引用本文： 周亞清, 濮尊國, 劉愛明, 丁宏勝. 急性呼吸窘迫綜合征患者呼出氣冷凝液中白細胞介素-8、克拉拉細胞蛋白16、細胞間黏附分子-1檢測的臨床意義. 中國呼吸與危重監護雜志, 2021, 20(12): 857-861. doi: 10.7507/1671-6205.202011074 復制
急性呼吸窘迫綜合征（ARDS）是指由各種肺內外致病因素所致的、以彌漫性肺泡–毛細血管膜損傷為病理特征的急性呼吸衰竭，臨床表現為頑固性低氧血癥和呼吸窘迫。ARDS發病急，進展快，具有較高的發病率和病死率[1]，國外報道ARDS病死率達38.5%[2]，國內報道ARDS病死率為21.3%[3]，甚至有研究提示曾高達68.5%[4]。多個研究表明從病理生理學角度可以更好地理解多種ARDS相關生物標志物的作用機制，其中包括內皮損傷、促炎損傷、凝血、纖維化、上皮損傷[5]及細胞凋亡等細胞損傷途徑[6]。研究表明一種或多種生物標志物在預測、評估ARDS人群患病風險、臨床治療效果、臨床結局中起到關鍵作用[7]。呼出氣冷凝液（EBC）是一種不干擾呼吸道本身生理或病理過程的檢測呼吸道生化成分的研究技術[8]，具有無創、簡單、易操作、可重復檢測等優點，適用范圍廣[9]。目前研究較多的是EBC炎癥標志物，如NO、CO、8-異前列腺素、白三烯等[10-11]，但EBC中ARDS相關生物標志物研究較少。本研究從炎癥反應、內皮損傷、上皮損傷三個角度，對應選取三個代表性的分子標志物白細胞介素-8 （IL-8）、克拉拉細胞蛋白16 （CC16）、細胞間黏附分子-1 （ICAM-1）檢測，通過聯合監測血清、EBC中IL-8 、CC16 、ICAM-1濃度，研究這三種生物學標志物在ARDS預判嚴重程度以及評估預后等方面的作用，同時設想通過EBC這種無創檢測代替傳統有創檢查。
1 資料與方法
1.1 臨床資料及分組
研究組選擇2017年2月至2019年2月在我院重癥醫學科行機械通氣的ARDS患者45例，其中男27例，女18例，平均年齡（65.3±13.3）歲。對照組45例體檢中心體檢的健康人，其中，男24例，女21例，平均年齡（63.1±11.2）歲。兩組年齡、性別比較差異無統計學意義。ARDS患者根據柏林診斷標準分為輕度組、中度組和重度組。
納入標準：符合2012年柏林標準[12]的ARDS機械通氣患者。排除標準：① 影響肺臟的嚴重慢性相關疾病如支氣管哮喘、支氣管擴張、間質性肺病、慢性阻塞性肺疾病、肺心病等；② 慢性腎功能不全；③ 急性心肌缺血或嚴重心律失常；④ 肺動脈栓塞；⑤ 妊娠；⑥ 風濕病及長期使用糖皮質激素的患者。
本研究經南通大學附屬海安醫院倫理委員會批準（批準號：HKL201737），均簽署進入研究知情同意書。
1.2 方法
1.2.1 ARDS治療方法
根據中華醫學會重癥分會的急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征診斷和治療指南（2006）對ARDS患者進行原發疾病處理、液體管理等治療。均使用基礎重癥護理，采用保護性機械通氣策略及綜合對癥支持治療。
1.2.2 EBC采集
在患者診斷為ARDS的24 h內和第5天，生命體征相對平穩時進行收集。更換干燥 Y 型螺紋管直接連接呼吸機，不接入加溫濕化器，改裝EcoScreen冷凝器接入呼吸機螺紋管呼氣端，設置冷凝溫度–20 ℃，觀察患者呼吸平穩5 min后開始收集，持續40 min，收集6 mL冷凝液，分3管封裝，–70 ℃冰箱保存備檢。健康體檢者先漱口清潔口腔，戴鼻夾通過咬口器與EcoScreen冷凝器連接，平靜呼吸40 min后，可收集6 mL的EBC。
1.2.3 血清采集
