摘要:目的：探討皮膚平滑肌肉瘤的臨床病理特點和診斷要點及預后。方法:對2例皮膚平滑肌肉瘤組織病理學、免疫組化觀察,并復習相關文獻。結果: 例1為皮下平滑肌肉瘤,具有結節型的生長形態,瘤細胞豐富,異型性較大,核分裂活躍；例2為真皮平滑肌肉瘤,具有彌漫型的生長形態,瘤細胞較少,分化好,核分裂象不明顯。免疫組化2例均表達SMA、MSA、Vim,1例灶性表達Desmin。2例隨訪迄今均無復發及轉移。結論:皮膚平滑肌肉瘤少見,可分為真皮和皮下兩種類型,兩者具有不同的組織起源和預后特點,我們要注意區分,診斷除核分裂象計數外,尚需進行綜合評估,對某些病例建議采用惡性潛能未定的平滑肌肉瘤的診斷,治療首選外科手術切除。Abstract: Objective: To investigate the clinic pathological features diagnosis main point and prognosis of cutaneous leiomyosarcoma（CLMS）.Methods:Histopathology,immunohistochemical stainings observation were analyzed in two cases of CLMS and the related literatures were reviewed. Results:Case 1 was subcutaneous leiomyosarcoma with tubercular growth pattern,rich tumor cell,big heterogeneous type,active mitotic；Case 2 was dermis leiomyosarcoma with diffuse growth pattern,few tumor cell,well differentiated,no more mitotic. Immunohistochemically,the two cases reacted positively with smooth muscle action、MSA and Vim,Case 1 also expressed desman partially. The two cases were revisited to date,no recurrences and metastases.Conclusion:Cutaneous leiomyosar coma is a rare tumor,subdivided into dermis and subcutaneous forms because of their different tissue origins and prognosis features. We must discriminate between them. Diagnosis need synthetic appraisal besides mitotic counts and “smooth muscle tumor of uncertain malignant potential” should be used for diagnosis of certain cases.Primary treatment for cutaneous leiomyosarcoma is surgical excision.
目的 研究RNA干擾(RNAi)對兔血管平滑肌細胞（VSMCs）bcl-2基因表達的干擾效應。方法 用脂質體法將構建的裝載靶向bcl-2基因小干擾性RNA(siRNA)的表達載體(pshRNA-bcl-2質粒)轉染VSMCs（基因組），以轉染空載體的細胞和加DMEM的空白細胞作為對照，采用半定量RT-PCR 和Western blot法檢測bcl-2基因的表達，用MTT法檢測VSMCs生長情況。結果 轉染siRNA的表達載體可以抑制內源性bcl-2基因在轉錄和轉譯水平上的表達，基因組bcl-2的mRNA和蛋白表達較空載體組和空白對照組明顯減少(P＜0.01)； 基因組的VSMCs生長也較空載體組和空白對照組明顯受到抑制(P＜0.01)。結論 載體介導的RNAi技術可明顯抑制內源性bcl-2基因的表達和VSMCs生長
