引用本文： 阿不都吉力力·居來提, 圖爾蓀阿依·艾爾肯, 胡昕, 黃毅, 齊曼古力·吾守爾. ADAM33基因多態性與中國漢族人群支氣管哮喘相關性的Meta分析. 中國循證醫學雜志, 2016, 16(1): 54-59. doi: 10.7507/1672-2531.20160012 復制
支氣管哮喘是一種慢性氣道炎癥為特征的疾病，其呼吸道癥狀主要包括喘息、氣促、胸悶、咳嗽和可逆性氣流受限。哮喘的發病機制復雜，已有的研究顯示，遺傳易感性在哮喘發病機制中發揮著重要作用 [1, 2]。解整合素-金屬蛋白酶33（ADAM33）基因位于人類染色體20p13，它是首個通過定位克隆方法發現的支氣管哮喘易感性基因 [3]，其至少包含70個單核苷酸多態性位點。已有研究證實，在不同的人群中，該基因的多態性與哮喘發病風險相關 [4]。在我國人群中，也有不少關于該基因多態性與哮喘相關性的研究，但是由于單個研究樣本量少，且結果缺乏一致性。因此本研究采用Meta分析的方法對已經發表的ADAM33基因多態性與我國漢族人群哮喘易感性的研究進行分析，以期為我國哮喘發病機制研究提供依據。
1 資料與方法
1.1 納入與排除標準
1.1.1 研究類型
ADAM33基因多態性與中國漢族人群哮喘易感性關系的病例-對照研究。
1.1.2 研究對象
病例組為經臨床明確診斷為支氣管哮喘的中國漢族患者，對照組為健康人群。
1.1.3 暴露因素
T2、S2、V4位點等位多態性。
1.1.4 結局指標
支氣管哮喘的發病風險。
1.1.5 排除標準
① 重復發表的文獻；② 會議摘要；③ 數據不全或無法獲取數據的文獻；④ 非中、英文文獻；⑤ 對照組不符合哈迪溫伯格平衡（HWE）檢驗。
1.2 檢索策略
計算機檢索PubMed、Web of Science、CNKI、WanFang Data和VIP數據庫，搜集有關ADAM33基因多態性與中國漢族人群支氣管哮喘相關性的病例-對照研究，檢索時限均為建庫至2014年12月。采用主題詞和自由詞相結合的方式進行檢索。英文檢索詞包括asthma、ADAM33、rs2280090、rs528557、rs2787094、polymorphism、Chinese。中文檢索詞包括ADAM33、rs2280090、rs528557、rs2787094、多態性、支氣管哮喘。以PubMed為例，其具體檢索策略見框1。
框 1 PubMed檢索策略
#1 asthma #2 ADAM33 OR rs2280090OR rs528557OR rs2787094 #4 polymorphism #5 Chinese #6 #1 AND #2 AND #4 AND #5
1.3 文獻篩選、資料提取與偏倚風險評價
由2位評價者獨立篩選文獻、提取資料，評價納入研究的偏倚風險，如遇分歧則討論解決或交由第三方協助裁定。資料提取內容主要包括：① 納入研究的基本特征，包括第一作者、發表時間、國家、種族；② 納入患者的基本特征，包括診斷標準、樣本量、SNP研究位點等；③ 等位基因或基因型頻率、基因型檢測方法；④ 研究設計類型及偏倚風險評價的關鍵要素。采用 NOS 量表（Newcastle-Ottawa Scale） [5]評價納入研究的偏倚風險。
1.4 統計分析
采用RevMan 5.3軟件進行Meta分析。首先計算對照組基因型是否符合HWE，若P＜0.05，則認為對照組基因型不符合HWE。采用χ2檢驗對納入研究進行異質性檢驗，檢驗水平為α=0.10，同時結合I2判斷異質性的大小。當不存在異質性時，采用固定效應模型進行合并分析；反之，則根據臨床異質性大小按年齡進行亞組分析或采用隨機效應模型進行合并。分別計算每一多態性的5種遺傳模型的OR值及其95%CI。采用Begg’s漏斗圖和Egger’s檢驗評價發表偏倚。Meta分析的檢驗水準為α=0.05。
2 結果
2.1 文獻檢索結果
初檢共獲得相關文獻187篇，經逐層篩選后，最終納入8個病例-對照研究 [10-17]。文獻篩選流程及結果見圖 1。
圖1
文獻篩選流程及結果
2.2 納入研究的基本特征與偏倚風險評價
納入研究的基本特征和偏倚風險評價結果見表 1。僅4個研究 [10-13, 15]的NOS評分大于8分，偏倚風險較大。納入研究的各位點基因型分布見表 2～4。
表1
納入研究的基本特征和偏倚風險評價
