引用本文： 王建君, 徐小艷, 馮智坤, 楊金花. 乳腺癌中PTEN和Basigin1蛋白的表達與其臨床病理學特征的關系. 中國普外基礎與臨床雜志, 2020, 27(7): 825-830. doi: 10.7507/1007-9424.201908115 復制
在全球范圍內，中國乳腺癌病例數量占全球新診斷乳腺癌病例的 12.2%，中國乳腺癌死亡人數占全球乳腺癌死亡人數的 9.6%，乳腺癌仍是威脅女性健康的頭號“殺手” [1]。腫瘤的侵襲和轉移是乳腺癌患者死亡的主要原因。乳腺癌浸潤和轉移的發生機制復雜，其過程涉及眾多癌基因和抑癌基因。10 號染色體同源缺失性磷酸酶‐張力蛋白（phosphate and tension homology deleted on chromsome ten，PTEN）基因被認為是一種與腫瘤發生關系密切的抑癌基因，其在正常組織中高表達，在腫瘤組織中低表達或不表達。基質金屬蛋白酶誘導因子 1（Basigin1）又稱 CD147 或細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子（extracellular matrix metalloproteinase inducer，EMMPRIN），在腫瘤組織中高表達，在正常組織中幾乎不表達，是腫瘤發生和發展過程中的一個重要促癌基因。PTEN 和 Basigin1 分子在乳腺癌中的表達與乳腺癌的浸潤和轉移密切相關，大多數研究認為，PTEN 基因在乳腺癌中扮演抑癌基因角色[2-3]。進一步研究表明，PTEN 蛋白表達下調可使細胞間的黏附力下降，上調基質金屬蛋白酶（MMPs）和血管內皮生長因子（VEGF）蛋白的表達，進而促進腫瘤細胞的浸潤以及腫瘤血管形成[4-5]；Basigin1 基因在乳腺癌中扮演促癌基因角色，Basigin1 蛋白高表達也能夠上調 MMPs 和 VEGF 蛋白的表達，促進腫瘤細胞的浸潤、轉移和腫瘤血管的形成[6]。基于以上研究，PTEN 和 Basigin1 分子在乳腺癌中的表達均與 MMPs 和 VEGF 有關，推測乳腺癌中 PTEN 和 Basigin1 分子的表達可能存在相關性。目前，PTEN 和 Basigin1 蛋白表達的相關性研究在肺癌[7]、食管癌[8]和膠質瘤[9]中已有報道，但在乳腺癌中二者的相關性尚不明確。乳腺的預后與其分子亞型密切相關，PTEN 和 Basigin1 蛋白的表達與分子亞型有何關系？由于浸潤性導管癌占據乳腺癌的大部分，因此，本研究采用免疫組織化學法檢測了 76 例乳腺浸潤性導管癌組織中 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白的表達情況，分析 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白表達與臨床病理學特征及分子亞型的關系，以及二者表達的相關性，以此來回答上述問題，為拓展和豐富乳腺癌的侵襲和轉移機制提供研究思路。
1 資料與方法
1.1 臨床資料
本研究乳腺原發浸潤性導管癌病例的納入標準：① 術前均未接受化療或放療；② 臨床資料完整；③ 術后病理學檢查證實為乳腺浸潤性導管癌。所有病例均滿足上述標準，如不滿足則剔除。乳腺良性增生患者為同時期就診的女性患者，良性增生組織均為普通型導管上皮增生，如果是非典型增生或導管原位癌則剔除。
