目的 構建hnRNP K特異性siRNA真核表達載體，體外觀察對hnRNP K基因的沉默作用。方法 采用基因克隆技術，將合成的特異性hnRNP K RNA干擾寡核苷酸序列插入真核表達載體pSUPER，構建hnRNP K siRNA真核表達載體。采用Lipofect AMINE2000將pSUPER空載體和3個重組質粒（pSUPER/hnRNP K siRNAa，pSUPER/hnRNP K siRNAc和pSUPER/siRNAn）分別導入A549肺癌細胞（a、c、n分別代表hnRNP K編碼序列中的A鏈和C鏈，以及無意義的對照序列Non鏈）。24 h后用RT-PCR和Western blotting技術檢測各實驗組肺癌細胞內hnRNP K mRNA及蛋白水平的表達情況。結果 成功構建了hnRNP K siRNA真核表達載體。轉染hnRNP K siRNAa、hnRNP K siRNAc的肺癌細胞24 h后hnRNP K mRNA相對表達量分別為0.24±0.53和0.28±0.57，較對照組顯著降低（P均lt;0.01）；hnRNP K蛋白灰度值分別為0.23±0.11和0.28±0.09，較對照組顯著降低（P均lt;0.05）。結論 構建的RNA干擾真核表達載體能明顯干擾A549細胞hnRNP K mRNA及蛋白的表達，為進一步研究hnRNP K基因的功能并將其進一應用于肺癌的治療研究奠定了基礎。