EBC收集的同時采血5 mL，在室溫環境下，采用離心方式分離出血清。
1.2.4 IL-8 、CC16 、ICAM-1的測定
采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）法定量檢測，試劑盒均購自美國R&D公司（美國明尼亞波利斯）。
1.3 統計學方法
采用SPSS 19.0統計軟件。計量資料均經Shapiro-Wilk正態性檢驗，呈正態分布以均數±標準差（
±s）表示，數值變量資料的兩組均數的比較采用t檢驗或Mann-Whitney U檢驗，分類變量資料組間使用χ2檢驗，多個時點比較采用一般線性重復度量檢驗，兩個時間點用配對t檢驗，P<0.05表示差異具有統計學意義。
2 結果
2.1 ARDS組與健康對照組血清和EBC中IL-8 、CC16 、ICAM-1含量的比較
ARDS組與健康對照組第1天血清和EBC中IL-8 、CC16 、ICAM-1含量比較見表1，由表1可知，ARDS組血清和EBC中，IL-8 、CC16 、ICAM-1含量均顯著高于對照組（P<0.01）。
表1
ARDS組與健康對照組血清和EBC中IL-8 、CC16 、ICAM-1含量的比較（
）
2.2 不同嚴重程度的ARDS患者的血清和EBC中IL-8含量比較
ARDS患者血清及EBC中IL-8含量隨著ARDS嚴重程度的加重，有升高趨勢，但輕度、中度和重度組兩兩比較均無統計學意義（P>0.05），同時不論ARDS嚴重程度如何，患者入院第1天和第5天的血清和EBC中IL-8含量比較，差異無統計學意義（P>0.05），見表2。
表2
不同嚴重程度的ARDS患者在不同時間內血清和EBC中IL-8含量的比較［ng/L，（
）］
2.3 不同嚴重程度的ARDS患者的血清和EBC中CC16含量的比較
不同嚴重程度的ARDS患者的血清及EBC中CC16含量的比較結果見表3，ARDS患者第1天和第5天血清及EBC中CC16含量均隨著ARDS嚴重程度的加重而上升。與輕度和中度組相比，重度組患者第1天和第5天血清及EBC中CC16含量均顯著升高（P<0.05），但輕度組與中度組間比較，差異無統計學意義（P>0.05），同時不論ARDS嚴重程度如何，患者入院第1天和第5天的血清和EBC中CC16含量比較，差異均無統計學意義（均P>0.05），見表3。
表3
不同嚴重程度的ARDS患者在不同時間內血清和EBC中CC16水平的比較［ng/mL，（
）］
2.4 不同嚴重程度的ARDS患者的血清和EBC中ICAM-1含量的比較
不同嚴重程度的ARDS患者的血清及EBC中ICAM-1含量比較結果表4，ARDS患者入院第1天和第5天血清及EBC中ICAM-1含量隨著ARDS嚴重程度的加重而上升。患者入院第1天，與輕度組相比，重度組、中度組血清中ICAM-1含量顯著升高（P<0.05），入院第5天，各組血清ICAM-1含量兩兩比較，差異均沒有統計學意義（均P>0.05）。患者入院第1天，與輕度組相比，重度組、中度組EBC中ICAM-1含量均顯著升高（P<0.05），與中度組相比，重度組ICAM-1含量顯著升高（P<0.05）；而在患者入院第5天，重度組EBC中ICAM-1含量與輕度組、中度組比較均顯著升高（P<0.05）。
表4
不同嚴重程度的ARDS患者在不同時間內血清和EBC中ICAM-1水平的比較［ng/mL，（
）］
除輕度組EBC外，無論ARDS嚴重程度如何，患者入院第1天和第5天的血清和EBC中ICAM-1含量均顯著性升高（P<0.05或0.01），見表4。
2.5 ARDS存活組與死亡組患者的血清和EBC中ICAM-1含量的比較