回顧性收集鄭州人民醫院 2014 年 1 月至 2015 年 12 月期間的 76 例乳腺原發浸潤性導管癌病理活檢標本，并收集患者相關的臨床資料。分別按照 2012 年 WHO 乳腺癌組織病理分級分類法[10]和 12 屆 St.Gallen 專家共識[11]的乳腺癌分子分型標準進行病理分級和分子分型。76 例乳腺癌患者均系女性，年齡 22～66 歲、（49±7）歲，其中≥50 歲 38 例；左乳腫瘤 29 例，右乳腫瘤 47 例；腫瘤最大徑≤2 cm 者 17 例，2～5 cm 者 35 例，>5 cm 者 24 例；WHO 分級：Ⅰ級 32 例，Ⅱ級 24 例，Ⅲ級 20 例；淋巴結轉移 43 例，無淋巴結轉移 33 例；TNM 分期：Ⅰ+Ⅱ期 43 例，Ⅲ+Ⅳ期 33 例；分子分型：Luminal A 型 23 例，Luminal B 型 25 例，人類表皮生長因子受體-2（Her-2）過表達型 12 例，基底樣亞型 16 例。20 例乳腺良性病變患者均為女性，年齡 20～50 歲、（35±11）歲；包括乳腺腺病 15 例，普通型導管上皮增生3 例，纖維腺瘤 2 例。所有標本均經 10% 甲醛固定，石蠟包埋，并經鄭州人民醫院病理科診斷確診。
1.2 主要試劑
PTEN 和 Basigin1 蛋白的一抗兔抗人單克隆抗體（即用型）、二抗及二氨基聯苯胺（DAB）均為福州邁新公司產品。
1.3 免疫組織化學染色
免疫組織化學染色的主要步驟如下：① 石蠟組織切片、烤片、脫蠟并水化；② 抗原修復；③ 一抗 37℃ 孵育 2 h；④ 二抗 37℃ 孵育 20～30 min；⑤ DAB 顯色 5～10 min；⑥ 脫水、透明和封片。用已知 PTEN 和 Basigin1 蛋白表達陽性的乳腺癌組織作為陽性對照，以 PBS 溶液代替一抗作為空白對照。
1.4 免疫組織化學結果判斷
根據染色強度和染色細胞所占百分比進行評分，進行半定量判定[7]。低表達包括：① 陰性即無陽性著色（–）；② 弱陽性（+）或中等強度陽性（++）、染色細胞所占百分比<30%，或弱陽性（+）、染色細胞所占百分比≥30%。高表達包括：① 中等強度陽性（++）、染色細胞所占百分比≥30%，或強陽性（+++）、染色細胞所占百分比<50%；② 強陽性（+++）、染色細胞所占百分比≥50%。本研究中免疫組織化學結果的判讀由兩位高年資病理主治醫師采用雙盲法進行，若兩位醫生意見不同，則由副高以上病理科醫師判讀。
1.5 統計學方法
采用 SPSS 17.0 統計軟件進行數據處理與統計分析。乳腺原發浸潤性導管癌和乳腺良性增生組織中 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白的高表達率比較，以及 PTEN 蛋白和 Basigin 蛋白的高表達和臨床病理學特征的相關性分析采用成組χ2檢驗，PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白表達的相關性分析采用 Spearman 秩相關分析。檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白在乳腺浸潤性導管癌組織中的表達
免疫組織化學染色結果顯示，PTEN 蛋白主要定位于細胞漿，呈棕褐色顆粒，在乳腺癌組織中低表達或不表達（圖 1a 和 1b）。76 例乳腺浸潤性導管癌組織中 PTEN 蛋白的高表達率為 56.6%（43/76），低于乳腺良性增生組織的 85.0%（17/20），χ2=5.457，P=0.019。見表 1。
圖1
示 PTEN 和 Basigin1 蛋白在乳腺良性增生組織和浸潤性導管癌組織中的表達（SP ×200）
a：PTEN 蛋白在乳腺良性增生組織中有較強的表達，主要定位于細胞漿；b：PTEN 蛋白在乳腺浸潤性導管癌組織中幾乎不表達；c：Basigin1 蛋白在乳腺良性增生組織中幾乎不表達；d：Basigin1 蛋白在乳腺浸潤性導管癌組織中有較強的表達，主要定位于細胞膜和（或）胞漿
