目的比較OA與正常膝關節滑膜細胞中高遷移率族蛋白1(high mobility group box chromosomalprotein 1,HMGB1)的差異,探討HMGB1在OA中的作用。 方法取OA與正常膝關節滑膜組織,采用組織塊培養法分離培養關節滑膜細胞,倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態,應用免疫熒光染色、免疫組織化學染色以及Western blot檢測比較兩種滑膜細胞HMGB1表達差異。構建HMGB1小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)的真核表達載體Pgenesil-1/HMGB1 siRNA,轉染至OA滑膜細胞中(siRNA轉染組),以Pgenesil-1質粒轉染至OA滑膜細胞(空載體轉染組),以OA滑膜細胞(未轉染組)作為對照。Western blot檢測各組OA滑膜細胞中HMGB1蛋白的表達,ELISA法檢測各組滑膜細胞培養上清液中IL-1β及TNF-α含量。 結果原代培養的OA與正常膝關節滑膜細胞呈長梭狀,為成纖維細胞樣細胞。免疫組織化學染色及免疫熒光染色觀察示,OA滑膜細胞中HMGB1以細胞質分布為主、細胞核中較少,而正常滑膜細胞則相反。Western blot檢測示,OA滑膜細胞中HMGB1高表達,表達量為0.687±0.025,顯著高于正常滑膜細胞的0.172±0.030(t=32.159,P=0.000)。酶切鑒定顯示成功構建siRNA表達載體Pgenesil-1/HMGB1 siRNA。Western blot檢測顯示,siRNA轉染組HMGB1蛋白表達為0.134±0.048,顯著低于空載體轉染組的0.581±0.032及未轉染組的0.514±0.069(P<0.05)。ELISA法檢測siRNA轉染組IL-1β及TNF-α含量均顯著低于空載體轉染組及未轉染組(P<0.05)。 結論膝關節滑膜細胞中HMGB1表達的上調和表達位置的改變(從細胞核移位至細胞質)與OA密切相關,應用siRNA技術抑制HMGB1表達可明顯降低OA滑膜細胞分泌IL-1β和TNF-α的能力,延緩OA的炎性反應。