按照ARDS患者預后情況分為存活者30例、死亡者15例。ARDS存活者與死亡患者在入院第1天時血清中ICAM-1含量比較差異無統計學意義（P>0.05），而死亡者EBC中ICAM-1含量高于存活者（P<0.05），在入院第5天時，ARDS死亡者血清和EBC中ICAM-1含量均顯著高于存活者（P<0.05或0.01），見表5。
表5
ARDS存活組與死亡組患者血清和EBC中ICAM-1含量的比較（ng/mL，
）
3 討論
ALI/ARDS發病的重要原因是巨噬細胞、中性粒細胞、血小板等炎癥細胞及其釋放的炎癥介質和細胞因子介導的炎癥反應，引起肺上皮細胞和微血管內皮細胞形態和功能改變，肺微血管通透性增高，血管內白蛋白滲漏到組織間隙，導致低氧血癥。因此，反映肺泡上皮、細胞損傷和肺泡壁通透性的生物標志物在ARDS病情嚴重程度和預后評估中有積極的作用[13]。近年來，多種生物標志物的檢出，能夠對ARDS的早期識別提供了有效依據，其中IL-8 [14]、CC16 、ICAM-1是較為廣泛認可的生物學標志物[15]。以往相關研究表明，ALI可致大鼠肺組織及血清IL-8含量明顯升高[16]；在其他影像學等指標確立ARDS診斷之前，血清及肺泡灌洗液中CC16含量已有改變，且結果較肺泡表面活性物質相關蛋白D、可溶性晚期糖基化終末產物受體、Ⅱ型肺泡細胞表面抗原等更有參考意義[17]；同時ARDS患者的ICAM-1在血漿及肺水腫液中均升高[7]。研究表明，ARDS患者相關生物學指標從第5天開始具有統計學差異，但是單獨指標檢測，對早期診斷ARDS及判斷預后缺乏高精準度，而組合檢測結果優于單獨測定[18]。近年來，研究者試圖為ARDS尋找聯合多項生物標志物指標，作為臨床早期診斷以及預測疾病預后，但目前仍未能實現這個目標。本研究觀察了3種生物學標志物在ARDS中的變化，以及預測其發生發展和臨床預后的價值。這些標志物涉及炎癥反應、內皮損傷、上皮損傷等多個方面。
IL-8為促炎細胞因子，主要由單核/巨噬細胞產生。在ARDS早期，IL-8在血漿中高表達，提示預后不良[18]；有研究表明，IL-8免疫復合物/抗IL-8自身抗體是ARDS治療的新靶點[7]。IL-8在揭示ARDS預后方面具有研究前景。CC16位于終末細支氣管，參與細胞再生、氣道毒物代謝，CC16是其特異性蛋白。ARDS 、創傷后合并肺炎以及呼吸機相關性肺炎患者均可在血清中發現CC16水平升高[17]，但目前仍需驗證CC16能否作為ARDS診斷及提示預后的生物標志物。ICAM-1是黏附分子中的免疫球蛋白超家族成員，同時是介導黏附反應的重要黏附分子。研究表明，ARDS患者血清中ICAM-1明顯高于壓力性肺水腫患者的水平，而且ARDS患者可溶性ICAM-1的升高與臨床不良預后呈相關性[6]。能否利用ICAM-1的水平反映ARDS患者的預后，需我們進一步證實。
本研究中主要以選取無創的方式檢測ARDS患者相關特異性指標，同時輔助以聯合檢測，以達到對ARDS早期有更精準的判斷。本研究發現，ARDS組血清和EBC中IL-8、CC16、ICAM-1均明顯高于對照組；與以往相關研究的結論一致，有趣的是不論ARDS嚴重程度如何，患者在第1天及第5天的血清及EBC中IL-8、CC16水平差異無統計學意義，但是各組ICAM-1（血清輕度組除外），入院第1天和第5天的血清和EBC中ICAM-1含量均有明顯統計學差異，這表明在ARDS病程早期，IL-8、CC16含量變化不大，但是ICAM-1含量或許能反映病程的時間軸，至于血清輕度組中ICAM-1含量無統計學差異，也許輕度ARDS患者ICAM-1 在EBC中的含量變化更能反映ARDS病程進展的趨勢，而血清中未能有明顯變化。另外，在輕中重的組間對比表明，除IL-8以外，CC16、ICAM-1均能反映肺損傷的程度，能夠為ARDS的分級提供強有力的依據，而相較于血清學內蛋白表達，EBC更能反映ARDS嚴重程度的不同。在28天存活組與死亡組的比較中，死亡組ICMA-1含量由入院第1天到第5天明顯上升，同時在第1天時EBC中即出現差異，或許預示著EBC比血清能更早地反映28天存活率與患者肺損傷之間的潛在關系，而ICMA-1的變化趨勢亦能反映患者的結局。