【摘要】目的 探討低強度微波（LIM）輻射對血管再狹窄病理過程的影響，以評價LIM輻射防治再狹窄的可能性。 方法 健康雄性新西蘭大白兔48只，隨機分為2組。應用Fogarty導管損傷兔髂外動脈（EIA）內膜，建立再狹窄動物模型。輻射組采用2 450 MHz微波，功率分別為2、5和10 mW/cm2，局部輻射EIA（1 h/d）。分別于術后3、7、14及28 d 取材。采用HE和EF染色，觀察EIA形態學改變及內膜面積、中膜面積及管腔狹窄率； TUNEL標記法檢測細胞凋亡； TEM觀察血管平滑肌細胞（VSMC）表型及超微結構。 結果 LIM微波輻射后，再狹窄早期炎癥反應受到抑制，附壁血栓減少，各時間點VSMC的增殖、遷移被抑制，內膜面積和管腔狹窄率顯著低于對照組(P＜0.01)。 細胞凋亡率在術后3 d各組間差異無統計學意義（Pgt;0.05），其余時間點，輻射組顯著高于對照組(P＜0.01)，其中5 mW/cm2者細胞凋亡率明顯高于其他各組(P＜0.01)。TEM觀察到對照組大量合成型VSMC術后14 d達（93.50+3.45）%，輻射組VSMC以收縮型為主，大量成纖維細胞和VSMC呈凋亡的形態學改變。 結論 LIM輻射能顯著抑制再狹窄病理過程中的早期炎癥反應和VSMC的增殖、遷移，促進細胞凋亡，有效抑制再狹窄的發生、發展。LIM輻射存在量效關系和功率窗效應，功率強度為5 mW/cm2時對再狹窄的效應最強。
目的報告8例肝血管平滑肌脂肪瘤的影像學特征及病理學特點，探討其診斷與治療方法。方法對8例經手術及病理證實的肝血管平滑肌脂肪瘤的術前影像學表現（B超、CT、MRI、99mTcPMT）、手術情況及病理特點進行分析。結果B超： 腫瘤呈強回聲光團6例，低回聲光團2例； 邊界清楚7例，血供豐富、內部回聲不均勻4例，其中1例內部呈分隔網狀結構。彩色Doppler超聲示腫瘤血供豐富，均測及動脈頻譜，阻力指數為0.4～0.5。靜脈造影示腫瘤內血流信號明顯增加。CT： 平掃示腫瘤呈低密度影7例，不均勻5例，邊界清楚7例，腫瘤內見軟組織影2例，脂肪成分2例。增強掃描示動脈期明顯強化，門脈期及延遲期逐漸呈低密度。MRI: 腫瘤呈短T1、長T2信號，增強后強化明顯，脂肪抑制后短T1變成長T1。99mTcPMT示腫瘤呈放射性增強，5 min相腫塊區呈放射性缺損，2 h、5 h延遲相腫塊區未見放射性填充，肝血池相腫塊呈放射性填充。病理及免疫組化： 腫瘤由成熟的脂肪、血管及平滑肌組成，HMB45陽性。術前確診3例。結論B超示強回聲光團，CT呈低密度影中出現軟組織影、脂肪成分，增強明顯，MRI出現脂肪信號，脂肪抑制后短T1變成長T1，增強明顯。99mTcPMT示腫瘤呈放射性增強，5 min相呈放射性缺損，延遲相未見放射性填充，肝血池相呈放射性填充。這些是肝血管平滑肌脂肪瘤的影像學特點，結合病史可作出診斷。此病應盡早手術治療，行肝部分切除術。最后確診依靠病理檢查及免疫組化分析。
目的 探討在博萊霉素誘導的肺纖維化中是否發生了上皮細胞-間質轉分化( EMT) 現象, 支氣管上皮細胞是否參與了這一過程。方法 采用α平滑肌肌動蛋白Cre 重組酶轉基因小鼠( α-SMA-Cre/R26R 雙轉基因鼠) 為實驗動物, 構建博萊霉素誘導的小鼠肺纖維化模型, 進行組織X-gal 染色和α平滑肌肌動蛋白免疫熒光檢測。結果 氣管內灌注博萊霉素的轉基因小鼠支氣管上皮下部分X-gal 藍染明顯增多, 終末小氣道周圍和肺血管壁藍染細胞出現或增多, 部分地區出現了支氣管周圍肺泡上皮細胞( ACE) 陽性藍染和浸潤。結論 在博萊霉素誘導的肺纖維化小鼠模型中可以觀察到EMT 現象, 氣道上皮細胞和肺泡上皮細胞能向間充質細胞轉化, 參與肺纖維化病理過程。