表1
PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白在乳腺浸潤性導管癌組織和良性增生組織中的表達(例)
Basigin1 蛋白在乳腺浸潤性導管癌組織中主要定位于細胞膜和（或）胞漿，為粗細不等的棕褐色顆粒，其在乳腺良性增生組織中幾乎不表達（圖 1c 和 1d）。76 例乳腺浸潤性導管癌組織中 Basigin1 蛋白的高表達率為 51.3%（39/76），高于乳腺良性增生組織的 25.0%（5/20），χ2=4.417，P=0.036。見表 1。
2.2 乳腺浸潤性導管癌組織中 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白表達的相關性
Spearman 秩相關分析結果顯示，76 例乳腺浸潤性導管癌組織中，PTEN 蛋白與 Basigin1 蛋白的表達呈負相關，相關系數有統計學意義（rs=–0.481，P<0.001）。具體見表 2。
表2
乳腺浸潤性導管癌組織中 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白的表達（例）
2.3 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白表達與乳腺浸潤性導管癌臨床病理學特征的關系
在乳腺浸潤性導管癌組織中，PTEN 蛋白的高表達與年齡、腫瘤位置、腫瘤最大徑和 TNM 分期均無關（P>0.05），但與 WHO 分級和淋巴結轉移狀況均相關（P<0.05）。WHO 分級越高，PTEN 蛋白的高表達率越低；且無淋巴結轉移者的 PTEN 蛋白的高表達率高于有淋巴結轉移者。具體見表 3。
表3
乳腺浸潤性導管癌組織中 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白的表達與臨床病理學特征的關系（例）
Basigin1 蛋白的高表達與年齡、腫瘤位置及腫瘤最大徑均無關（P>0.05），但與 WHO 分級、淋巴結轉移狀況和 TNM 分期均相關（P<0.05），WHO 分級越高，Basigin1 蛋白的高表達率越高；無淋巴結轉移者的 Basigin1 蛋白的高表達率低于有淋巴結轉移者；TNM 分期為Ⅰ+Ⅱ期者的 PTEN 蛋白的高表達率低于Ⅲ+Ⅳ者。具體見表 3。
2.4 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白表達與乳腺癌分子亞型的關系
76 例乳腺浸潤性導管癌中，PTEN 蛋白的高表達與乳腺癌的分子亞型有關（P<0.001），其在 Luminal A 型和 Luminal B 型中的高表達率高于 Her-2 過表達型和基底樣亞型；Basigin1 蛋白的高表達與乳腺癌的分子亞型也有關（P<0.001），其在 Her-2 過表達型和基底樣亞型中的高表達率高于 Luminal A 型和 Luminal B 型。具體見表 3。
3 討論
隨著對腫瘤基因的不斷深入研究，人們對乳腺癌的發病機制有了進一步的認識，乳腺癌的發生、發展和預后涉及多個癌基因和抑癌基因的異常表達，如 Her-2、P53 等基因[12-13]。PTEN 和 Basigin1 基因作為調控細胞生長和凋亡的關鍵基因，其在包括乳腺癌在內的多種實體腫瘤中的作用已受到關注。
3.1 PTEN 分子在腫瘤中的生物學作用