因此，以收集EBC的方法聯合檢出IL-8、CC16、ICAM-1在預判ARDS的嚴重程度以及評估預后具有重要意義。同時，相較于傳統有創檢測技術而言，EBC檢測技術使醫務人員能夠直接分析氣道的內襯液，且EBC檢測是以收集呼出氣體為基礎，不涉及任何可被感知的不適或危險，因此，EBC可以隨時并且多次重復的檢測，特別適用于機械通氣患者，為進一步研究危重病患者肺損傷提供了新的途徑，具有更大的優勢。
綜上所述，本研究從聯合炎癥反應、內皮損傷、上皮損傷的角度，在EBC中檢測IL-8、CC16、ICAM-1具有收集方法簡單、設備簡便易操作、可重復性好、不受地點及患者年齡和病情嚴重程度的限制，應用范圍廣泛。以無創的方式收集并檢測下呼吸道和肺實質的病變信號，為疾病評估肺損傷嚴重程度及區分ARDS類型提供客觀、量化依據。同時，通過對ARDS患者EBC中生物標志物（IL-8、CC16、ICAM-1）的聯合檢測，為研究ARDS的發病機制，了解疾病發展趨勢，評估病情危重程度和判斷預后提供客觀依據，具有重要的臨床意義，但仍需大樣本量論證，可見本研究仍不全面，且有局限；不僅如此，IL-8、CC16、ICAM-1的變化趨勢和ARDS患者病情、預后是否相互作用，共同影響病情進展尚未明確；本研究觀察時間尚且較短，也可能導致結局的偏倚，還應進一步加強觀察和研究，延長觀察時間，以充分闡明IL-8、CC16、ICAM-1 在ARDS患者的EBC中發揮的生物學作用。
利益沖突：本研究不涉及任何利益沖突。
急性呼吸窘迫綜合征（ARDS）是指由各種肺內外致病因素所致的、以彌漫性肺泡–毛細血管膜損傷為病理特征的急性呼吸衰竭，臨床表現為頑固性低氧血癥和呼吸窘迫。ARDS發病急，進展快，具有較高的發病率和病死率[1]，國外報道ARDS病死率達38.5%[2]，國內報道ARDS病死率為21.3%[3]，甚至有研究提示曾高達68.5%[4]。多個研究表明從病理生理學角度可以更好地理解多種ARDS相關生物標志物的作用機制，其中包括內皮損傷、促炎損傷、凝血、纖維化、上皮損傷[5]及細胞凋亡等細胞損傷途徑[6]。研究表明一種或多種生物標志物在預測、評估ARDS人群患病風險、臨床治療效果、臨床結局中起到關鍵作用[7]。呼出氣冷凝液（EBC）是一種不干擾呼吸道本身生理或病理過程的檢測呼吸道生化成分的研究技術[8]，具有無創、簡單、易操作、可重復檢測等優點，適用范圍廣[9]。目前研究較多的是EBC炎癥標志物，如NO、CO、8-異前列腺素、白三烯等[10-11]，但EBC中ARDS相關生物標志物研究較少。本研究從炎癥反應、內皮損傷、上皮損傷三個角度，對應選取三個代表性的分子標志物白細胞介素-8 （IL-8）、克拉拉細胞蛋白16 （CC16）、細胞間黏附分子-1 （ICAM-1）檢測，通過聯合監測血清、EBC中IL-8 、CC16 、ICAM-1濃度，研究這三種生物學標志物在ARDS預判嚴重程度以及評估預后等方面的作用，同時設想通過EBC這種無創檢測代替傳統有創檢查。
1 資料與方法
1.1 臨床資料及分組
