引用本文： 王宇娟, 張晶, 霍俊玲, 呂娟, 王贊宏. Beclin1蛋白表達與宮頸癌風險相關性的Meta分析. 中國循證醫學雜志, 2014, 14(7): 798-805. doi: 10.7507/1672-2531.20140134 復制
宮頸癌是女性生殖系統最常見的惡性腫瘤之一，全球每年約有50萬新發宮頸癌患者，占女性全部腫瘤的15%，其死亡率居女性腫瘤死亡率第2位，且其發病呈年輕化趨勢[1]。已有研究結果顯示，自噬調控的異常與腫瘤發生有直接關系[2]，而自噬基因Beclin 1通過調節自噬活性而對腫瘤的發生發展起重要作用。
細胞自噬對腫瘤發生發展具有促進與抑制雙重作用。在宮頸癌、卵巢癌及子宮內膜癌等常見婦科惡性腫瘤組織中，均存在細胞自噬活性降低的現象。而Beclin1是一種自噬基因，在自噬活性缺失的婦科惡性腫瘤形成中起關鍵作用，可提高腫瘤細胞的自噬與凋亡能力并抑制腫瘤的惡性增殖[3]。已有研究認為，Beclin1在宮頸癌組織中表達減少，其還與盆腔淋巴轉移及腫瘤組織學分級密切相關[4]。Beclin1作為一種腫瘤抑制基因在不同種族的多種腫瘤中表現為單個等位基因的低水平表達甚至缺失。Beclin1是劑量依賴型的，有研究發現Beclin1+/-突變的小鼠腫瘤罹患率升高且自噬能力降低，這些結果提示自噬對細胞的轉化起著阻礙作用，對抑制人類腫瘤起至關重要的作用[5, 6]。目前關于Beclin1的表達與宮頸癌及其不同臨床病理特征之間的關系僅限于小樣本的醫院散發病例，且結論不盡相同。有研究認為在宮頸癌中Beclin1蛋白的表達與宮頸癌的分化程度、淋巴結轉移有密切關系[7-10]；也有研究認為，Beclin1的表達與宮頸癌的淋巴結轉移無關[11]；還有研究認為，Beclin1的表達與宮頸癌浸潤深度有關[8]。同時宮頸癌不同臨床分期、組織學分級中Beclin1的表達水平亦不同。為此，本研究采用Meta分析方法對國內外相關研究結果進行評價，以期明確Beclin1在宮頸癌發生中的作用。
1 資料與方法
1.1 納入與排除標準
1.1.1 研究類型
國內外公開發表評價beclin1蛋白表達與宮頸癌及其臨床病理特征相關性的病例-對照研究。文種限中、英文。
1.1.2 研究對象
所有病例均有完整的臨床病理資料，取材前均未經放療、化療或免疫治療，全部病例診斷均經病理結果證實；所有納入人群均不受國籍、種族、年齡限制；各文獻所研究的問題以及研究方法相似；Beclin1的檢測方法為鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結法（SP法），評定標準采用半定量記分法。
1.1.3 暴露因素
Beclin1為暴露因素。
1.1.4 結局指標
采用免疫組化SP法檢測子宮頸癌、子宮頸上皮內瘤樣病變和正常宮頸組織中自噬基因Beclin1的蛋白表達。
1.1.5 排除標準
①未提供病例及正常對照來源；②病例診斷標準不明確；③ Beclin1的檢測方法為非SP法，或陽性判斷界值不一致；④重復報告、質量較差等無法利用的文獻，且對于重復發表或資料雷同的研究僅納入方法學質量較好者。
1.2 檢索策略
計算機檢索The Cochrane Library（2014年第1期）、PubMed、EMbase、Ovid、CNKI、VIP、CBM及WanFang Data，收集國內外公開發表的所有關于Beclin1表達與宮頸癌及其臨床病理特征關系的病例-對照研究，檢索時限均為從建庫至2014年2月。
采用主題詞和關鍵詞檢索。中文檢索詞包括Beclin1、蛋白表達、宮頸癌；英文檢索詞包括uterine cervical neoplasms、cervical cancer、BECN1 protein、human、Beclin1。以PubMed為例，其具體檢索策略見框1。
框?1?PubMed檢索策略