PTEN 基因是一種抑癌基因，目前已在多種腫瘤中發現存在 PTEN 基因的突變，如乳腺癌、肺癌、前列腺癌等[14-16]，它能夠負性調節細胞生長，誘導凋亡并抑制細胞浸潤和轉移[17-18]。本研究結果表明，乳腺浸潤性導管癌組織中 PTEN 蛋白的高表達率低于乳腺良性增生組織，其表達與乳腺癌的 WHO 分級以及淋巴結轉移有關，而 PTEN 蛋白的表達與其他臨床病理學特征包括年齡、腫瘤部位、腫瘤直徑以及 TNM 分期均無關。以往文獻[3, 19]報道，乳腺癌中 PTEN 蛋白呈低表達，其表達與 WHO 分級、淋巴結轉移、增殖指數、雌激素受體（ER）失表達和預后密切相關。不同的是，本研究結果顯示，PTEN 蛋白的高表達與腫瘤直徑和 TNM 分期均無關，推測其可能與樣本量較小有關，或者是本研究選取的乳腺癌組織學亞型為浸潤性導管癌；此外也有可能是免疫組織化學染色結果判讀標準不一導致的。
3.2 Basigin1 分子在腫瘤中的生物學作用
Basigin1 基因是一種促癌基因，文獻[6, 20-21]報道，其在肝癌、結腸癌、前列腺癌等惡性腫瘤組織中高表達，其高表達提示腫瘤的預后不良。本研究結果表明，Basigin1 蛋白與乳腺浸潤性導管癌的 WHO 分級、TNM 分期及淋巴結轉移均有關，提示該蛋白在乳腺癌的進展過程中可能發揮了重要的作用。本研究 Basigin1 蛋白的研究結果與以往文獻[6, 20-21]基本相似。
3.3 PTEN 和 Basigin1 分子在腫瘤中的相關性研究
關于 PTEN 和 Basigin1 分子二者的關系，兩者在肺癌、食管癌和膠質瘤組織中的相關性已有文獻報道[7-9]。本研究結果表明，乳腺浸潤性導管癌組織中，二者的表達呈負相關，提示二者的表達失調在乳腺癌的發生和發展中可能具有協同作用。研究[22]表明，抑癌基因的抑癌作用以及癌基因的致癌作用不僅僅是某個基因的行為，而是多個基因表達共同協作的結果。PTEN 蛋白的表達下調可使細胞間的黏附力下降，上調 MMPs 和 VEGF 蛋白的表達，進而促進腫瘤細胞的浸潤以及腫瘤血管形成[4-5]。乳腺癌組織中 Basigin1 蛋白的高表達能夠上調 MMPs 和 VEGF 蛋白的表達，促進腫瘤細胞的浸潤、轉移和腫瘤血管的形成[23-24]。此外，Basigin1 蛋白還可以刺激腫瘤本身以及其周圍的基質分泌 MMPs 和 VEGF[25]。有文獻研究表明，PTEN 基因可以通過抑制絲裂原活化蛋白激酶/細胞外調節蛋白激酶（MAPK/ERK）、磷脂酰肌醇 3 激酶/（蛋白激酶 B（PI3K/AKT）等信號通路來抑制 MMPs 和 VEGF 蛋白的表達，進而發揮腫瘤抑制作用[26-27]；Basigin1 基因同樣可以通過激活 MAPK/ERK 信號通路并且上調 MMP-9 的表達，來促進腫瘤上皮間質轉化途徑，進而影響腫瘤的浸潤和轉移[28-29]。根據本研究結果，可推測在乳腺癌中，PTEN 蛋白的失表達和 Basigin1 蛋白的過表達可能會導致相同的信號通路顯著激活，從而上調 MMPs 和 VEGF 蛋白的表達，促進腫瘤的發生和發展。由此提示，PTEN 和 Basigin1 蛋白涉及共同的信號通路，共同促進 MMPs 和 VEGF 蛋白的表達，兩者產生的協同作用促進了乳腺癌的發生和發展。本研究中對 PTEN 和 Basigin1 蛋白相關性的探索將為乳腺癌侵襲和轉移機制研究提供新的思路，不足之處在于僅是從蛋白水平分析了二者表達的相關性，其具體分子作用機制有待進一步研究。
3.4 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白與乳腺癌分子分型的關系
