【摘要】 目的 通過觀察胰島素樣生長因子1( IGF-1) 作用過的骨髓間充質干細胞( BMSC) 對博萊霉素誘導的大鼠肺纖維化模型的影響, 探討治療肺纖維化的新方法。方法 體外分離、培養雄性6 周齡SD 大鼠的BMSC。將48 只雄性成年SD 大鼠隨機分為四組: 陰性對照組( N組) 、博萊霉素組( B 組) 、間充質干細胞組( M組) 及IGF-1 處理組( I 組) 。N組經氣管注入1 mL生理鹽水, B、M及I 組均經氣管注入1 mL博萊霉素( 5 mg/kg) 。在造模2 d 后, B 組大鼠經尾靜脈注入生理鹽水0. 5 mL, M組大鼠經尾靜脈注入CM-Dil 標記的BMSC 0. 5 mL( 細胞數2 ×106 ) , I 組注入經IGF-1 培育48 h 的相同數量的標記BMSC。在造模第7、14 及28 d批量處死各組大鼠, 留取肺組織行HE、Masson 染色評價肺組織病理變化, 冰凍切片觀察肺組織內細胞定植情況, 消化法測定肺組織羥脯氨酸( HYP) 含量,RT-PCR方法檢測各組大鼠肺組織肝細胞生長因子( HGF) mRNA 的表達。結果 M組和I 組肺組織在顯微鏡下可見紅色熒光標記的BMSC, I 組不同時間點的累積光密度值均高于M組( P lt; 0. 05) , 且M組和I 組的熒光在28 d 時均有所衰減。M組和I 組的炎癥在實驗早期便輕于B 組( P lt; 0. 05) , 其中I 組更明顯( P lt;0. 05) , 至28 d 時M組和I 組炎癥評分與N組的差異無統計學意義。B 組、M組和I 組肺纖維化評分在博萊霉素注入14 d 時均明顯高于N組( P lt;0. 05) , 28 d 時M組和I 組的肺纖維化程度輕于B 組( P lt;0. 05) , 但M組與I 組之間的差異始終無統計學意義。B 組HYP含量在整個實驗階段均高于其他三組( P lt;0. 01) , 而I 組HYP 含量始終與N組無顯著差異; M組HYP 含量在早期大于I 組和N組, 至28 d 降至與N組間無顯著差異。N組和B 組的HGF mRNA 表達一直保持在較低水平, M組和I 組HGF mRNA 的表達水平在第7 d 時無顯著差異, 均高于N組和B 組( P lt; 0. 01) , 至第14 d 時I 組開始高于M 組( P lt; 0. 05) , 28 d時差異更明顯( P lt; 0. 01) 。結論 IGF-1 可以促進BMSC 異體定植從而對肺損傷進行更有效的修復, 機制可能是其促進了BMSC 分泌HGF。
【摘要】 目的 通過建立活體大鼠心肌缺血再灌注模型，模擬人類冠心病，研究聚合血紅蛋白（PolyHb）在心肌缺血再灌注中的保護作用，探究PolyHb在冠心病領域中的保護和治療作用。 方法 將45只Sprague-Dawley（SD）大鼠隨機分成3組:實驗組（15只）、對照組（15只）、假手術組（15只），建立大鼠心肌缺血模型。實驗組建立動物模型后，結扎冠狀動脈35 min，并于結扎后5 min，通過SD大鼠尾靜脈按1 mL/min的速度注射1 mL（100 g/L）的PolyHb溶液。缺血完成后開放灌注120 min。對照組建立動物模型，結扎冠狀動脈35 min，并于結扎后5 min，通過SD大鼠尾靜脈按1 mL/min的速度注射1 mL生理鹽水。缺血完成后開放灌注120 min。假手術組僅建立動物模型，但不結扎冠狀動脈，也不再灌注。比較3組SD大鼠的血流動力學參數左室內壓最大上升和下降速率、心肌酶（血清肌酸激酶、乳酸脫氫酶）及病理學檢查（梗死心肌占總心肌面積的百分比），來衡量PolyHb的作用。 結果 與對照組比較，用PolyHb處理的實驗組可增強再灌注時左室內壓最大上升和下降速率（Plt;0.05），減少血液中血清肌酸激酶和乳酸脫氫酶的含量（Plt;0.05），并明顯減少心肌梗死面積百分比（Plt;0.05）。 結論 在心肌缺血的SD大鼠中，PolyHb可以有效的降低缺血再灌注損傷，從而達到心肌保護作用。【Abstract】 Objective To investigate the protective effect of polymerized hemoglobin (PolyHb) for myocardial ischemia-reperfusion and explore the field of polymerized hemoglobin in the protection and treatment of human coronary heart disease, by simulating human coronary heart disease and establishing myocardial ischemia-reperfusion model in living rats. Methods Forty-five Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into 3 groups: experimental group (n=15), control group (n=15), and sham operation (SHAM) group (n=15). Rat models of myocardial ischemia-reperfusion were established. For the rats in the experimental group, we ligated their left coronary artery for 35 minutes, and injected 1 mL (100 g/L) PolyHb solution into their body at a speed of 1 mL/min 5 minutes later. After ischemia was completed, reperfusion was performed for 120 minutes. The procedures carried out for the rats in the control group were exactly the same except that the PolyHB solution was replaced by 1 mL saline solution. Ligation of the artery and reperfusion were not performed on the rats in the SHAM group. Hemodynamic parameters (maximal rising and falling rates of left ventricular pressure), enzymes (serum creatine kinase, lactate dehydrogenase) and results of histopathologic examinations (percentage of myocardial infarction area over the total myocardial area) were measured and compared among the three groups to evaluate the function of PolyHb. Results Compared with the control group, the experimental group treated with PolyHb had higher maximum rising and falling rates of left ventricular pressure (Plt;0.05), lower blood levels of creatine kinase and lactate dehydrogenase (Plt;0.05), and lower percentage of myocardial infarction area over the total myocardial area (Plt;0.05). Conclusion Polymerized hemoglobin can effectively reduce the ischemia-reperfusion injury and achieve myocardial protection in SD rats with myocardial ischemia.