#1?uterine cervical neoplasms[Mesh] #2?cervical neoplasm, uterine #3?cervical neoplasms, uterine #4?neoplasm, uterine cervical #5?neoplasms, uterine cervical #6?uterine cervical neoplasm #7?neoplasms, cervical #8?cervical neoplasms #9?cervical neoplasm #10?neoplasm, cervical #11?neoplasms, cervix #12?cervix neoplasms #13?cervix neoplasm #14?neoplasm, cervix #15?cancer of the uterine cervix #16?cancer of the cervix #17?cervical cancer #18?uterine cervical cancer #19?cancer, uterine cervical #20?cancers, uterine cervical#21 cervical cancer, uterine #22?cervical cancers, uterine #23?uterine cervical cancers #24?cancer of cervix #25?cervix cancer #26?cancer, cervix #27?cancers, cervix #28?OR/1-27 #29?BECN1 protein, human [Mesh]] #30?beclin1 protein, human #31?beclin1 #32?OR/29-31 #33 #28 AND #32
1.3 文獻篩選、資料提取與納入研究的方法學質量評價
由2位評價員按照納入與排除標準獨立篩選文獻、提取資料和評價納入研究的方法學質量。如遇分歧則討論解決或交由第三方協助裁定。采用自制的數據提取表提取資料，提取內容主要包括：文題、作者、發表年限、原始文獻出處、樣本量、子宮頸癌和淋巴結轉移、臨床分期、組織學分級等。采用NOS [12, 13]量表對納入研究的方法學質量進行評估，具體包括研究對象選擇（4個條目，4分）、組間可比性（1個條目，2分）和結果測量（3個條目，3分）3個維度，共9分。如遇分歧則討論解決，必要時根據第三方意見進行商議，最后達成一致性意見。
1.4 統計分析
采用RevMan 5.2軟件進行Meta分析，以OR及其95%CI為效應量。首先采用χ2檢驗對納入研究進行異質性檢驗，檢驗水準為α=0.1，即P≤0.1時，各研究結果間存在異質性。采用I2對異質性進行定量分析，I2≥25%存在低度異質性，I2≥50%存在中度異質性，I2≥75%存在高度異質性。當P < 0.1，I2>50%時認為各研究結果間存在明顯異質性，在解釋異質性的原因后，采用隨機效應模型進行Meta分析，如異質性過大，則僅行描述性分析；若P>0.1，I2 < 50%認為各研究結果間無明顯異質性，采用固定效應模型進行Meta分析。
2 結果
2.1 文獻檢索結果
初檢出相關文獻57篇，經逐層篩選后，最終納入5個病例-對照研究[7-11]，包括宮頸癌組388例，宮頸上皮內瘤樣病變（CIN）組130例，正常宮頸組織組119例。其中4個研究[7-9, 11]為中文，1個研究[10]為英文。文獻篩選流程及結果見圖 1。
圖1
文獻篩選流程及結果
2.2 納入研究的基本特征與質量評價
表1
納入研究的基本特征
表2
納入研究的方法學質量評價
2.2 Meta分析結果
2.2.1 宮頸癌組vs.正常宮頸組
