目的觀察溶血卵磷脂酰基轉移酶1(LPCAT1)自發突變小鼠視網膜組織和閃光視網膜電圖(F-ERG)改變情況。 方法Lpcat1基因自發突變純合子的rd11新生小鼠60只(實驗組)和與之同齡的野生型C57BL/6J小鼠60只(對照組)納入實驗。采用免疫熒光法檢測兩組小鼠視網膜組織中LPCAT1的表達情況。出生后3、6、9 d和2、4、6、8周,行視網膜石蠟切片觀察視網膜顯微結構;行全視野F-ERG檢測,記錄暗視桿體反應和明視錐體反應。 結果實驗組小鼠視網膜組織中LPCAT1呈陰性表達;對照組小鼠視網膜組織中LPCAT1呈陽性表達,主要分布于視網膜光感受器內節,神經節細胞層可見少量表達。光學顯微鏡觀察發現,實驗組小鼠于出生后9 d左右視網膜外核層已基本形成,其光感受器細胞核層數隨年齡增長而逐漸減少。對照組小鼠視網膜顯微結構正常。F-ERG檢測結果顯示,實驗組小鼠出生后2、4周暗視桿體系統反應存在,呈降低趨勢,出生后6~8周暗視桿體系統反應消失;對照組小鼠各時間點暗視桿體系統反應正常。出生后2周,實驗組和對照組小鼠b波振幅分別為(72.8±15.6)、(105.2±21.1) μV,實驗組較對照組降低,但差異無統計學意義(t=-2.760,P=0.025)。出生后4周,實驗組和對照組小鼠b波振幅分別為(20.6±6.4)、(231.8±32.0) μV,實驗組較對照組明顯降低,差異有統計學意義(t=-14.471,P=0.000)。實驗組小鼠出生后2、4、6周明視錐體系統反應存在,呈降低趨勢,出生后8周明視錐體系統反應消失;對照組小鼠各時間點明視錐體系統反應正常。出生后2、4周,實驗組小鼠b波振幅分別為(46.8±7.2)、(78.0±8.2) μV;對照組小鼠b波振幅分別為(42.8±6.4)、(91.4±9.4) μV。兩組比較,差異均無統計學意義(t=0.930、-2.401,P=0.379、0.043)。出生后6周,實驗組和對照組小鼠b波振幅分別為(17.2±2.0)、(116.2±12.9) μV,實驗組較對照組明顯降低,差異有統計學意義(t=-17.008,P=0.000)。 結論LPCAT1自發突變小鼠視網膜外層光感受器細胞核層數隨年齡增長而逐漸減少,F-ERG暗視桿體和明視錐體反應異常。
目的探討具有開放孔結構的左旋聚乳酸 ［poly（L-lactic acid），PLLA］/卵磷脂多孔支架的制備方法及成骨性能。方法采用熱致相分離法制備含不同比例卵磷脂（0、5%、10%、20%、30%、40%、50%）的 PLLA/卵磷脂多孔支架（分別對應為 A、B、C、D、E、F、G 組）。掃描電鏡觀察各支架表面形貌；廣角 X 射線衍射（X-ray diffraction，XRD）和差示掃描量熱法（differential scanning calorimetry，DSC）檢測各支架結晶度；測量各組支架吸水率；采用細胞計數試劑盒 8（cell counting kit 8，CCK-8）法檢測小鼠 BMSCs 在各支架表面的增殖情況；通過檢測 ALP 活性觀察小鼠 BMSCs 在各組支架上的成骨分化能力。最后使用 SD 大鼠顱骨缺損模型觀察含不同比例卵磷脂的支架在動物體內的骨修復情況，采用 Micro-CT 對缺損處進行三維模型重建，并對缺損處的新生骨體積和骨礦物密度進行定量分析。結果掃描電鏡觀察示，卵磷脂會導致支架孔徑略微縮小；當卵磷脂含量為 50% 時，支架表面會出現片狀結構。廣角 XRD 和 DSC 檢測示，支架結晶度隨卵磷脂含量的升高而逐漸降低。親水性測試示，隨著卵磷脂含量增加，支架的親水性逐漸增強。CCK-8 法檢測示，隨培養時間增加，BMSCs 在各組支架上均有明顯增殖；培養 7 d 時，C、D、E、F 組吸光度（A）值顯著高于 A、B、G 組（P<0.05），C、D、E、F 組間比較差異無統計學意義（P>0.05）。成骨誘導 14 d 時，隨卵磷脂含量增加，各組 ALP 活性出現了顯著差異，D、E、F、G 組 ALP 活性顯著高于 A、B、C 組（P<0.05）。大鼠顱骨缺損修復實驗中，Micro-CT 檢測及新生骨體積和骨礦物密度結果均顯示，含 30% 卵磷脂支架修復效果最佳。結論通過熱致相分離法制備的 PLLA/卵磷脂多孔支架的細胞相容性、成骨分化性能及骨修復能力顯著強于單純 PLLA 支架；卵磷脂含量適宜的 PLLA/卵磷脂多孔支架有望作為骨組織工程支架材料。