MicroRNA-129 促進骨髓間充質干細胞向心肌分化的實驗研究_《中國胸心血管外科臨床雜志》

作者：

路喆鑫 , 連鋒 , 薛松 , 朱洪生

上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院　心血管外科，上海　200147;

關鍵詞：

骨髓間充質干細胞　心肌分化　microRNA-129 　糖原合成酶激酶

DOI：

10.7507/1007-4848.20130176

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目的　研究microRNA-129 （mir-129）對骨髓間充質干細胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BM-MSCs）向心肌分化過程中的促進作用及其機制。方法分離培養SD大鼠骨髓間充質干細胞，通過慢病毒轉染使細胞獲得過表達基因分為4組：對照組（MSCs）；慢病毒空轉組（Lentiviral vectors＋MSCs，Lv-MSCs）；mir-129單轉染組（mir-129-MSCs）；mir-129＋糖原合成酶激酶（GSK-3β）雙轉染組（mir-129＋GSK-3β-MSCs）。以10 μmol/L濃度的5-氮雜胞苷（5-Aza）誘導MSCs向心肌細胞分化后，分別以第1 d、5 d、10 d、15 d和20 d為時間點，采用realtime-PCR檢測 GATA-4、NKx2.5、MEF-2C的mRNA水平，以第10 d、15 d、20 d為時間點，用蛋白質印跡法（Westernblotting）檢測肌鈣蛋白I （cTnI）、結蛋白（Desmin）、GSK-3β以及磷酸化β-catenin與非磷酸化β-catenin的表達量。結果與對照組比較，隨著研究時間點的推移，mir-129單轉染組反映心肌分化的相關標記物基因和蛋白水平明顯升高，GSK-3β的表達水平則顯著降低，非磷酸化β-catenin/磷酸化β-catenin比值升高；當MSCs同時過表達mir-129和GSK-3β時，相關的心肌標記物基因和蛋白均低于mir-129單轉染組，非磷酸化β-catenin/磷酸化β-catenin比值明顯降低。結論過表達mir-129能夠促進MSCs向心肌細胞分化，可能的機制是通過抑制GSK-3β的生成，從而削弱了對β-catenin的磷酸化抑制，后者游離入核開啟調控干細胞下游的心肌分化途徑。

引用本文： 路喆鑫,連鋒,薛松,朱洪生. MicroRNA-129 促進骨髓間充質干細胞向心肌分化的實驗研究. 中國胸心血管外科臨床雜志, 2013, 20(5): 570-576. doi: 10.7507/1007-4848.20130176 復制

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