目的 采用人永生化上皮角質形成細胞系 HaCaT 構建表皮模型，探討其作為皮膚刺激性替代實驗的可行性。 方法 取 HaCaT 細胞采用氣-液面培養的方式構建表皮模型，同法以采用人原代上皮角質形成細胞構建的表皮模型 EpiKutis?作為對照。HE 染色觀察兩種模型的組織形態；采用快速滲透實驗方法檢測兩種模型屏障功能（ET50 值）；取 20 種化學標準品分別于兩種模型表面受試 30 min，孵育 42 h 后 MTT 法測定組織相對活力百分比，判斷化學品刺激性，并與聯合國-化學品分類及標記全球協調制度（UN GHS）體內測試結果分類和經濟合作與發展組織（OECD）TG439（2013版） 中采用的體外替代方法（validated reference method，VRM）體外測試結果分類進行比較。 結果 HE 染色示，構建的 HaCaT 模型無完整復層化結構；屏障功能檢測結果示，ET50 值為 0.99 h；通過 20 種化學品檢測，HaCaT 模型的靈敏度為 100%，特異性為 50%，準確率為 75%；EpiKutis?模型靈敏度為 100%，特異性為 70%，準確率為 85%。 結論 HaCaT 細胞構建的表皮模型不具備完整的表皮皮膚生理結構特征，屏障功能較低，化學品體外皮膚刺激性測試結果不能完全滿足 OECD 關于刺激物的正確判定標準，不適宜作為化學品皮膚刺激性體外替代檢測的工具。