目的 觀察攜帶肝細胞生長因子（hepatocyte growth factor，HGF）基因的重組腺病毒對BMSCs 的轉 染表達及活性，為研制穩定表達高生物活性細胞因子的創傷修復細胞基因藥物奠定基礎。 方法 Percoll 分離液體外分 離、培養成年Wistar 大鼠BMSCs，取第3 ～ 5 代細胞進行實驗。用免疫細胞化學法檢測BMSCs 中HGF 受體c-Met 是否表達；以轉染強度（multiplicity of infection，MOI）分別為0、25、50、100、200 pfu/cell 攜帶綠色熒光蛋白（green fluorescent protein，GFP）基因的重組腺病毒（adenovirus GFP，Ad-GFP）轉染BMSCs，流式細胞儀測定轉染效率，MTT 法檢測細胞存活情況，以篩選出最佳MOI；并以最佳MOI 將攜帶HGF 基因的重組腺病毒（adenovirus HGF，Ad-HGF）體外轉染BMSCs，ELISA 法檢測轉染后HGF 表達水平，MTT 法檢測上清對BMSCs 增殖影響。 結果 BMSCs 胞膜表達HGF受體c-Met。MOI 為0、25、50、100 及200 pfu/cell 的Ad-GFP 轉染BMSCs 48 h 后，流式細胞儀測定轉染效率分別為0.34% ± 0.04%、40.72% ± 0.81%、61.72% ± 1.04%、85.33% ± 0.83% 及17.91% ± 0.63%，MOI 為100 pfu/cell 時對BMSCs 的轉染效率最高（P lt; 0.05）；MTT 法檢測示MOI 為200 pfu/cell 時，BMSCs 損傷程度最大。以MOI 為100 pfu/cell 的Ad-HGF 轉染BMSCs 48 h 后，ELISA 法檢測示HGF 表達量達高峰；MTT 法檢測顯示BMSCs 增殖活性隨加入上清中HGF 含量的增加逐漸增強，加入10%（320 pg）時達高峰，之后劑量加大活性不再增加。 結論 Ad-HGF 可有效轉染BMSCs 并表達HGF 蛋白，HGF 蛋白可刺激BMSCs 增殖，BMSCs 可作為一種理想的基因載體細胞用于創傷修復。
目的 探討攜帶肝細胞生長因子的重組腺病毒（adenovirus hepatocyte growth factor，Ad-HGF）修飾的BMSCs 對實驗性2 型糖尿病大鼠創面修復的作用。 方法 采用密度梯度離心法體外分離、培養雄性Wistar 大鼠BMSCs，取第3 ～ 5 代BMSCs 以轉染復數100 轉染Ad-HGF 后備用。取20 只雌性Wistar 大鼠以高脂、高糖飼料加小劑量鏈脲菌素（streptozotocin，STZ，30 mg/kg）腹腔注射建立實驗性2 型糖尿病模型，并在大鼠背部兩側分別制備一直徑為1.5 cm 的圓形創面。根據治療方法不同將大鼠隨機分為4 組，每組5 只10 個創面：單純BMSCs 治療組（A 組），單純Ad-HGF 治療組（B 組），Ad-HGF 修飾的BMSCs 治療組（C 組）及溶劑對照組（D 組），創面制備即刻將相應細胞、病毒懸液及溶劑行創面邊緣多點注射，每個創面0.3 mL。注射后觀察創面愈合情況，記錄愈合時間，并于21 d 檢測創面的橫徑和縱徑；7、28 d 行HE 染色觀察組織愈合情況；3、7、14、28 d 分別用酶聯免疫法和熒光分光光度計檢測羥脯氨酸和糖基化終末產物（advanced glycosylation end products，AGEs）的含量。 結果 大體觀察示C 組于21 d 時創面基本愈合，橫徑和縱徑分別為0、（0.110 ± 0.024）cm，而A、B、D 組均部分創面未愈，橫徑和縱徑分別為A 組（0.470 ± 0.051）、（0.590 ± 0.041） cm，B 組（0.390 ± 0.042）、（ 0.480 ± 0.032）cm，D 組（0.700 ± 0.068）、（0.820 ± 0.068） cm，與C 組比較差異均有統計學意義（P lt;0.05）。A、B、C、D 組創面愈合時間分別為（28.3 ± 1.9）、（25.9 ± 2.3）、（20.5 ± 1.9）、（36.6 ± 5.1）d，C 組與其他各組比較差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。創面組織HE 染色示與其他各組相比，C 組7 d 時創面可見明顯的上皮細胞遷移現象，膠原形成良好，可見明顯炎性細胞浸潤；28 d 創面新生表皮平整，膠原減少，有豐富的新生小血管。與其他各組相比，注射后7、14 d C 組羥脯氨酸含量明顯增高（P lt; 0.05），而AGEs 含量在注射后14、28 d 顯著下降（P lt; 0.05）。 結 論 Ad-HGF修飾的BMSCs 異體移植可促進糖尿病大鼠創面修復。