表2
ADAM33 T2多態性基因型分布（例）
表3
ADAM33 S2多態性基因型分布（例）
表4
ADAM33 V4多態性基因型分布（例）
2.3 Meta分析結果
2.3.1 ADAM33
T2（A/G）多態性共納入7個研究，Meta分析結果見表 5。由表 5可知：在總體分析中，ADAM33基因T2多態性與哮喘發病風險降低具有相關性[AA+AG vs. GG：OR=0.316，95%CI（0.151，0.659），P=0.002；AA vs. GG+AG：OR=0.518，95%CI（0.343，0.784），P=0.002；AA vs. GG：OR=0.281，95%CI（0.135，0.585），P=0.001；AG vs. GG：OR=0.549，95%CI（0.371，0.814），P=0.003]。進一步按年齡進行的亞組分析結果提示，T2多態性與降低成人和兒童哮喘發病風險均有相關性。
表5
ADAM33 T2（A/G）多態性與中國人支氣管哮喘易感性關系的Meta分析結果
2.3.2 ADAM33
S2（C/G）多態性共納入5個研究，Meta分析結果見表 6。由表 6可知：在總體分析中，ADAM33基因S2多態性與哮喘發病風險增加具有相關性[GG+GC vs. CC：OR=1.271，95%CI（1.023，1.578），P=0.030；GC vs. CC：OR=1.357，95%CI（1.053，1.750），P=0.018]。進一步按年齡進行的亞組分析結果提示，S2多態性與增加成人哮喘發病風險具有相關性，但由于兒童僅納入1個研究，未進行分析。
表6
ADAM33 S2（C/G）多態性與中國人支氣管哮喘易感性關系的Meta分析
2.3.3 ADAM33
V4（C/G）多態性共納入5個研究，Meta分析結果見表 7。由表 7可知：在總體分析中，ADAM33基因V4多態性與哮喘發病風險不具有相關性[GG+GC vs. CC：OR=1.561，95%CI（0.638，3.823），P=0.330]。進一步按年齡進行的亞組分析結果提示，該多態性與成人和兒童哮喘發病風險均無相關性。
表7
ADAM33 V4（C/G）多態位點與中國人支氣管哮喘易感性關系的Meta分析結果
2.4 發表偏倚
Egger’s檢驗結果顯示，除S2位點隱性模型及雜合子模型存在發表偏倚（P=0.027；P=0.033）外，T2和V4位點各模型均未見明顯的發表偏倚。
3 討論
支氣管哮喘發病機制復雜，遺傳因素是重要原因之一。因此，支氣管哮喘候選基因研究是國內外病因學研究的熱點。ADAM33廣泛存在于多種生物體內，屬于Ⅰ型跨膜蛋白 [6]。人類ADAM33基因位于20p13，長度約2439bp，包含22個外顯子和21個內含子，其編碼的蛋白質包含813個氨基酸。目前已有多個研究提示ADAM33基因多態性與中國人哮喘發病風險具有相關性，但是目前結論尚不統一。
本次Meta分析共納入了8個病例-對照研究，包括1 651例支氣管哮喘患者和1 639例對照。Meta分析結果顯示ADAM33基因T2多態性與與中國漢族人群支氣管哮喘易感性降低有關，突變等位基因A和基因型AA可能是其發病風險降低的因素。按年齡進行的亞組分析結果顯示該多態性等位基因A與成人哮喘發病風險降低相關，而AA+AG基因型與兒童哮喘發病風險相關，進一步證實了該多態性與中國人哮喘發病風險降低相關性沒有年齡差異。此外，我們還發現S2多態性與哮喘發病風險相關，由于其僅納入4個成人哮喘研究和1個兒童哮喘研究，我們僅對成人哮喘研究進行了進一步合并分析，結果顯示該多態性與中國人成人哮喘發病風險增加具有相關性。由于未納入更多的兒童研究，因此將來的研究應該進一步討論該多態性是否也與中國兒童哮喘發病風險相關。在對V4進行的Meta分析中，結果顯示，該多態性與中國人哮喘發病風險不相關，按年齡進行的亞組分析也未發現具有統計學意義的結果，提示該多態性可能與我國哮喘發病風險不相關。
本研究的局限性：① 納入研究數量較少，且部分研究質量不高，可能會影響本Meta分析結果的可靠性；② 因納入研究未報道如臨床分期、性別等因素，因此我們未能對ADAM33基因多態性聯合這些因素對中國漢族人群支氣管哮喘易感性的影響進行分析。