共5個研究[7-11]報告了宮頸癌組與正常宮頸組的Beclin1表達情況，其中宮頸癌組338例、正常宮頸組119例。各研究結果間有中度異質性（P=0.007，I2=72%），該異質性可能源于各研究的研究對象存在潛在的選擇性偏倚且對照組有無疾病史等無具體描述。隨機效應模型Meta分析果顯示，宮頸癌組的Beclin1表達低于正常宮頸組，其差異有統計學意義［OR=0.07，95%CI（0.02，0.25），P < 0.000 1］（圖 2）。
圖2
宮頸癌組與正常宮頸組Beclin1蛋白表達比較的Meta分析
2.2.2 宮頸癌組vs.宮頸上皮內瘤變組
共4個研究[7, 8, 10, 11]報告了宮頸癌組與宮頸上皮內瘤變組的Beclin1表達情況，其中宮頸癌組338例、宮頸上皮內瘤變組130例。各研究結果間無統計學異質性（P=0.85，I2=0%）。固定效應模型Meta分析結果顯示，宮頸癌組的Beclin1表達低于宮頸上皮內瘤變組，其差異有統計學意義［OR=0.37，95%CI（0.23，0.59），P < 0.000 1］（圖 3）。
圖3
宮頸癌組與宮頸上皮內瘤變組Beclin1蛋白表達比較的Meta分析
2.2.3 宮頸上皮內瘤變組vs.正常宮頸組織組
共4個研究[7, 8, 10, 11]報告了宮頸上皮內瘤變組與正常宮頸組織組的Beclin1表達情況，其中宮頸上皮內瘤變組130例、正常組宮頸組93例。各研究結果間有中度異質性（P=0.03，I2=71%），該異質性可能源于不同研究對象間特征的潛在性系統差異。隨機效應模型Meta分析結果顯示，宮頸上皮內瘤變組的Beclin1表達低于正常宮頸組織組，其差異有統計學意義［OR=0.23，95%CI（0.06，0.88），P=0.03］（圖 4）。
圖4
宮頸上皮內瘤變組與正常宮頸組織組Beclin1蛋白表達比較的Meta分析
2.2.4 伴淋巴結轉移組vs.不伴淋巴結轉移組
共5個研究[7-11]報告了伴淋巴結轉移組與無淋巴結轉移組的Beclin1表達情況，其中伴淋巴結轉移組98例，無淋巴結轉移組290例。各研究結果間無統計學異質性（P=0.85，I2=0%）。固定效應模型Meta分析結果顯示，伴淋巴結轉移組的Beclin1表達低于無淋巴結轉移組，其差異有統計學意義［OR=0.29，95%CI（0.17，0.49），P < 0.000 01］（圖 5）。
圖5
宮頸癌伴淋巴結轉移組與不伴淋巴結轉移組Beclin1蛋白表達比較的Meta分析
2.2.5 中低分化組vs.高分化組
共5個研究[7-11]報告了中低分化組與高分化組的Beclin1表達情況，其中中低分化組228例，高分化組160例。各研究結果間有高度異質性（P=0.000 3，I2=81%），其異質性可能源于暴露因素受到影響及潛在的混雜因素影響。隨機效應模型Meta分析結果顯示，中低分化組的Beclin1表達與高分化組比較，其差異無統計學意義［OR=0.50，95%CI（0.16，1.56），P=0.23］（圖 6）。
圖6
宮頸癌中低分化組與高分化組Beclin1蛋白表達比較的Meta分析
2.2.6 腫瘤直徑≥4 cm組vs.直徑 < 4 cm組
共4個研究[7-10]報告了腫瘤直徑 < 4 cm組與腫瘤直徑≥4 cm組的Beclin1表達情況，其中腫瘤直徑≥4 cm組107例，直徑 < 4 cm組231例。各研究結果間有無統計學異質性（P=0.76，I2=0%）。固定效應模型Meta分析結果顯示，兩組Beclin1表達比較無明顯差異［OR=0.72，95%CI（0.44，1.18），P=0.20］（圖 7）。
圖7
宮頸癌腫瘤直徑≥4 cm組與 < 4 cm組Beclin1蛋白表達比較的Meta分析
2.2.7 肌層浸潤深度≥1/2組vs.肌層浸潤深度 < 1/2組
共4個研究[7-10]報告了肌層浸潤深度 < 1/2組與肌層浸潤深度≥1/2組的Beclin1表達情況，其中肌層浸潤深度≥1/2組149例，肌層浸潤深度 < 1/2組189例。各研究結果間無異質性（P=0.18，I2=39%）。固定效應模型Meta分析結果顯示，兩組Beclin1表達比較無明顯差異［OR=0.76，95%CI（0.49，1.20），P=0.25］（圖 8）。