研究組選擇2017年2月至2019年2月在我院重癥醫學科行機械通氣的ARDS患者45例，其中男27例，女18例，平均年齡（65.3±13.3）歲。對照組45例體檢中心體檢的健康人，其中，男24例，女21例，平均年齡（63.1±11.2）歲。兩組年齡、性別比較差異無統計學意義。ARDS患者根據柏林診斷標準分為輕度組、中度組和重度組。
納入標準：符合2012年柏林標準[12]的ARDS機械通氣患者。排除標準：① 影響肺臟的嚴重慢性相關疾病如支氣管哮喘、支氣管擴張、間質性肺病、慢性阻塞性肺疾病、肺心病等；② 慢性腎功能不全；③ 急性心肌缺血或嚴重心律失常；④ 肺動脈栓塞；⑤ 妊娠；⑥ 風濕病及長期使用糖皮質激素的患者。
本研究經南通大學附屬海安醫院倫理委員會批準（批準號：HKL201737），均簽署進入研究知情同意書。
1.2 方法
1.2.1 ARDS治療方法
根據中華醫學會重癥分會的急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征診斷和治療指南（2006）對ARDS患者進行原發疾病處理、液體管理等治療。均使用基礎重癥護理，采用保護性機械通氣策略及綜合對癥支持治療。
1.2.2 EBC采集
在患者診斷為ARDS的24 h內和第5天，生命體征相對平穩時進行收集。更換干燥 Y 型螺紋管直接連接呼吸機，不接入加溫濕化器，改裝EcoScreen冷凝器接入呼吸機螺紋管呼氣端，設置冷凝溫度–20 ℃，觀察患者呼吸平穩5 min后開始收集，持續40 min，收集6 mL冷凝液，分3管封裝，–70 ℃冰箱保存備檢。健康體檢者先漱口清潔口腔，戴鼻夾通過咬口器與EcoScreen冷凝器連接，平靜呼吸40 min后，可收集6 mL的EBC。
1.2.3 血清采集
EBC收集的同時采血5 mL，在室溫環境下，采用離心方式分離出血清。
1.2.4 IL-8 、CC16 、ICAM-1的測定
采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）法定量檢測，試劑盒均購自美國R&D公司（美國明尼亞波利斯）。
1.3 統計學方法
采用SPSS 19.0統計軟件。計量資料均經Shapiro-Wilk正態性檢驗，呈正態分布以均數±標準差（±s）表示，數值變量資料的兩組均數的比較采用t檢驗或Mann-Whitney U檢驗，分類變量資料組間使用χ2檢驗，多個時點比較采用一般線性重復度量檢驗，兩個時間點用配對t檢驗，P<0.05表示差異具有統計學意義。
2 結果
2.1 ARDS組與健康對照組血清和EBC中IL-8 、CC16 、ICAM-1含量的比較
ARDS組與健康對照組第1天血清和EBC中IL-8 、CC16 、ICAM-1含量比較見表1，由表1可知，ARDS組血清和EBC中，IL-8 、CC16 、ICAM-1含量均顯著高于對照組（P<0.01）。
表1
ARDS組與健康對照組血清和EBC中IL-8 、CC16 、ICAM-1含量的比較（）
2.2 不同嚴重程度的ARDS患者的血清和EBC中IL-8含量比較
ARDS患者血清及EBC中IL-8含量隨著ARDS嚴重程度的加重，有升高趨勢，但輕度、中度和重度組兩兩比較均無統計學意義（P>0.05），同時不論ARDS嚴重程度如何，患者入院第1天和第5天的血清和EBC中IL-8含量比較，差異無統計學意義（P>0.05），見表2。
表2
不同嚴重程度的ARDS患者在不同時間內血清和EBC中IL-8含量的比較［ng/L，（）］
2.3 不同嚴重程度的ARDS患者的血清和EBC中CC16含量的比較
