目的構建pEGFP-N3-TFPI-2真核表達載體，為研究TFPI-2基因的功能做準備。 方法從胎盤組織中提取總RNA，逆轉錄合成cDNA，再以PCR法進行擴增。將擴增的TFPI-2基因片段克隆到pEGFP-N3真核表達載體上，經XhoⅠ和KpnⅠ雙酶切后，行1%瓊脂糖凝膠電泳鑒定，同時測定其DNA序列。將pEGFP-N3-TFPI-2真核表達載體以脂質體LipofectamineTM 2000介導的方法轉染Top10感受態細胞（轉染組），同時設空白對照組（僅轉染pEGFP-N3質粒）和未轉染組（不予轉染）。采用Western blot法檢測3組細胞中TFPI-2蛋白的表達情況。 結果總RNA經分光光度法驗證，其純度符合PCR法擴增的要求。構建的pEGFP-N3-TFPI-2真核表達載體經XhoⅠ和KpnⅠ雙酶切后，行1%瓊脂糖凝膠電泳，結果顯示，分別在708 bp處和4 700 bp處有特異擴增條帶，大小與理論值一致。DNA序列測定結果證實，pEFFP-N3-TFPI-2真核表達載體的序列完全正確。Western blot法結果顯示，TFPI-2蛋白的表達量轉染組為0.657 3±0.032 5，空白對照組為0.301 7±0.028 7，未轉染組為0.314 3±0.026 6，轉染組TFPI-2蛋白的表達量高于空白對照組和未轉染組，差異有統計學意義（P＜0.01）。 結論本實驗成功構建了pEGFP-N3-TFPI-2真核表達載體，為TFPI-2基因功能的研究奠定了基礎。