圖8
宮頸癌肌層浸潤深度≥1/2組與 < 1/2組Beclin1蛋白表達比較的Meta分析
2.2.8 FIGO臨床分期Ⅱ期組vs. Ⅰ期組
共5個研究[7-11]報告了Ⅰ期組與Ⅱ期組的Beclin1表達情況，其中Ⅱ期組136例，Ⅰ期組252例。各研究結果間有中度異質性（P=0.10，I2=49%）。固定效應模型Meta分析結果顯示，兩組Beclin1表達比較無明顯差異［OR=0.70，95%CI（0.44，1.10），P=0.12］（圖 9）。
圖9
宮頸癌FIGO臨床分期Ⅱ期組與Ⅰ期組Beclin1蛋白表達比較的Meta分析
3 討論
1962年Ashford [14]就在電鏡下發現細胞中自噬現象的存在。細胞自噬性死亡與凋亡不同，是一種選擇性的非胱氨酞天冬氨酸特異性蛋白酶（caspase）依賴的程序性細胞死亡，是體內多余的蛋白質和亞細胞成分在溶酶體內降解的復雜催化過程[15]。Ⅲ型PI3K是自噬空泡形成和空泡傳送到溶酶體所必須的。Beclin1主要通過Ⅲ型PI3K形成復合體來調節其他的Apg蛋白定位到自噬前體結構中，從而調節自噬活性[16]。
Beclinl基因也稱BECN1基因。1998年Liang等[17]在致死性Sinbis病毒性腦炎的大鼠中發現一種分子量為60 kU的蛋白質，與bcl-2基因產物相互作用能抑制Sinbis病毒復制，減少中樞神經系統凋亡，并可能在宿主的抗病毒防御上起作用，他們將編碼這種蛋白質的基因命名為Beclinl。人們是在對Beclin1基因進行研究時才第一次將自噬與腫瘤聯系起來。Beclin1是酵母自噬相關基因Apg6的哺乳細胞同源基因，其與Apg6有24.4%的氨基酸相同，而比較鼠和人的Beclin1基因發現二者核苷酸水平具有93%的一致性，這些均提示Beclin1是一個具有高度進化保守性的基因[18]。1999年Aita等[19]發現編碼該蛋白的基因Beclin l位于人染色體17q21，并成功克隆了Beclinl基因，該基因與酵母的自噬基因atg6/vps30有高度同源性，也是哺乳動物參與自噬的特異性基因。Beclinl也是自噬的特異性標記物。研究自噬相關蛋白在宮頸癌中的表達及預后的關系可為自噬轉導信號通路的靶向治療提供更多客觀依據[20]。盡管國內外對Beclinl在宮頸癌中表達的研究少見，但有研究發現腦腫瘤[21]、肺癌[22]、卵巢癌[23]、乳腺癌[24]、子宮內膜樣腺癌[25]中出現Beclin1蛋白表達的下降。因此，目前Beclin1作為一種抑癌基因已基本被共識。
本Meta分析結果顯示：宮頸癌組中Beclin1表達明顯低于正常宮頸組織，提示Beclin1表達水平降低會增加罹患宮頸癌的風險。在宮頸癌不同臨床病理特征中，關于Beclin1蛋白表達情況的報道亦存在分歧。同時，伴有淋巴結轉移者的Beclin1表達降低，提示Beclin1蛋白表達降低對宮頸癌淋巴結轉移有促進作用，這與王贊宏等[7]、吳瑞花等[8]的研究結果一致。此外，由于本研究納入研究較少且報告Beclin1的表達在宮頸癌的分化程度、FIGO臨床分期、腫瘤直徑及肌層浸潤深度組間比較的研究結果間存在高度異質性，Beclin1表達差異無統計學意義，這與潘小虹等[9]的研究結果一致。
本研究的局限性：缺乏灰色文獻（如專題討論會記錄、未發表的資料、政府研究報告和其他非傳統文獻來源的證據），可能漏掉陰性結果的研究而導致發表偏倚；納入病例-對照研究質量中等，均未對其存在的偏倚進行描述及討論。
綜上所述，當前證據表明Beclin1蛋白的表達與宮頸癌及其不同臨床病理特征存在顯著相關性，提示Beclin1在宮頸癌的發生、發展過程中可能發揮重要作用。因此，本系統評價可能更加準確地豐富宮頸癌發病機制的研究，為宮頸癌的篩查提供新途徑，以及為宮頸癌的基因治療提供新靶點。但受納入研究數量和質量限制，目前尚不能將其作為判定宮頸癌預后的獨立因素。上述結論有待開展更多大樣本，設計嚴謹的高質量研究加以驗證。
