目的探討攜帶BMP-12基因的腺病毒載體轉染誘導外周血MSCs向肌腱/韌帶細胞分化的效果。 方法取3～4月齡新西蘭兔外周血，體外分離培養外周血MSCs至第3代。采用AdEasy腺病毒載體系統制備BMP-12重組腺病毒載體。將BMP-12重組腺病毒體體外轉染第3代外周血MSCs，轉染后24 h通過流式細胞術（flow cytometry，FCM）檢測轉染效率，倒置相差顯微鏡觀察細胞形態變化，轉染后8、24 h在熒光顯微鏡下觀察綠色熒光蛋白（green fluorescent protein，GFP）表達；轉染后0、7、14 d，采用免疫組織化學染色觀察I型膠原表達情況；實時定量PCR檢測肌腱/韌帶特異基因Tenomodulin、Tenascin-C和Decorin mRNA表達水平，并設未轉染細胞作為對照組。 結果轉染后24 h，倒置相差顯微鏡觀察示細胞生長增殖緩慢，細胞形態清晰；FCM檢測示，轉染組轉染效率為99.57%，未轉染組為2.46%；轉染后8 h，熒光顯微鏡下即可見GFP表達，隨培養時間延長GFP表達逐漸增多，24 h時幾乎所有細胞均可見GFP表達。免疫組織化學染色示，隨轉染時間延長，Ⅰ型膠原表達逐漸增強；轉染組轉染后14 d，肌腱/韌帶特異基因Tenomodulin、Tenascin-C和Decorin mRNA表達水平分別為0.061±0.013、0.029±0.008、0.679±0.067，均顯著高于未轉染組的0.004±0.002、0.003±0.001、0.142±0.024，差異有統計學意義（t=—7.700，P=0.031；t=—5.741，P=0.020；t=—12.998，P=0.000）。 結論BMP-12重組腺病毒載體可明顯促進外周血MSCs向肌腱/韌帶成纖維細胞表型分化，并促進肌腱/韌帶特異基因表達和細胞外基質產生，為外周血MSCs用于肌腱/韌帶再生提供了依據。