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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 關鍵詞 包含"尾椎" 1條結果
        • 大鼠不同節段椎間盤髓核細胞分離鑒定及生物特性的對比研究

          目的對大鼠腰椎及尾椎間盤髓核細胞(nucleus pulposus cells,NPCs)進行體外分離培養、形態學鑒定,并對比研究細胞生長特性。 方法分別取8周齡SD大鼠腰段(L1、2~L6、S1)及尾段(C1、2~C17、18)椎間盤,采用組織貼壁法分離培養NPCs;倒置相差顯微鏡觀察細胞形態變化,行HE、甲苯胺藍及Ⅱ型膠原免疫組織化學染色觀察;分別取兩組第1~5代細胞測定細胞活力(錐蟲藍染色)、總蛋白含量(BCA法)及衰老水平[衰老相關β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase,SA-β-gal)染色];取第1代細胞行增殖能力(細胞計數試劑盒8法)測定。 結果成功分離培養各節段椎間盤NPCs。尾段原代NPCs貼壁時間及生長達90%融合時間顯著少于腰段原代NPCs(P<0.05)。HE染色示NPCs細胞質呈粉色,細胞核呈卵圓形,均一藍黑色;甲苯胺藍染色示NPCs細胞質呈藍色;Ⅱ型膠原免疫組織化學染色示細胞質見黃褐色顆粒沉著核周區顯著,細胞核呈藍黑色。腰段組細胞以長梭形為主,尾段組以多角形、不規則形為主。細胞活力測定示腰段及尾段兩組間及兩組內各代次間NPCs活力比較差異均無統計學意義(P>0.05)。增殖能力檢測示,腰段細胞培養4~5 d后進入對數生長期,尾段細胞培養3 d后即進入對數生長期;培養3~9 d尾段細胞吸光度(A)值高于腰段細胞(P<0.05)。總蛋白合成檢測示,尾段及腰段NPCs總蛋白含量組內各代次間比較差異均無統計學意義(P>0.05),尾段各代NPCs總蛋白含量均顯著高于同代腰段NPCs(P<0.05)。衰老水平檢測示,兩組間第1、2、3代比較老化細胞陽性率差異無統計學意義(P>0.05),腰段組第4、5代老化細胞陽性率較同代尾段細胞高,差異有統計學意義(P<0.05)。 結論與同時間點大鼠腰椎間盤NPCs相比,尾椎間盤NPCs生長狀態更佳,更適宜作為研究椎間盤退變的種子細胞。

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