宮頸癌是女性生殖系統最常見的惡性腫瘤之一，全球每年約有50萬新發宮頸癌患者，占女性全部腫瘤的15%，其死亡率居女性腫瘤死亡率第2位，且其發病呈年輕化趨勢[1]。已有研究結果顯示，自噬調控的異常與腫瘤發生有直接關系[2]，而自噬基因Beclin 1通過調節自噬活性而對腫瘤的發生發展起重要作用。
細胞自噬對腫瘤發生發展具有促進與抑制雙重作用。在宮頸癌、卵巢癌及子宮內膜癌等常見婦科惡性腫瘤組織中，均存在細胞自噬活性降低的現象。而Beclin1是一種自噬基因，在自噬活性缺失的婦科惡性腫瘤形成中起關鍵作用，可提高腫瘤細胞的自噬與凋亡能力并抑制腫瘤的惡性增殖[3]。已有研究認為，Beclin1在宮頸癌組織中表達減少，其還與盆腔淋巴轉移及腫瘤組織學分級密切相關[4]。Beclin1作為一種腫瘤抑制基因在不同種族的多種腫瘤中表現為單個等位基因的低水平表達甚至缺失。Beclin1是劑量依賴型的，有研究發現Beclin1+/-突變的小鼠腫瘤罹患率升高且自噬能力降低，這些結果提示自噬對細胞的轉化起著阻礙作用，對抑制人類腫瘤起至關重要的作用[5, 6]。目前關于Beclin1的表達與宮頸癌及其不同臨床病理特征之間的關系僅限于小樣本的醫院散發病例，且結論不盡相同。有研究認為在宮頸癌中Beclin1蛋白的表達與宮頸癌的分化程度、淋巴結轉移有密切關系[7-10]；也有研究認為，Beclin1的表達與宮頸癌的淋巴結轉移無關[11]；還有研究認為，Beclin1的表達與宮頸癌浸潤深度有關[8]。同時宮頸癌不同臨床分期、組織學分級中Beclin1的表達水平亦不同。為此，本研究采用Meta分析方法對國內外相關研究結果進行評價，以期明確Beclin1在宮頸癌發生中的作用。
1 資料與方法
1.1 納入與排除標準
1.1.1 研究類型
國內外公開發表評價beclin1蛋白表達與宮頸癌及其臨床病理特征相關性的病例-對照研究。文種限中、英文。
1.1.2 研究對象
所有病例均有完整的臨床病理資料，取材前均未經放療、化療或免疫治療，全部病例診斷均經病理結果證實；所有納入人群均不受國籍、種族、年齡限制；各文獻所研究的問題以及研究方法相似；Beclin1的檢測方法為鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結法（SP法），評定標準采用半定量記分法。
1.1.3 暴露因素
Beclin1為暴露因素。
1.1.4 結局指標
采用免疫組化SP法檢測子宮頸癌、子宮頸上皮內瘤樣病變和正常宮頸組織中自噬基因Beclin1的蛋白表達。
1.1.5 排除標準
①未提供病例及正常對照來源；②病例診斷標準不明確；③ Beclin1的檢測方法為非SP法，或陽性判斷界值不一致；④重復報告、質量較差等無法利用的文獻，且對于重復發表或資料雷同的研究僅納入方法學質量較好者。
1.2 檢索策略
計算機檢索The Cochrane Library（2014年第1期）、PubMed、EMbase、Ovid、CNKI、VIP、CBM及WanFang Data，收集國內外公開發表的所有關于Beclin1表達與宮頸癌及其臨床病理特征關系的病例-對照研究，檢索時限均為從建庫至2014年2月。
采用主題詞和關鍵詞檢索。中文檢索詞包括Beclin1、蛋白表達、宮頸癌；英文檢索詞包括uterine cervical neoplasms、cervical cancer、BECN1 protein、human、Beclin1。以PubMed為例，其具體檢索策略見框1。
框?1?PubMed檢索策略