目的 檢測高遷移率族蛋白B1( HMGB1) 和α平滑肌肌動蛋白( α-SMA) 在博萊霉素( BLM) 致小鼠肺纖維化模型肺內的表達水平, 探討HMGB1 在肺纖維化發病機制中的作用。方法 取20 只4 ～6 周齡C57BL/6 雄性小鼠, 隨機分為BLM組和生理鹽水( NS) 對照組, 每組10 只。分別向氣管內灌注BLM( 3 mg /kg) 和NS, 10 d 后處死小鼠。應用RT-PCR 法檢測兩組肺組織HMGB1 和α-SMA的mRNA 表達水平, 應用免疫組織化學檢測兩組肺組織中HMGB1 和α-SMA的蛋白表達水平。結果 RT-PCR 半定量和免疫組織化學半定量分析結果顯示, BLM組HMGB1 的mRNA 和蛋白表達均較NS 對照組顯著增加( 0. 61 ±0. 08 比0. 15 ±0. 02, 13. 12 ±1. 33 比7. 92 ±1. 10, P 均lt;0. 01) ; BLM組α-SMA 的mRNA 和蛋白表達均較NS 對照組顯著增加( 0. 89 ±0. 12 比0. 60 ±0. 07,13. 66 ±1. 01 比8. 18 ±1. 33, P 均lt;0. 01) 。結論 在BLM誘導的肺纖維化中肺組織的HMGB1 和α-SMA 表達增加。肺纖維化病理過程可能與HMGB1 表達增加并活化α-SMA 的表達有關
目的 觀察COPD 大鼠氣道平滑肌細胞( ASMCs) 的鈣激活性鉀通道( KCa ) 的活性變化, 以及11, 12-表氧化二十碳三烯酸( 11, 12-EETs) 對氣道平滑肌細胞KCa 的作用。方法 40 只雄性SD 大鼠隨機分為正常對照組和COPD 組, 每組20 只。在相對密閉艙內吸入紙煙建立COPD 動物模型, 采用急性酶分離法分離大鼠ASMCs, 應用膜片鉗技術, 分離出KCa 電流, 測定KCa 開放概率( Po) 、平均開放時間( To) 和平均關閉時間( Tc) 。比較COPD 組和正常對照組KCa上述活性指標的變化, 以及應用3 μmol / L 的11, 12-EETs 對COPD 組ASMCs 細胞進行灌流后KCa活性的變化。結果 與正常對照組比較, COPD 組ASMCs 的KCa 通道Po 明顯降低( 0. 084 ±0. 028 比0. 198 ±0. 029, P lt;0. 01) , To 顯著縮短[ ( 0.732 ±0. 058) ms 比( 1. 648 ±0. 152) ms, P lt; 0. 01] , Tc 顯著延長[ ( 12. 259 ±2. 612) ms 比( 6. 753 ±1. 237) ms, P lt; 0. 01] 。而用11, 12-EETs 灌流ASMCs 細胞后可明顯激活KCa活性, Po 增加( 0.227 ±0. 059 比0. 084 ±0. 028, P lt; 0. 01) , To 延長[ ( 2.068 ±0. 064) ms 比( 0. 732 ±0. 058) ms, P lt;0. 01] , Tc 縮短[ ( 4. 273 ±0. 978) ms 比( 12. 259 ±2. 612) ms, P lt; 0. 01] 。結論 COPD大鼠ASMCs 細胞KCa通道活性降低可能在COPD 發病機制中起著一定作用, 11, 12-EETs 可以直接激活COPD大鼠ASMCs 細胞KCa活性, 提高膜電位穩定性, 從而松弛COPD大鼠氣道平滑肌。
