目的探討綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)標記的C57小鼠皮膚表皮和真皮細胞共移植誘導裸鼠毛囊重建的實驗研究。 方法取C57-GFP新生及成年小鼠分離表皮與真皮,分別制備成年小鼠原代真皮-表皮混合細胞(按1∶1比例混合)、成年小鼠原代真皮細胞、新生小鼠第3代真皮細胞,熒光顯微鏡觀察細胞激發綠色熒光情況,免疫細胞化學檢測培養的新生小鼠第3代真皮細胞毛囊干細胞標志。取Balb/c裸鼠,分別將成年小鼠原代真皮-表皮混合細胞(A組)、成年小鼠原代真皮細胞(B組)、新生小鼠第3代真皮細胞(C組)及生理鹽水(D組)移植至裸鼠皮下,術后4、5、6周行大體觀察,6周時取移植部位皮膚行GFP免疫組織化學染色觀察各組毛囊形成情況。 結果熒光顯微鏡觀察示,分離、培養的C57-GFP新生及成年小鼠表皮及真皮細胞均能激發綠色熒光;免疫細胞化學檢測培養的第3代真皮細胞中毛囊干細胞標志,顯示波形蛋白、α-平滑肌肌動蛋白強陽性,表明細胞多為真皮鞘細胞;部分細胞表達毛乳頭細胞標志CD133、多能聚糖及毛囊隆突部標志角蛋白15。裸鼠皮下移植實驗:大體觀察示A組可見接種部位皮下呈灰黑色,但未見毛發穿出皮膚表面;B、C、D組裸鼠皮膚均無著色。免疫組織化學染色示,A組形成新的、完整的毛囊結構或參與形成毛囊;B組GFP陽性細胞多表達于毛囊真皮鞘、外根鞘;C組GFP陽性細胞主要分布于毛囊真皮鞘、外根鞘、毛乳頭,在汗腺中也有表達;D組GFP染色呈陰性。 結論小鼠皮膚的表皮和真皮細胞在裸鼠體內相互作用可形成完整的毛囊結構,而僅移植新鮮分離或培養的真皮細胞則主要參與毛囊形成,無法形成完整的毛囊結構。