#1?uterine cervical neoplasms[Mesh] #2?cervical neoplasm, uterine #3?cervical neoplasms, uterine #4?neoplasm, uterine cervical #5?neoplasms, uterine cervical #6?uterine cervical neoplasm #7?neoplasms, cervical #8?cervical neoplasms #9?cervical neoplasm #10?neoplasm, cervical #11?neoplasms, cervix #12?cervix neoplasms #13?cervix neoplasm #14?neoplasm, cervix #15?cancer of the uterine cervix #16?cancer of the cervix #17?cervical cancer #18?uterine cervical cancer #19?cancer, uterine cervical #20?cancers, uterine cervical#21 cervical cancer, uterine #22?cervical cancers, uterine #23?uterine cervical cancers #24?cancer of cervix #25?cervix cancer #26?cancer, cervix #27?cancers, cervix #28?OR/1-27 #29?BECN1 protein, human [Mesh]] #30?beclin1 protein, human #31?beclin1 #32?OR/29-31 #33 #28 AND #32
1.3 文獻篩選、資料提取與納入研究的方法學質量評價
由2位評價員按照納入與排除標準獨立篩選文獻、提取資料和評價納入研究的方法學質量。如遇分歧則討論解決或交由第三方協助裁定。采用自制的數據提取表提取資料，提取內容主要包括：文題、作者、發表年限、原始文獻出處、樣本量、子宮頸癌和淋巴結轉移、臨床分期、組織學分級等。采用NOS [12, 13]量表對納入研究的方法學質量進行評估，具體包括研究對象選擇（4個條目，4分）、組間可比性（1個條目，2分）和結果測量（3個條目，3分）3個維度，共9分。如遇分歧則討論解決，必要時根據第三方意見進行商議，最后達成一致性意見。
1.4 統計分析
采用RevMan 5.2軟件進行Meta分析，以OR及其95%CI為效應量。首先采用χ2檢驗對納入研究進行異質性檢驗，檢驗水準為α=0.1，即P≤0.1時，各研究結果間存在異質性。采用I2對異質性進行定量分析，I2≥25%存在低度異質性，I2≥50%存在中度異質性，I2≥75%存在高度異質性。當P < 0.1，I2>50%時認為各研究結果間存在明顯異質性，在解釋異質性的原因后，采用隨機效應模型進行Meta分析，如異質性過大，則僅行描述性分析；若P>0.1，I2 < 50%認為各研究結果間無明顯異質性，采用固定效應模型進行Meta分析。
2 結果
2.1 文獻檢索結果
初檢出相關文獻57篇，經逐層篩選后，最終納入5個病例-對照研究[7-11]，包括宮頸癌組388例，宮頸上皮內瘤樣病變（CIN）組130例，正常宮頸組織組119例。其中4個研究[7-9, 11]為中文，1個研究[10]為英文。文獻篩選流程及結果見圖 1。
圖1
文獻篩選流程及結果
2.2 納入研究的基本特征與質量評價
表1
納入研究的基本特征
表2
納入研究的方法學質量評價
2.2 Meta分析結果
2.2.1 宮頸癌組vs.正常宮頸組
共5個研究[7-11]報告了宮頸癌組與正常宮頸組的Beclin1表達情況，其中宮頸癌組338例、正常宮頸組119例。各研究結果間有中度異質性（P=0.007，I2=72%），該異質性可能源于各研究的研究對象存在潛在的選擇性偏倚且對照組有無疾病史等無具體描述。隨機效應模型Meta分析果顯示，宮頸癌組的Beclin1表達低于正常宮頸組，其差異有統計學意義［OR=0.07，95%CI（0.02，0.25），P < 0.000 1］（圖 2）。
