目的探討鹿茸軟骨制備脫細胞基質材料的可行性以及生物相容性,為軟骨修復重建探索新材料。 方法取梅花鹿鹿茸生長中心間充質層,進行由 DNA 酶、RNA 酶、抑肽酶等介導的脫細胞處理;行組織學和 DNA 含量檢測,評價脫細胞效果。取第 2 代鹿生茸區骨膜(antlerogenic periosteum,AP)細胞,行熒光干細胞標記明確其干細胞特性后,用 PKH26 熒光標記并與制備的間充質層脫細胞基質進行復合培養;7 d 后取材行HE染色觀察以及熒光顯微鏡下觀察 PKH26 標記的 AP 細胞在基質表面生長情況。以上觀測均以未復合 AP 細胞的脫細胞基質作為對照。將復合培養 7 d 的樣本移植至裸鼠一側腹股溝(實驗組),取空白培養樣本移植于另一側(對照組)。于移植后 7、21 d 取材行 HE 染色,同時對組織進行冰凍切片并在熒光顯微鏡下觀察 PKH26 標記成功的 AP 細胞在脫細胞基質表面及內部的生長情況,評價含 AP 細胞的脫細胞基質在裸鼠體內的組織相容性。 結果HE 和 DAPI 染色顯示脫細胞處理后材料中無細胞殘留,DNA 含量為(19.367±5.254)ng/mg,較脫細胞處理前的(3 805.500±519.119)ng/mg 顯著降低(t=12.630,P=0.000),提示成功制備間充質層脫細胞基質。AP 細胞與間充質層脫細胞基質復合培養 7 d 后,AP 細胞主要黏附于材料表面,部分進入脫細胞基質內部。植入裸鼠體內后,隨觀察時間延長,接種 AP 細胞可以在脫細胞基質材料中增殖并逐漸進入材料內部,并誘導血管生成。 結論實驗成功制備鹿茸軟骨脫細胞基質,該基質材料在離體和活體情況下適于種子細胞(AP 細胞)的黏附和增殖,并具有刺激血管生成的功能,為其用于軟骨組織修復提供理論依據。