不同嚴重程度的ARDS患者的血清及EBC中CC16含量的比較結果見表3，ARDS患者第1天和第5天血清及EBC中CC16含量均隨著ARDS嚴重程度的加重而上升。與輕度和中度組相比，重度組患者第1天和第5天血清及EBC中CC16含量均顯著升高（P<0.05），但輕度組與中度組間比較，差異無統計學意義（P>0.05），同時不論ARDS嚴重程度如何，患者入院第1天和第5天的血清和EBC中CC16含量比較，差異均無統計學意義（均P>0.05），見表3。
表3
不同嚴重程度的ARDS患者在不同時間內血清和EBC中CC16水平的比較［ng/mL，（）］
2.4 不同嚴重程度的ARDS患者的血清和EBC中ICAM-1含量的比較
不同嚴重程度的ARDS患者的血清及EBC中ICAM-1含量比較結果表4，ARDS患者入院第1天和第5天血清及EBC中ICAM-1含量隨著ARDS嚴重程度的加重而上升。患者入院第1天，與輕度組相比，重度組、中度組血清中ICAM-1含量顯著升高（P<0.05），入院第5天，各組血清ICAM-1含量兩兩比較，差異均沒有統計學意義（均P>0.05）。患者入院第1天，與輕度組相比，重度組、中度組EBC中ICAM-1含量均顯著升高（P<0.05），與中度組相比，重度組ICAM-1含量顯著升高（P<0.05）；而在患者入院第5天，重度組EBC中ICAM-1含量與輕度組、中度組比較均顯著升高（P<0.05）。
表4
不同嚴重程度的ARDS患者在不同時間內血清和EBC中ICAM-1水平的比較［ng/mL，（）］
除輕度組EBC外，無論ARDS嚴重程度如何，患者入院第1天和第5天的血清和EBC中ICAM-1含量均顯著性升高（P<0.05或0.01），見表4。
2.5 ARDS存活組與死亡組患者的血清和EBC中ICAM-1含量的比較
按照ARDS患者預后情況分為存活者30例、死亡者15例。ARDS存活者與死亡患者在入院第1天時血清中ICAM-1含量比較差異無統計學意義（P>0.05），而死亡者EBC中ICAM-1含量高于存活者（P<0.05），在入院第5天時，ARDS死亡者血清和EBC中ICAM-1含量均顯著高于存活者（P<0.05或0.01），見表5。
表5
ARDS存活組與死亡組患者血清和EBC中ICAM-1含量的比較（ng/mL，）
3 討論
ALI/ARDS發病的重要原因是巨噬細胞、中性粒細胞、血小板等炎癥細胞及其釋放的炎癥介質和細胞因子介導的炎癥反應，引起肺上皮細胞和微血管內皮細胞形態和功能改變，肺微血管通透性增高，血管內白蛋白滲漏到組織間隙，導致低氧血癥。因此，反映肺泡上皮、細胞損傷和肺泡壁通透性的生物標志物在ARDS病情嚴重程度和預后評估中有積極的作用[13]。近年來，多種生物標志物的檢出，能夠對ARDS的早期識別提供了有效依據，其中IL-8 [14]、CC16 、ICAM-1是較為廣泛認可的生物學標志物[15]。以往相關研究表明，ALI可致大鼠肺組織及血清IL-8含量明顯升高[16]；在其他影像學等指標確立ARDS診斷之前，血清及肺泡灌洗液中CC16含量已有改變，且結果較肺泡表面活性物質相關蛋白D、可溶性晚期糖基化終末產物受體、Ⅱ型肺泡細胞表面抗原等更有參考意義[17]；同時ARDS患者的ICAM-1在血漿及肺水腫液中均升高[7]。研究表明，ARDS患者相關生物學指標從第5天開始具有統計學差異，但是單獨指標檢測，對早期診斷ARDS及判斷預后缺乏高精準度，而組合檢測結果優于單獨測定[18]。近年來，研究者試圖為ARDS尋找聯合多項生物標志物指標，作為臨床早期診斷以及預測疾病預后，但目前仍未能實現這個目標。本研究觀察了3種生物學標志物在ARDS中的變化，以及預測其發生發展和臨床預后的價值。這些標志物涉及炎癥反應、內皮損傷、上皮損傷等多個方面。
