目的 綜述哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）參與神經系統損傷修復的可能機制。 方法 廣泛查閱mTOR 與神經系統損傷后神經修復的相關文獻并進行綜合分析。 結果 mTOR 可整合細胞外應激信號，進而調節多種細胞生物過程，參與神經系統損傷修復。 結論 不同途徑調節mTOR 信號通路活性，進而減輕神經系統損傷尤其是應激性腦損傷。mTOR 可作為促進應激性腦損傷修復的新靶點。
目的 分析整合素在神經系統損傷及其修復過程中的作用和可能機制。 方法 查閱近年有關整合素在神經系統損傷及其修復中作用的相關文獻，并作進一步綜合分析。 結果 整合素及相關信號通路參與了神經系統損傷，尤其是缺氧缺血性神經系統損傷及其修復過程。 結論 通過干預整合素相關信號對于治療神經系統損傷，尤其是缺氧缺血性神經系統損傷具有良好的應用價值和發展前景。
分析缺氧誘導因子 1α（hypoxia inducible factor 1α，HIF-1α）在缺氧缺血性損傷及其修復過程中的作用和可能機制。 方法 查閱和分析近年有關HIF-1α 在缺氧缺血性損傷及其修復中作用的相關文獻，并作進一步綜合分析。 結果 HIF-1α 參與了多種器官或組織的缺氧缺血性損傷及其修復過程。 結論 HIF-1α 對治療臨床常見缺氧缺血性損傷具有良好的應用價值和發展前景。
目的 探討缺氧缺血性腦損傷（hypoxia ischemia brain damage，HIBD）時端粒酶逆轉錄酶（telomerase reverse transcriptase，TERT）的表達及神經元凋亡情況。 方法 42 只清潔級7 日齡SD 大鼠，雌雄不限，體重12 ～ 18 g，隨機分為假手術組（6 只）和缺氧缺血組（36 只）。缺氧缺血組實驗動物分離右側頸總動脈，雙線結扎，縫合皮下組織及皮膚，并低氧處理，制備HIBD 動物模型；假手術組僅將縫線從右側頸總動脈下穿過，不結扎，縫合切口，不作低氧處理。分別于術后4、8、12、24、48 及72 h 處死大鼠取腦組織，采用免疫組織化學法檢測TERT 和CC3 蛋白表達，采用TUNEL 染色檢測細胞凋亡。 結果 缺氧缺血組TERT 蛋白表達于術后4 h 開始增加，24 ～ 48 h 達高峰，之后略有下降；CC3 蛋白表達于術后4 h 開始增加，24 h 明顯升高，48 h 及72 h 維持較高水平。假手術組TERT 和CC3 僅有少量弱陽性表達。缺氧缺血組術后各時間點TERT 及CC3 蛋白表達與假手術組比較，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。TUNEL 染色顯示，缺氧缺血組術后4 ～ 8 h 神經細胞凋亡開始增多，24 ～ 48 h 達高峰，72 h 仍維持在較高水平；假手術組偶見陽性細胞。缺氧缺血組術后各時間點陽性細胞計數與假手術組比較，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。 結論 缺氧缺血能誘導腦組織中TERT 表達增加，TERT 可能對神經細胞凋亡起一定保護作用。
目的 端粒酶逆轉錄酶（telomerase reverse transcriptase，TERT）是決定細胞生長與壽命的關鍵因素，也與細胞抵制應激和減少凋亡密切相關。通過構建腦神經元體外缺氧缺血再灌注（hypoxia-ischemia-reperfusion，HI-RP）模型，探討大鼠TERT 轉染星形膠質細胞（astrocytes，AS）的培養液對HI 損傷神經元的影響。 方法 構建大鼠全長TERT 表達質粒pcDNA3-TERT。取20 只新生3 d SD 大鼠處死后取大腦皮層，分離培養AS，通過脂質體介導用pcDNA3-TERT 及pcDNA3 轉染AS，作為pcDNA3-TERT 轉染組及pcDNA3 轉染組，以未轉染質粒的AS（未轉染組）作為對照。免疫細胞化學染色檢測各組AS 特異性標志物膠質纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）及目的基因TERT的表達。分別收集pcDNA3-TERT 轉染組、pcDNA3 轉染組、未轉染組的AS 條件培養液（astrocyte conditioned medium，ACM），分別為TERT-ACM、p-ACM 及ACM。取60 只新生當天SD 大鼠，處死后取大腦皮層進行神經元原代培養，取培養8 ～ 9 d 的大鼠神經元隨機分為對照組、ACM 組、p-ACM 組、TERT-ACM 組及正常組。