目的 初步探討 BMSCs 條件培養液對小膠質細胞(microglia,MGs)激活及其分泌精氨酸酶 1(arginase 1,Arg1)的影響。 方法 取 4 周齡 SD 大鼠股骨和脛骨骨髓,采用差速貼壁法分離培養原代 BMSCs,行 Vimentin 免疫熒光染色鑒定。取新生 3 日內 SD 大鼠全腦,采用胰蛋白酶消化法分離培養原代 MGs,行 Iba1 免疫熒光染色鑒定。收集對數生長期 BMSCs 培養液制備 BMSCs 條件培養液,取原代 MGs,分別使用含 BMSCs 條件培養液的 DMEM/F12 培養基(實驗組)和普通 DMEM/F12 培養基(對照組)培養。培養 48 h 后采用倒置相差顯微鏡觀察 MGs 的形態改變;Iba1 免疫熒光染色觀察 MGs 激活狀態;Iba1 和 Arg1 免疫熒光雙標染色及 Western blot 檢測 MGs 中 Arg1 的表達。 結果 倒置相差顯微鏡觀察示 BMSCs 約 14 d 進入對數生長期,Vimentin 免疫熒光染色結果示 98% 以上細胞呈陽性反應;MGs 約 21 d 進入對數生長期,Iba1免疫熒光染色結果示約 80% 細胞呈陽性反應。倒置相差顯微鏡觀察示實驗組 MGs 被激活,激活后的 MGs 胞體增大、突起變短、呈阿米巴樣變化。免疫熒光染色示實驗組 Iba1 陽性細胞顯著多于對照組,比較差異有統計學意義(t=0.007,P=0.000);免疫熒光雙標染色示實驗組 Iba1 和 Arg1 雙陽性細胞顯著多于對照組,比較差異有統計學意義(t=0.007,P=0.000);Western blot 示實驗組 Arg1 蛋白相對表達量顯著高于對照組,比較差異有統計學意義(t=0.001,P=0.000)。 結論 BMSCs 條件培養液可激活 MGs,并促進 MGs 表達 Arg1。