終上所述，當前證據顯示ADAM33 T2（A/G）多態性和S2多態性與中國人哮喘發病風險相關，但V4多態性與中國人哮喘不相關。受納入研究的數量和質量的限制，本研究結論尚需進一步開展更多高質量的研究進行驗證。
支氣管哮喘是一種慢性氣道炎癥為特征的疾病，其呼吸道癥狀主要包括喘息、氣促、胸悶、咳嗽和可逆性氣流受限。哮喘的發病機制復雜，已有的研究顯示，遺傳易感性在哮喘發病機制中發揮著重要作用 [1, 2]。解整合素-金屬蛋白酶33（ADAM33）基因位于人類染色體20p13，它是首個通過定位克隆方法發現的支氣管哮喘易感性基因 [3]，其至少包含70個單核苷酸多態性位點。已有研究證實，在不同的人群中，該基因的多態性與哮喘發病風險相關 [4]。在我國人群中，也有不少關于該基因多態性與哮喘相關性的研究，但是由于單個研究樣本量少，且結果缺乏一致性。因此本研究采用Meta分析的方法對已經發表的ADAM33基因多態性與我國漢族人群哮喘易感性的研究進行分析，以期為我國哮喘發病機制研究提供依據。
1 資料與方法
1.1 納入與排除標準
1.1.1 研究類型
ADAM33基因多態性與中國漢族人群哮喘易感性關系的病例-對照研究。
1.1.2 研究對象
病例組為經臨床明確診斷為支氣管哮喘的中國漢族患者，對照組為健康人群。
1.1.3 暴露因素
T2、S2、V4位點等位多態性。
1.1.4 結局指標
支氣管哮喘的發病風險。
1.1.5 排除標準
① 重復發表的文獻；② 會議摘要；③ 數據不全或無法獲取數據的文獻；④ 非中、英文文獻；⑤ 對照組不符合哈迪溫伯格平衡（HWE）檢驗。
1.2 檢索策略
計算機檢索PubMed、Web of Science、CNKI、WanFang Data和VIP數據庫，搜集有關ADAM33基因多態性與中國漢族人群支氣管哮喘相關性的病例-對照研究，檢索時限均為建庫至2014年12月。采用主題詞和自由詞相結合的方式進行檢索。英文檢索詞包括asthma、ADAM33、rs2280090、rs528557、rs2787094、polymorphism、Chinese。中文檢索詞包括ADAM33、rs2280090、rs528557、rs2787094、多態性、支氣管哮喘。以PubMed為例，其具體檢索策略見框1。
框 1 PubMed檢索策略
#1 asthma #2 ADAM33 OR rs2280090OR rs528557OR rs2787094 #4 polymorphism #5 Chinese #6 #1 AND #2 AND #4 AND #5
1.3 文獻篩選、資料提取與偏倚風險評價
由2位評價者獨立篩選文獻、提取資料，評價納入研究的偏倚風險，如遇分歧則討論解決或交由第三方協助裁定。資料提取內容主要包括：① 納入研究的基本特征，包括第一作者、發表時間、國家、種族；② 納入患者的基本特征，包括診斷標準、樣本量、SNP研究位點等；③ 等位基因或基因型頻率、基因型檢測方法；④ 研究設計類型及偏倚風險評價的關鍵要素。采用 NOS 量表（Newcastle-Ottawa Scale） [5]評價納入研究的偏倚風險。
1.4 統計分析
采用RevMan 5.3軟件進行Meta分析。首先計算對照組基因型是否符合HWE，若P＜0.05，則認為對照組基因型不符合HWE。采用χ2檢驗對納入研究進行異質性檢驗，檢驗水平為α=0.10，同時結合I2判斷異質性的大小。當不存在異質性時，采用固定效應模型進行合并分析；反之，則根據臨床異質性大小按年齡進行亞組分析或采用隨機效應模型進行合并。分別計算每一多態性的5種遺傳模型的OR值及其95%CI。采用Begg’s漏斗圖和Egger’s檢驗評價發表偏倚。Meta分析的檢驗水準為α=0.05。
2 結果
2.1 文獻檢索結果
初檢共獲得相關文獻187篇，經逐層篩選后，最終納入8個病例-對照研究 [10-17]。文獻篩選流程及結果見圖 1。
圖1
文獻篩選流程及結果
2.2 納入研究的基本特征與偏倚風險評價
納入研究的基本特征和偏倚風險評價結果見表 1。僅4個研究 [10-13, 15]的NOS評分大于8分，偏倚風險較大。納入研究的各位點基因型分布見表 2～4。
表1
納入研究的基本特征和偏倚風險評價
表2
ADAM33 T2多態性基因型分布（例）
表3
ADAM33 S2多態性基因型分布（例）
表4
ADAM33 V4多態性基因型分布（例）