前4 組分別于無血清DMEM培養基及含ACM、p-ACM、TERT-ACM 的無血清DMEM 培養基中進行HI 培養3 h 后，再體外模擬RP 3、6、18、24、36 h；正常組神經元不作處理。采用MTT 法測定神經元存活率、比色法測定神經元培養液中乳酸脫氧酶（loctate dehydrogenase，LDH）活性、TUNEL 法檢測神經元凋亡情況。 結果 免疫細胞化學染色示，未轉染組、pcDNA3-TERT 轉染組及pcDNA3 轉染組的GFAP 陽性細胞百分率分別為98%、99%、98%；未轉染組與pcDNA3 組未見TERT 表達，pcDNA3-TERT 轉染組TERT 陽性細胞百分率達98%。MTT 檢測顯示，對照組、ACM 組、p-ACM 組及TERT-ACM 組神經元存活率均較正常組降低，其LDH 活性及TUNEL 檢測凋亡指數均較正常組增高，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。ACM 組、p-ACM 組與對照組比較，在HI 3 h 及RP 3 h 神經元存活率均增高，LDH 活性及凋亡指數均降低，差異有統計學意義（P lt; 0.05）；但之后各時間點各項指標差異無統計學意義（P gt; 0.05）。各時間點TERT-ACM 組與對照組、ACM 組和p-ACM 組比較，神經元存活率均增高，LDH 活性及凋亡指數均降低，差異有統計學意義（P lt; 0.05）；各時間點p-ACM 組與ACM 組各項指標比較，差異均無統計學意義（P gt; 0.05）。 結論 經質粒pcDNA3-TERT 轉染AS 培養液處理的大鼠神經元對HI 損傷有更強的耐受性，轉染AS 培養液可能對HI 神經元具有保護作用。
目的探討人參皂苷Rg1在新生鼠缺氧缺血性腦損傷（hypoxia ischemia brain damage，HIBD）中的抗凋亡作用，分析可能的信號通路機制。 方法10日齡SPF級SD大鼠48只，體質量17～21 g，隨機分為4組（n=12），假手術組、模型組（HI組）、模型+人參皂甙Rg1組（HI+Rg1組）、模型+人參皂甙Rg1+U0126干預組（HI+Rg1+U0126組）。HI組、HI+Rg1組及HI+Rg1+U0126組大鼠采用結扎單側頸總動脈并低氧通氣方法制備HIBD模型；假手術組僅分離右側頸總動脈。HI+Rg1+U0126組于造模前1 h右側腦室注射5 μL含U0126（25 μg/kg）的PBS，其余3組同法注射5 μL PBS。HI+Rg1組及HI+Rg1+U0126組于術后即刻腹腔內注射0.1 mL含Rg1（40 mg/kg）的生理鹽水；HI組和假手術組注射0.1 mL生理鹽水。術后4、24 h處死各組大鼠，取右側半球皮層和海馬腦組織，采用Western blot及免疫組織化學染色檢測胞外信號相關蛋白激酶1/2（extracellular signalrelated protein kinase 1/2，Erk1/2）及磷酸化Erk1/2（phospho-Erk1/2，p-Erk1/2）、缺氧誘導因子1α（hypoxia induciblefactor 1α，HIF-1α）和活化的半胱天冬氨酸酶3（cleaved Caspase-3，CC3）蛋白表達；TUNEL法檢測原位神經元凋亡情況。 結果Western blot檢測示，各時間點各組均有Erk1/2、p-Erk1/2、HIF-1α、CC3蛋白表達；術后4、24 h，HI組HIF-1α、CC3蛋白表達均較假手術組明顯增加（P＜0.05）；術后4 h，HI組p-Erk1/2蛋白表達較假手術組明顯增加（P＜0.05）；術后4、24 h，HI+Rg1組p-Erk1/2及HIF-1α蛋白表達較HI組明顯上調（P＜0.05），CC3蛋白表達則明顯下調（P＜0.05）；術后4、24 h，HI+Rg1+U0126組p-Erk1/2及HIF-1α蛋白表達較HI+Rg1組明顯下調（P＜0.05），CC3蛋白表達則明顯上調（P＜0.05）。各時間點各組間Erk1/2蛋白表達比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。免疫組織化學染色可見HIF-1α蛋白、CC3蛋白定位主要集中在細胞核及細胞質，Erk1/2、p-Erk1/2蛋白定位主要集中在細胞質，蛋白表達強度與Western blot結果一致。TUNEL染色示術后4、24 h，HI組神經元凋亡指數較假手術組明顯上升（P＜0.05）；術后24 h，HI+Rg1組神經元凋亡指數較HI組及HI+Rg1+U0126組明顯降低（P＜0.05）。 結論Rg1通過Erk1/2信號通路增強并穩定HIBD誘導的HIF-1α表達，從而抑制Caspase-3活化，減輕新生鼠HIBD后神經元凋亡。