目的制備骨軟骨一體化多相支架并進行相關力學性能檢測與生物學性能評估，為骨軟骨缺損修復提供一種新技術與方法。方法以豬源脫細胞軟骨細胞外基質、納米級羥基磷灰石和海藻酸鈉為原材料，按不同成分比例混合，利用冷凍干燥技術和物理化學法交聯，制備以脫細胞軟骨細胞外基質為軟骨層，海藻酸鈉和脫細胞軟骨細胞外基質為中間層，納米級羥基磷灰石、海藻酸鈉和脫細胞軟骨細胞外基質為骨層的骨軟骨一體化多相支架。通過大體觀察、掃描電鏡觀察、Micro-CT 觀察、支架孔隙率和孔徑測定、支架吸水能力測定、力學檢測（壓縮模量、界面間黏附強度）、生物相容性檢測［MTT 法檢測鼠 L929 成纖維細胞在支架上的增殖情況以及綠色熒光蛋白（green fluorescent protein，GFP）標記的大鼠 BMSCs 在支架上的生長情況］，對骨軟骨一體化多相支架進行力學與生物學性能評價。結果大體觀察及 Micro-CT 觀察均顯示支架各層間結合緊密，未出現明顯不連續和相互分離。掃描電鏡觀察示，骨層結構相對致密，中間層與軟骨層結構則比較疏松，各層內的孔隙結構相互連通且均具有立體多維性。支架軟骨層、中間層、骨層孔隙率分別為 93.55%±2.90%、93.55%±4.10%、50.28%±3.20%，骨層顯著低于軟骨層和中間層（P<0.05），軟骨層與中間層比較差異無統計學意義（P>0.05）；孔徑分別為（239.66±35.28）、（153.24±19.78）、（82.72±16.94）μm，各層間比較差異均有統計學意義（P<0.05）。支架軟骨層、中間層、骨層親水性分別為（15.14±3.15）、（13.65±2.98）、（5.32±1.87）mL/g，骨層顯著低于軟骨層和中間層（P<0.05），軟骨層與中間層比較差異無統計學意義（P>0.05）；壓縮模量分別為（51.36±13.25）、（47.93±12.74）、（155.18±19.62）kPa，骨層顯著高于軟骨層和中間層（P<0.05），軟骨層與中間層比較差異無統計學意義（P>0.05）。骨軟骨一體化多相支架每兩層間結合緊密，其中軟骨層與中間層的界面黏附強度為（18.21±5.16）kPa，骨層與中間層的界面黏附強度則為（16.73±6.38）kPa，比較差異無統計學意義（t=0.637，P=0.537）。MTT 法檢測顯示鼠 L929 成纖維細胞在支架上生長良好，GFP 標記的大鼠 BMSCs 在支架上生長分布均勻，顯示支架材料無細胞毒性且具有良好的生物相容性。結論骨軟骨一體化多相支架各層間的性能各有側重，實現了對正常骨軟骨組織成分上與結構上的雙重仿生，為進一步動物體內實驗奠定了基礎，有望成為骨軟骨缺損修復與再生治療的一種新策略。