目的 探討長時間不同強度負壓對兔 BMSCs 成骨分化及增殖的影響。 方法 取 4～6 月齡新西蘭大白兔股骨骨髓，采用密度梯度離心法分離培養 BMSCs，并行流式細胞術及成骨誘導鑒定。取第 3 代細胞采用成骨誘導培養基誘導培養，并加載不同強度負壓，分別為 0、75、150 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）（對照組、低負壓組、高負壓組）；負壓時間為 30 min/h。倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態，繪制細胞生長曲線；誘導 3、7、14 d 采用 ELISA 法檢測細胞 ALP 活性，14 d 采用實時熒光定量 PCR 及 Western blot 檢測各組Ⅰ型膠原、骨鈣素（osteocalcin，OC）基因及蛋白表達。 結果 經流式細胞儀及成骨誘導鑒定所培養細胞為 BMSCs；第 3 代 BMSCs 為典型的長梭形和不規則形。誘導 4 d，高負壓組細胞顯著少于對照組及低負壓組（P<0.05），低負壓組與對照組比較差異無統計學意義（P>0.05）；5～7 d 3 組間細胞數比較差異均有統計學意義（P<0.05），負壓越大細胞增殖受抑制越明顯。ALP 活性檢測示，誘導 3 d 各組間比較差異無統計學意義（P>0.05）；7 d，僅高負壓組與對照組比較差異有統計學意義（P<0.05）；14 d，3 組間比較差異均有統計學意義（P<0.05），負壓越大 ALP 活性越高。實時熒光定量 PCR 及 Western blot 檢測示，低負壓組及高負壓組Ⅰ型膠原和 OC mRNA 及蛋白表達量均顯著高于對照組，高負壓組高于低負壓組，比較差異均有統計學意義（P<0.05）。 結論 隨負壓增高，兔 BMSCs 成骨能力逐漸增強，而細胞增殖能力逐漸受抑制。