誘導 8 d 可成功建立 BV2 小膠質細胞衰老模型,其機制可能與促進 p16、p21、p53、IL-1β、TGF-β、MMP9 分泌有關。

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