目的 研究microRNA-129 (mir-129)對骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)向心肌分化過程中的促進作用及其機制。 方法 分離培養SD大鼠骨髓間充質干細胞,通過慢病毒轉染使細胞獲得過表達基因分為4組:對照組(MSCs);慢病毒空轉組(Lentiviral vectors+MSCs,Lv-MSCs);mir-129單轉染組(mir-129-MSCs);mir-129+糖原合成酶激酶(GSK-3β)雙轉染組(mir-129+GSK-3β-MSCs)。以10 μmol/L濃度的5-氮雜胞苷(5-Aza)誘導MSCs向心肌細胞分化后,分別以第1 d、5 d、10 d、15 d和20 d為時間點,采用realtime-PCR檢測 GATA-4、NKx2.5、MEF-2C的mRNA水平,以第10 d、15 d、20 d為時間點,用蛋白質印跡法(Westernblotting)檢測肌鈣蛋白I (cTnI)、結蛋白(Desmin)、GSK-3β以及磷酸化β-catenin與非磷酸化β-catenin的表達量。結果 與對照組比較,隨著研究時間點的推移,mir-129單轉染組反映心肌分化的相關標記物基因和蛋白水平明顯升高,GSK-3β的表達水平則顯著降低,非磷酸化β-catenin/磷酸化β-catenin比值升高;當MSCs同時過表達mir-129和GSK-3β時,相關的心肌標記物基因和蛋白均低于mir-129單轉染組,非磷酸化β-catenin/磷酸化β-catenin比值明顯降低。 結論 過表達mir-129能夠促進MSCs向心肌細胞分化,可能的機制是通過抑制GSK-3β的生成,從而削弱了對β-catenin的磷酸化抑制,后者游離入核開啟調控干細胞下游的心肌分化途徑。