目的探索構建可穩定表達修飾基因人BMP-2(human BMP-2,hBMP-2)的細胞組織工程骨促進骨再生的可行性。 方法從成人肌肉組織中以RT-PCR方法克隆hBMP-2基因全長,連接構建真核質粒載體,經脂質體轉染人BMSCs(human BMSCs,hBMSCs)。設定hBMP-2基因轉染細胞組、空質粒載體轉染細胞組以及同代細胞正常培養組,經G418篩選培養后,分別行細胞ALP比活性測定、細胞hBMP-2免疫組織化學染色、hBMP-2 mRNA表達水平的RT-PCR檢測及細胞上清的hBMP-2分泌水平的免疫酶斑點(dot-ELISA)檢測。然后將基因轉染細胞與羥基磷灰石(hydroxyapatite,HA)材料進行復合培養,觀察組織工程骨的構建情況。動物實驗分4組,每組3只裸鼠,于裸鼠雙側背脊肌內分別植入hBMP-2基因轉染細胞與HA材料復合培養體(A組),空載質粒轉染細胞復合HA材料(B組)、單純基因轉染細胞懸液(C組)以及hBMP-2基因質粒加脂質體(D組)作為對照。4組裸鼠均于4周后取材、脫鈣、切片,行HE染色及阿爾新藍染色觀察新骨形成情況。 結果hBMP-2基因轉染細胞在培養48 h和3周時均可表達分泌外源基因hBMP-2,免疫組織化學染色呈陽性,且成骨分化的ALP比活性明顯高于兩對照組(P<0.05)。轉染細胞能良好貼附于HA表面生長。動物實驗中,A組3只裸鼠6側背脊肌內4側有較多新骨生成;B組3只裸鼠中的1只雙側背脊肌內有新骨生成;C組未發現新骨生成;D組1只裸鼠1側背脊肌內發現少量成骨。 結論hBMP-2基因轉染修飾的hBMSCs與HA復合培養構建的組織工程骨,可瞬時和穩定表達分泌hBMP-2,并能促進裸鼠肌肉組織內異位成骨。
目的比較研究Prodisc-C Vivo人工椎間盤置換術與零切跡Zero-P融合術治療單節段頸椎病的早期療效及其對頸椎節段活動度的影響。方法回顧分析2015年1月—2018年12月收治且符合選擇標準的56例單節段頸椎病患者臨床資料,根據手術方式分為研究組(27例,采用Prodisc-C Vivo人工椎間盤置換術)和對照組(29例,采用零切跡Zero-P融合術)。兩組患者性別、年齡、頸椎病類型、病程、累及節段及術前疼痛視覺模擬評分(VAS)、日本骨科協會(JOA)評分、頸椎功能障礙指數(NDI)、手術節段活動度、上下相鄰節段活動度、頸椎整體活動度及頸椎曲度等一般指標比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。記錄并比較兩組手術時間、術中出血量、術后住院時間、術后恢復工作時間及臨床療效指標(VAS評分、JOA評分、NDI及各評分改善率)和影像學指標(手術節段活動度、上下相鄰節段活動度、頸椎整體活動度、頸椎曲度及假體位置、骨質吸收、異位骨化等)。結果兩組手術時間和術中出血量比較差異無統計學意義(P>0.05);研究組術后住院時間和術后恢復工作時間明顯少于對照組(P<0.05)。兩組患者均獲隨訪,隨訪時間12~64個月,平均26個月。均未出現肢體臟器功能損害、內植物失敗及相鄰節段退變嚴重需再次手術等并發癥。術后各時間點兩組VAS評分、JOA評分及NDI均較術前顯著改善(P<0.05),術后各時間點兩組間各評分比較差異均無統計學意義(P>0.05);末次隨訪時兩組間各評分改善率比較差異均無統計學意義(P>0.05)。研究組術后不同程度維持了手術節段活動度,對照組術后手術節段活動度基本消失,兩組比較差異有統計學意義(P<0.05)。末次隨訪時,研究組上、下相鄰節段活動度與術前比較差異無統計學意義(P>0.05),而對照組上位相鄰節段活動度較術前明顯增加(P<0.05);兩組頸椎整體活動度及頸椎曲度在術后3個月有所下降,末次隨訪時又有不同程度增加,組間及組內比較差異均無統計學意義(P>0.05)。末次隨訪時X線片及CT檢查示,所有患者未見假體松動、下沉或移位等;研究組發生人工椎間盤下椎體終板前緣部分骨質吸收2例(7.4%),未影響手術節段活動度的異位骨化3例(11.1%)。結論Prodisc-C Vivo人工椎間盤置換術與零切跡Zero-P融合術治療單節段頸椎病早期療效均滿意,前者還能在一定程度上維持頸椎手術節段活動度,同時減少術后相鄰節段代償性過度活動的發生。