目的 探討格列衛對小鼠肺纖維化的干預機制。方法 120 只C57BL/6 小鼠隨機分為對照組、模型組、地塞米松組和格列衛組, 每組30 只。采用氣管內注射博萊霉素構建肺纖維化小鼠模型, 分別于7、14、21 d 隨機處死10 只動物。免疫組化檢測各組肺組織轉化生長因子β1 ( TGF-β1 )和α-平滑肌肌動蛋白( α-SMA) 的蛋白表達, RT-PCR 檢測肺組織TGF-β1 mRNA 含量。結果 模型組各時間點TGF-β1 和α-SMA 的表達均較對照組顯著增加, 地塞米松和格列衛處理組各時間點TGF-β1和α-SMA 的表達均較模型組顯著降低, 而地塞米松組和格列衛組的表達水平無顯著差異。TGF-β1與α-SMA 表達水平呈直線正相關( r = 0. 251, P lt;0. 05) 。結論 格列衛對博萊霉素誘導肺纖維化的抑制作用與其抑制TGF-β1 和α-SMA 的表達有關。
目的 觀察香煙煙霧提取物( CSE) 對轉化生長因子β1 ( TGF-β1 ) 刺激的人肺成纖維細胞( HLF) 增殖及分泌過氧化氫( H2O2 ) 的影響, 探討CSE 可能參與肺纖維化發病的機制。方法 將體外分離培養的HLF 細胞分為對照組和TGF-β1 ( 5 ng/mL) 刺激組, 用不同濃度的CSE( 0% 、2. 5% 、5% 、10% ) 進行干預。應用Brdu ELISA 法檢測細胞增殖; 熒光分光光度法測定細胞分泌的H2O2 ; 免疫熒光標記分泌的H2O2 和細胞α-平滑肌肌動蛋白( α-SMA) 表達。結果 TGF-β1 刺激組細胞經免疫熒光標記顯示α-SMA 陽性表達, 說明HLF 在TGF-β1 刺激下轉化為肌成纖維細胞( MF) 。TGF-β1刺激組中, 與0% 濃度CSE 比較, 2. 5%、5% 濃度的CSE 干預可以顯著促進細胞增殖( P lt; 0. 01 或0. 05) , 10% 濃度的CSE 干預抑制細胞增殖( P lt;0. 01) 。對照組中, 與0% 濃度CSE 比較, 2. 5%、5% 、10% 濃度的CSE 均使細胞增殖顯著減弱( P lt;0. 01 或P lt;0. 05) , 并呈劑量依賴性。TGF-β1 刺激HLF細胞能產生一定量的H2O2, CSE 干預后分泌產生的H2O2 明顯增加( P lt; 0. 01) , 經NADPH 氧化酶抑制劑二苯基碘( DPI) 預處理后檢測不到H2O2。免疫熒光標記顯示分泌的H2O2 來源于α-SMA 陽性表達的MF 細胞。結論 低濃度的CSE 能夠促進TGF-β1 刺激HLF 細胞轉化的MF細胞增殖, 并顯著增加MF 細胞向細胞外分泌H2O2 , 提示CSE 可能通過氧化應激參與肺纖維化的發生、發展。
目的 探討細胞外信號調節蛋白激酶( ERK) 通道調控支氣管哮喘大鼠氣道平滑肌細胞( ASMC) 增殖中的細胞周期機制。方法 30 只Wistar 大鼠隨機分為正常組和哮喘組, 哮喘組采用卵清蛋白致敏和激發建立哮喘模型。取兩組大鼠葉支氣管ASMC 進行原代培養, 采用ERK 激動劑表皮生長因子( EGF) 和抑制劑PD98059 干預哮喘組ASMC。用免疫組織化學法檢測ASMC 細胞周期蛋白Cyclin D1 和CDK2 的表達; Western 免疫印跡檢測ERK1 /2 和磷酸化ERK1 /2 蛋白的表達, 計算ERK活化率。結果 哮喘組大鼠ASMC 中Cyclin D1、CDK2 的表達和ERK 活化率[ 76. 15 ±4. 88、92. 30 ±7. 95 和( 82. 37 ±5. 78) % ] 均較正常組[ 54. 17 ±6. 11、61. 04 ±4. 09 和( 49. 91 ±3. 26) % ] 顯著升高( P 均lt;0. 05) 。經EGF 處理后上述指標進一步升高[ 119. 28 ±8. 14、134. 77 ±9. 26 和( 91. 57 ±5. 32) % , P 均lt; 0. 05] , 經PD98059 處理后顯著降低[ 58. 78 ±4. 60、69. 15 ±5. 83 和( 54.01 ±4. 12) % , P 均lt;0. 05] 。結論 哮喘大鼠ASMC 增殖活性增強。ERK1 /2 可通過誘導ASMC 中CyclinD1 和CDK2 蛋白高表達, 使細胞從G1 期向S期發展, 促進細胞增殖。