圖2
宮頸癌組與正常宮頸組Beclin1蛋白表達比較的Meta分析
2.2.2 宮頸癌組vs.宮頸上皮內瘤變組
共4個研究[7, 8, 10, 11]報告了宮頸癌組與宮頸上皮內瘤變組的Beclin1表達情況，其中宮頸癌組338例、宮頸上皮內瘤變組130例。各研究結果間無統計學異質性（P=0.85，I2=0%）。固定效應模型Meta分析結果顯示，宮頸癌組的Beclin1表達低于宮頸上皮內瘤變組，其差異有統計學意義［OR=0.37，95%CI（0.23，0.59），P < 0.000 1］（圖 3）。
圖3
宮頸癌組與宮頸上皮內瘤變組Beclin1蛋白表達比較的Meta分析
2.2.3 宮頸上皮內瘤變組vs.正常宮頸組織組
共4個研究[7, 8, 10, 11]報告了宮頸上皮內瘤變組與正常宮頸組織組的Beclin1表達情況，其中宮頸上皮內瘤變組130例、正常組宮頸組93例。各研究結果間有中度異質性（P=0.03，I2=71%），該異質性可能源于不同研究對象間特征的潛在性系統差異。隨機效應模型Meta分析結果顯示，宮頸上皮內瘤變組的Beclin1表達低于正常宮頸組織組，其差異有統計學意義［OR=0.23，95%CI（0.06，0.88），P=0.03］（圖 4）。
圖4
宮頸上皮內瘤變組與正常宮頸組織組Beclin1蛋白表達比較的Meta分析
2.2.4 伴淋巴結轉移組vs.不伴淋巴結轉移組
共5個研究[7-11]報告了伴淋巴結轉移組與無淋巴結轉移組的Beclin1表達情況，其中伴淋巴結轉移組98例，無淋巴結轉移組290例。各研究結果間無統計學異質性（P=0.85，I2=0%）。固定效應模型Meta分析結果顯示，伴淋巴結轉移組的Beclin1表達低于無淋巴結轉移組，其差異有統計學意義［OR=0.29，95%CI（0.17，0.49），P < 0.000 01］（圖 5）。
圖5
宮頸癌伴淋巴結轉移組與不伴淋巴結轉移組Beclin1蛋白表達比較的Meta分析
2.2.5 中低分化組vs.高分化組
共5個研究[7-11]報告了中低分化組與高分化組的Beclin1表達情況，其中中低分化組228例，高分化組160例。各研究結果間有高度異質性（P=0.000 3，I2=81%），其異質性可能源于暴露因素受到影響及潛在的混雜因素影響。隨機效應模型Meta分析結果顯示，中低分化組的Beclin1表達與高分化組比較，其差異無統計學意義［OR=0.50，95%CI（0.16，1.56），P=0.23］（圖 6）。
圖6
宮頸癌中低分化組與高分化組Beclin1蛋白表達比較的Meta分析
2.2.6 腫瘤直徑≥4 cm組vs.直徑 < 4 cm組
共4個研究[7-10]報告了腫瘤直徑 < 4 cm組與腫瘤直徑≥4 cm組的Beclin1表達情況，其中腫瘤直徑≥4 cm組107例，直徑 < 4 cm組231例。各研究結果間有無統計學異質性（P=0.76，I2=0%）。固定效應模型Meta分析結果顯示，兩組Beclin1表達比較無明顯差異［OR=0.72，95%CI（0.44，1.18），P=0.20］（圖 7）。
圖7
宮頸癌腫瘤直徑≥4 cm組與 < 4 cm組Beclin1蛋白表達比較的Meta分析
2.2.7 肌層浸潤深度≥1/2組vs.肌層浸潤深度 < 1/2組
共4個研究[7-10]報告了肌層浸潤深度 < 1/2組與肌層浸潤深度≥1/2組的Beclin1表達情況，其中肌層浸潤深度≥1/2組149例，肌層浸潤深度 < 1/2組189例。各研究結果間無異質性（P=0.18，I2=39%）。固定效應模型Meta分析結果顯示，兩組Beclin1表達比較無明顯差異［OR=0.76，95%CI（0.49，1.20），P=0.25］（圖 8）。
圖8