IL-8為促炎細胞因子，主要由單核/巨噬細胞產生。在ARDS早期，IL-8在血漿中高表達，提示預后不良[18]；有研究表明，IL-8免疫復合物/抗IL-8自身抗體是ARDS治療的新靶點[7]。IL-8在揭示ARDS預后方面具有研究前景。CC16位于終末細支氣管，參與細胞再生、氣道毒物代謝，CC16是其特異性蛋白。ARDS 、創傷后合并肺炎以及呼吸機相關性肺炎患者均可在血清中發現CC16水平升高[17]，但目前仍需驗證CC16能否作為ARDS診斷及提示預后的生物標志物。ICAM-1是黏附分子中的免疫球蛋白超家族成員，同時是介導黏附反應的重要黏附分子。研究表明，ARDS患者血清中ICAM-1明顯高于壓力性肺水腫患者的水平，而且ARDS患者可溶性ICAM-1的升高與臨床不良預后呈相關性[6]。能否利用ICAM-1的水平反映ARDS患者的預后，需我們進一步證實。
本研究中主要以選取無創的方式檢測ARDS患者相關特異性指標，同時輔助以聯合檢測，以達到對ARDS早期有更精準的判斷。本研究發現，ARDS組血清和EBC中IL-8、CC16、ICAM-1均明顯高于對照組；與以往相關研究的結論一致，有趣的是不論ARDS嚴重程度如何，患者在第1天及第5天的血清及EBC中IL-8、CC16水平差異無統計學意義，但是各組ICAM-1（血清輕度組除外），入院第1天和第5天的血清和EBC中ICAM-1含量均有明顯統計學差異，這表明在ARDS病程早期，IL-8、CC16含量變化不大，但是ICAM-1含量或許能反映病程的時間軸，至于血清輕度組中ICAM-1含量無統計學差異，也許輕度ARDS患者ICAM-1 在EBC中的含量變化更能反映ARDS病程進展的趨勢，而血清中未能有明顯變化。另外，在輕中重的組間對比表明，除IL-8以外，CC16、ICAM-1均能反映肺損傷的程度，能夠為ARDS的分級提供強有力的依據，而相較于血清學內蛋白表達，EBC更能反映ARDS嚴重程度的不同。在28天存活組與死亡組的比較中，死亡組ICMA-1含量由入院第1天到第5天明顯上升，同時在第1天時EBC中即出現差異，或許預示著EBC比血清能更早地反映28天存活率與患者肺損傷之間的潛在關系，而ICMA-1的變化趨勢亦能反映患者的結局。
因此，以收集EBC的方法聯合檢出IL-8、CC16、ICAM-1在預判ARDS的嚴重程度以及評估預后具有重要意義。同時，相較于傳統有創檢測技術而言，EBC檢測技術使醫務人員能夠直接分析氣道的內襯液，且EBC檢測是以收集呼出氣體為基礎，不涉及任何可被感知的不適或危險，因此，EBC可以隨時并且多次重復的檢測，特別適用于機械通氣患者，為進一步研究危重病患者肺損傷提供了新的途徑，具有更大的優勢。
綜上所述，本研究從聯合炎癥反應、內皮損傷、上皮損傷的角度，在EBC中檢測IL-8、CC16、ICAM-1具有收集方法簡單、設備簡便易操作、可重復性好、不受地點及患者年齡和病情嚴重程度的限制，應用范圍廣泛。以無創的方式收集并檢測下呼吸道和肺實質的病變信號，為疾病評估肺損傷嚴重程度及區分ARDS類型提供客觀、量化依據。同時，通過對ARDS患者EBC中生物標志物（IL-8、CC16、ICAM-1）的聯合檢測，為研究ARDS的發病機制，了解疾病發展趨勢，評估病情危重程度和判斷預后提供客觀依據，具有重要的臨床意義，但仍需大樣本量論證，可見本研究仍不全面，且有局限；不僅如此，IL-8、CC16、ICAM-1的變化趨勢和ARDS患者病情、預后是否相互作用，共同影響病情進展尚未明確；本研究觀察時間尚且較短，也可能導致結局的偏倚，還應進一步加強觀察和研究，延長觀察時間，以充分闡明IL-8、CC16、ICAM-1 在ARDS患者的EBC中發揮的生物學作用。
利益沖突：本研究不涉及任何利益沖突。