2.3 Meta分析結果
2.3.1 ADAM33
T2（A/G）多態性共納入7個研究，Meta分析結果見表 5。由表 5可知：在總體分析中，ADAM33基因T2多態性與哮喘發病風險降低具有相關性[AA+AG vs. GG：OR=0.316，95%CI（0.151，0.659），P=0.002；AA vs. GG+AG：OR=0.518，95%CI（0.343，0.784），P=0.002；AA vs. GG：OR=0.281，95%CI（0.135，0.585），P=0.001；AG vs. GG：OR=0.549，95%CI（0.371，0.814），P=0.003]。進一步按年齡進行的亞組分析結果提示，T2多態性與降低成人和兒童哮喘發病風險均有相關性。
表5
ADAM33 T2（A/G）多態性與中國人支氣管哮喘易感性關系的Meta分析結果
2.3.2 ADAM33
S2（C/G）多態性共納入5個研究，Meta分析結果見表 6。由表 6可知：在總體分析中，ADAM33基因S2多態性與哮喘發病風險增加具有相關性[GG+GC vs. CC：OR=1.271，95%CI（1.023，1.578），P=0.030；GC vs. CC：OR=1.357，95%CI（1.053，1.750），P=0.018]。進一步按年齡進行的亞組分析結果提示，S2多態性與增加成人哮喘發病風險具有相關性，但由于兒童僅納入1個研究，未進行分析。
表6
ADAM33 S2（C/G）多態性與中國人支氣管哮喘易感性關系的Meta分析
2.3.3 ADAM33
V4（C/G）多態性共納入5個研究，Meta分析結果見表 7。由表 7可知：在總體分析中，ADAM33基因V4多態性與哮喘發病風險不具有相關性[GG+GC vs. CC：OR=1.561，95%CI（0.638，3.823），P=0.330]。進一步按年齡進行的亞組分析結果提示，該多態性與成人和兒童哮喘發病風險均無相關性。
表7
ADAM33 V4（C/G）多態位點與中國人支氣管哮喘易感性關系的Meta分析結果
2.4 發表偏倚
Egger’s檢驗結果顯示，除S2位點隱性模型及雜合子模型存在發表偏倚（P=0.027；P=0.033）外，T2和V4位點各模型均未見明顯的發表偏倚。
3 討論
支氣管哮喘發病機制復雜，遺傳因素是重要原因之一。因此，支氣管哮喘候選基因研究是國內外病因學研究的熱點。ADAM33廣泛存在于多種生物體內，屬于Ⅰ型跨膜蛋白 [6]。人類ADAM33基因位于20p13，長度約2439bp，包含22個外顯子和21個內含子，其編碼的蛋白質包含813個氨基酸。目前已有多個研究提示ADAM33基因多態性與中國人哮喘發病風險具有相關性，但是目前結論尚不統一。
本次Meta分析共納入了8個病例-對照研究，包括1 651例支氣管哮喘患者和1 639例對照。Meta分析結果顯示ADAM33基因T2多態性與與中國漢族人群支氣管哮喘易感性降低有關，突變等位基因A和基因型AA可能是其發病風險降低的因素。按年齡進行的亞組分析結果顯示該多態性等位基因A與成人哮喘發病風險降低相關，而AA+AG基因型與兒童哮喘發病風險相關，進一步證實了該多態性與中國人哮喘發病風險降低相關性沒有年齡差異。此外，我們還發現S2多態性與哮喘發病風險相關，由于其僅納入4個成人哮喘研究和1個兒童哮喘研究，我們僅對成人哮喘研究進行了進一步合并分析，結果顯示該多態性與中國人成人哮喘發病風險增加具有相關性。由于未納入更多的兒童研究，因此將來的研究應該進一步討論該多態性是否也與中國兒童哮喘發病風險相關。在對V4進行的Meta分析中，結果顯示，該多態性與中國人哮喘發病風險不相關，按年齡進行的亞組分析也未發現具有統計學意義的結果，提示該多態性可能與我國哮喘發病風險不相關。
本研究的局限性：① 納入研究數量較少，且部分研究質量不高，可能會影響本Meta分析結果的可靠性；② 因納入研究未報道如臨床分期、性別等因素，因此我們未能對ADAM33基因多態性聯合這些因素對中國漢族人群支氣管哮喘易感性的影響進行分析。
終上所述，當前證據顯示ADAM33 T2（A/G）多態性和S2多態性與中國人哮喘發病風險相關，但V4多態性與中國人哮喘不相關。受納入研究的數量和質量的限制，本研究結論尚需進一步開展更多高質量的研究進行驗證。
