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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 關鍵詞 包含"妊娠早期" 1條結果
        • 妊娠早期人臍帶血管周圍細胞的分離培養及定向分化胰島樣細胞的研究

          目的研究妊娠早期人臍帶血管周圍細胞(human umbilical cord perivascular cells,HUCPVC)分離培養條件及定向分化胰島樣細胞能力。 方法取患者自愿捐贈的妊娠一期(8~12周)臍帶組織,體外分離培養妊娠早期HUCPVC,記錄傳代代數并觀察細胞分化情況;采用免疫組織化學染色法檢測細胞表面標志物階段特異性胚胎抗原1(stage-specific embryonic antigen 1,SSEA-1)、SSEA-3、SSEA-4、OCT-4、TRA-1-60和TRA-1-81表達。利用分段培養法(5個階段)對細胞進行擬胚體誘導和胰島樣細胞定向分化,采用免疫組織化學染色方法檢測擬胚體特異標志物甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)、巢蛋白(Nestin)、平滑肌肌動蛋白(smooth muscle actin,SMA)表達,采用葡萄糖刺激胰島素分泌實驗檢測胰島素分泌能力。 結果成功分離純化出妊娠早期HUCPVC并可穩定連續傳代10代以上,細胞均顯著表達干細胞標志物SSEA-3、SSEA-4、OCT-4、TRA-1-60和TRA-1-81,具有分化潛能。經擬胚體體外誘導可形成表面有膜包被的一中空、分層并具有規則球狀形態的擬胚體,標志物AFP、Nestin和SMA均呈陽性。可定向分化為獨立的胰島樣細胞結構,胰島素表達陽性;葡萄糖刺激胰島素分泌實驗結果顯示,分化的細胞在高糖培養基中的胰島素含量為(23.2±5.3)mU/L,明顯高于低糖培養基中的含量(7.0±0.5)mU/L(t=7.444,P=0.002)。 結論通過分離、傳代和誘導,妊娠早期HUCPVC可定向分化為胰島樣細胞結構并分泌胰島素。

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