目的觀察絲氨酸蛋白酶HtrA1沉默對光損傷人視網膜色素上皮(RPE)細胞的影響。 方法體外培養人RPE細胞,取第8～12代生長良好的傳代細胞用于實驗。將細胞分為正常對照組、光損傷模型組。采用波長400 nm的藍色節能燈以(2000±500) Lux持續光照RPE細胞6 h建立光損傷模型。建模后光損傷模型組再分為針對HtrA1的小干擾RNA(HtrA1 siRNA)組、陰性對照組、空白對照組。應用脂質體RNAimax將HtrA1 siRNA轉染至HtrA1 siRNA組細胞;陰性對照組細胞轉染非特異的陰性siRNA;空白對照組為單純光損傷細胞。采用細胞計數試劑盒、transwell小室法及流式細胞儀檢測各組細胞增生、遷徙、凋亡以及細胞周期情況;實時聚合酶鏈反應和蛋白免疫印跡法檢測細胞中HtrA1和血管內皮生長因子A(VEGF-A)mRNA、蛋白質表達。 結果光損傷模型組細胞中HtrA1 mRNA、蛋白表達均較正常對照組細胞明顯升高,差異有統計學意義(t=17.62、15.09,P<0.05)。與陰性對照組、空白對照組比較,HtrA1 siRNA組細胞增生(t=6.37、4.52)、遷徙能力(t=9.56、12.13)、凋亡率(t=23.37、29.08)明顯下降,差異有統計學意義(P<0.05);細胞停留在G0/G1期數目增多(t=6.24、4.93),差異有統計學意義(P<0.05);HtrA1、VEGF-A mRNA(t=17.36、11.32、7.29、4.05)和蛋白(t=12.02、15.28、4.98、6.24)表達均明顯降低,差異有統計學意義(P<0.05)。 結論特異性沉默HtrA1基因表達可降低藍光對人RPE細胞增生、遷徙能力的損傷和細胞凋亡率;下調VEGF-A的表達。