目的 探討人羊膜間充質干細胞（human amniotic mesenchymal stem cells，hAMSCs）是否具有 MSCs 特性，以及經 TGF-β1 和 VEGF 聯合誘導后是否具有向韌帶成纖維細胞分化的能力。 方法 取自愿捐贈的足月產婦胎盤，采用胰蛋白酶膠原酶聯合消化法分離培養 hAMSCs，流式細胞術檢測 hAMSCs 表型分子，免疫熒光染色檢測 hAMSCs 其角蛋白-19（cytokeratin-19，CK-19）和波形蛋白表達情況。取第 3 代 hAMSCs，分別使用含 TGF-β1 和 VEGF 的 L-DMEM/F12 成韌帶或纖維細胞誘導培養基（實驗組）和普通 L-DMEM/F12 培養基（對照組）培養，細胞增殖-毒性檢測試劑盒（cell counting kit-8，CCK-8）檢測兩組細胞增殖能力；培養 5、10、15 d 分別采用免疫熒光染色及實時熒光定量 PCR 檢測韌帶及血管生成相關特異性蛋白和基因表達。 結果 倒置相差顯微鏡觀察示 hAMSCs 呈單層貼壁生長；流式細胞術結果示 hAMSCs 表達 MSCs 表型分子；免疫熒光染色示 hAMSCs 高表達波形蛋白、低表達 CK-19；hAMSCs 具有向成骨、成軟骨及成脂細胞分化的能力。CCK-8 法檢測示，7 d 時兩組細胞均達增殖高峰，實驗組細胞增殖能力于 7 d 后顯著高于對照組（P<0.05）。免疫熒光染色示，培養 5、10、15 d 時實驗組 Ⅰ 型膠原、Ⅲ 型膠原、纖維連接蛋白（Fibronectin）、細胞連接素（Tenascin-C）表達染色均較對照組增強。實時熒光定量 PCR 結果示，隨時間延長實驗組 Ⅰ 型膠原、Ⅲ 型膠原、Fibronectin、α-肌動蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、VEGF mRNA 相對表達量均逐漸上調（P<0.05）。除培養 5 d 兩組 Ⅰ 型膠原、Ⅲ 型膠原、VEGF mRNA 相對表達量比較差異無統計學意義（P>0.05）外，其余各時間點實驗組 Ⅰ 型膠原、Ⅲ 型膠原、Fibronectin、α-SMA 和 VEGF mRNA 相對表達量均顯著高于對照組（P<0.05）。 結論 hAMSCs 具有 MSCs 特征，且體外增殖能力良好，可作為組織工程種子細胞來源；體外誘導后韌帶成纖維細胞及血管生成相關特異性基因表達上調，韌帶成纖維細胞特異性蛋白分泌增加，TGF-β1 聯合 VEGF 可作為構建組織工程韌帶的生長因子選擇。
目的 探索3D打印股骨近端弧形柄仿生假體的設計要點，評估將其應用于重建股骨中上段超極限骨缺損的手術要點和中期臨床療效。方法 2015年10月—2021年1月，17例患者接受了3D打印股骨干弧形柄仿生假體重建。男11例，女6例；年齡10～76歲，平均30.1歲。骨肉瘤9例，尤文肉瘤4例，軟骨肉瘤2例，脂肪肉瘤1例，肌纖維母細胞瘤1例。病程5～14個月，平均9.5個月。Enneking分期：ⅡB期16例，ⅢB期1例。根據X線片測量術前股骨頭中心到人體正中線和髖臼頂點的距離，術后即刻及末次隨訪時弧形柄尖端到人體正中線和髖臼頂點的距離，以及術前、術后即刻和末次隨訪時的頸干角。通過X線片、CT和斷層融合成像技術（Tomosynthesis-Shimadzu metal artefact reduction technology，T-SMART）評估骨-假體界面的骨整合狀況及假體表面骨長入情況。隨訪患者生存狀態、有無局部復發或遠處轉移，術后并發癥發生情況。手術前后通過肌肉骨骼腫瘤學會（MSTS）評分評價下肢功能恢復情況，疼痛視覺模擬評分（VAS）評價疼痛緩解情況。結果 患者股骨切除長度為（163.1±57.5）mm，剩余股骨近端長度為（69.6±9.3）mm，股骨切除長度/股骨總長度百分比為38.7%±14.6%。17例患者均獲隨訪，隨訪時間25～86個月，平均58.1個月。隨訪期間1例患者于術后46個月死于肺轉移，余16例患者無瘤生存。均未發生假體周圍感染、切口延遲愈合、假體無菌性松動、假體斷裂、假體周圍骨折等并發癥。X線片和T-SMART評估未發現植入假體柄周圍微動磨損，也無明顯放射性透亮帶，并且在所有柄中都發現了骨-假體界面上骨向內生長的射線學跡象。術后即刻及末次隨訪時弧形柄尖端到人體正中線和髖臼頂點的距離分別與術前股骨頭中心到人體正中線和髖臼頂點的距離比較，差異無統計學意義（P>0.05）；術后即刻和末次隨訪間上述指標比較差異亦無統計學意義（P>0.05）。手術前后各時間點頸干角比較差異均無統計學意義（P>0.05）。末次隨訪時患者MSTS評分為（26.1±1.2）分，VAS評分為（0.1±0.5）分，均較術前 ［分別為（19.4±2.1）分和（5.7±1.0）分］ 顯著改善（t=14.735，P<0.001；t=21.301，P<0.001）。末次隨訪時，患者均無需借助拐杖或其他助行器行走。 結論 3D打印股骨近端弧形柄仿生假體是股骨中上段惡性腫瘤切除術后超極限骨缺損重建的有效方法，術中操作可靠，術后下肢功能恢復滿意，并發癥發生率低。