宮頸癌肌層浸潤深度≥1/2組與 < 1/2組Beclin1蛋白表達比較的Meta分析
2.2.8 FIGO臨床分期Ⅱ期組vs. Ⅰ期組
共5個研究[7-11]報告了Ⅰ期組與Ⅱ期組的Beclin1表達情況，其中Ⅱ期組136例，Ⅰ期組252例。各研究結果間有中度異質性（P=0.10，I2=49%）。固定效應模型Meta分析結果顯示，兩組Beclin1表達比較無明顯差異［OR=0.70，95%CI（0.44，1.10），P=0.12］（圖 9）。
圖9
宮頸癌FIGO臨床分期Ⅱ期組與Ⅰ期組Beclin1蛋白表達比較的Meta分析
3 討論
1962年Ashford [14]就在電鏡下發現細胞中自噬現象的存在。細胞自噬性死亡與凋亡不同，是一種選擇性的非胱氨酞天冬氨酸特異性蛋白酶（caspase）依賴的程序性細胞死亡，是體內多余的蛋白質和亞細胞成分在溶酶體內降解的復雜催化過程[15]。Ⅲ型PI3K是自噬空泡形成和空泡傳送到溶酶體所必須的。Beclin1主要通過Ⅲ型PI3K形成復合體來調節其他的Apg蛋白定位到自噬前體結構中，從而調節自噬活性[16]。
Beclinl基因也稱BECN1基因。1998年Liang等[17]在致死性Sinbis病毒性腦炎的大鼠中發現一種分子量為60 kU的蛋白質，與bcl-2基因產物相互作用能抑制Sinbis病毒復制，減少中樞神經系統凋亡，并可能在宿主的抗病毒防御上起作用，他們將編碼這種蛋白質的基因命名為Beclinl。人們是在對Beclin1基因進行研究時才第一次將自噬與腫瘤聯系起來。Beclin1是酵母自噬相關基因Apg6的哺乳細胞同源基因，其與Apg6有24.4%的氨基酸相同，而比較鼠和人的Beclin1基因發現二者核苷酸水平具有93%的一致性，這些均提示Beclin1是一個具有高度進化保守性的基因[18]。1999年Aita等[19]發現編碼該蛋白的基因Beclin l位于人染色體17q21，并成功克隆了Beclinl基因，該基因與酵母的自噬基因atg6/vps30有高度同源性，也是哺乳動物參與自噬的特異性基因。Beclinl也是自噬的特異性標記物。研究自噬相關蛋白在宮頸癌中的表達及預后的關系可為自噬轉導信號通路的靶向治療提供更多客觀依據[20]。盡管國內外對Beclinl在宮頸癌中表達的研究少見，但有研究發現腦腫瘤[21]、肺癌[22]、卵巢癌[23]、乳腺癌[24]、子宮內膜樣腺癌[25]中出現Beclin1蛋白表達的下降。因此，目前Beclin1作為一種抑癌基因已基本被共識。
本Meta分析結果顯示：宮頸癌組中Beclin1表達明顯低于正常宮頸組織，提示Beclin1表達水平降低會增加罹患宮頸癌的風險。在宮頸癌不同臨床病理特征中，關于Beclin1蛋白表達情況的報道亦存在分歧。同時，伴有淋巴結轉移者的Beclin1表達降低，提示Beclin1蛋白表達降低對宮頸癌淋巴結轉移有促進作用，這與王贊宏等[7]、吳瑞花等[8]的研究結果一致。此外，由于本研究納入研究較少且報告Beclin1的表達在宮頸癌的分化程度、FIGO臨床分期、腫瘤直徑及肌層浸潤深度組間比較的研究結果間存在高度異質性，Beclin1表達差異無統計學意義，這與潘小虹等[9]的研究結果一致。
本研究的局限性：缺乏灰色文獻（如專題討論會記錄、未發表的資料、政府研究報告和其他非傳統文獻來源的證據），可能漏掉陰性結果的研究而導致發表偏倚；納入病例-對照研究質量中等，均未對其存在的偏倚進行描述及討論。
綜上所述，當前證據表明Beclin1蛋白的表達與宮頸癌及其不同臨床病理特征存在顯著相關性，提示Beclin1在宮頸癌的發生、發展過程中可能發揮重要作用。因此，本系統評價可能更加準確地豐富宮頸癌發病機制的研究，為宮頸癌的篩查提供新途徑，以及為宮頸癌的基因治療提供新靶點。但受納入研究數量和質量限制，目前尚不能將其作為判定宮頸癌預后的獨立因素。上述結論有待開展更多大樣本，設計嚴謹的高質量研究加以驗證。