乳腺癌的分子分型和預后及治療密切相關[30]。本研究結果顯示，PTEN 蛋白的表達與乳腺癌的分子亞型有關，其中預后較好的 Luminal A 型和 Luminal B 型有較高的高表達率，這與以往研究報道[30]較一致；Basigin1 蛋白的高表達率在 Her-2 過表達型和基底樣亞型中較高，但目前有關 Basigin1 蛋白在乳腺浸潤性癌各分子亞型中的表達報道甚少，有待繼續研究。
綜上所述，PTEN 蛋白在乳腺良性增生組織中高表達，在乳腺浸潤性導管癌組織中低表達，其低表達提示組織學 WHO 分級高及淋巴結易轉移，其在 Luminal A 型和 Luminal B 型患者中有較高的高表達率；Basigin1 蛋白在乳腺良性增生組織中幾乎不表達，在乳腺浸潤性導管癌組織中高表達，該蛋白的高表達率提示 WHO 分級高，腫瘤分期高及淋巴結易轉移，其在 Her-2 過表達型和基底樣亞型患者中的高表達率較高；乳腺浸潤性導管癌組織中 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白的表達呈負相關，二者可能通過相同的信號通路、共同作用，促進了乳腺癌的發生和發展，但其分子機制有待進一步研究。
重要聲明
利益沖突聲明：本文全體作者閱讀并理解了《中國普外基礎與臨床雜志》的政策聲明，我們沒有相互競爭的利益。
作者貢獻聲明：王建君進行研究設計與實施、資料收集整理、撰寫論文并對文章負責；徐小艷進行資料收集及統計分析；馮智坤主要負責免疫組織化學染色工作；楊金花對文章的知識性內容作批評性審閱，并進行質量控制和審校。
倫理聲明：本研究已通過鄭州人民醫院的倫理審核批準。
在全球范圍內，中國乳腺癌病例數量占全球新診斷乳腺癌病例的 12.2%，中國乳腺癌死亡人數占全球乳腺癌死亡人數的 9.6%，乳腺癌仍是威脅女性健康的頭號“殺手” [1]。腫瘤的侵襲和轉移是乳腺癌患者死亡的主要原因。乳腺癌浸潤和轉移的發生機制復雜，其過程涉及眾多癌基因和抑癌基因。10 號染色體同源缺失性磷酸酶‐張力蛋白（phosphate and tension homology deleted on chromsome ten，PTEN）基因被認為是一種與腫瘤發生關系密切的抑癌基因，其在正常組織中高表達，在腫瘤組織中低表達或不表達。基質金屬蛋白酶誘導因子 1（Basigin1）又稱 CD147 或細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子（extracellular matrix metalloproteinase inducer，EMMPRIN），在腫瘤組織中高表達，在正常組織中幾乎不表達，是腫瘤發生和發展過程中的一個重要促癌基因。PTEN 和 Basigin1 分子在乳腺癌中的表達與乳腺癌的浸潤和轉移密切相關，大多數研究認為，PTEN 基因在乳腺癌中扮演抑癌基因角色[2-3]。進一步研究表明，PTEN 蛋白表達下調可使細胞間的黏附力下降，上調基質金屬蛋白酶（MMPs）和血管內皮生長因子（VEGF）蛋白的表達，進而促進腫瘤細胞的浸潤以及腫瘤血管形成[4-5]；Basigin1 基因在乳腺癌中扮演促癌基因角色，Basigin1 蛋白高表達也能夠上調 MMPs 和 VEGF 蛋白的表達，促進腫瘤細胞的浸潤、轉移和腫瘤血管的形成[6]。基于以上研究，PTEN 和 Basigin1 分子在乳腺癌中的表達均與 MMPs 和 VEGF 有關，推測乳腺癌中 PTEN 和 Basigin1 分子的表達可能存在相關性。目前，PTEN 和 Basigin1 蛋白表達的相關性研究在肺癌[7]、食管癌[8]和膠質瘤[9]中已有報道，但在乳腺癌中二者的相關性尚不明確。乳腺的預后與其分子亞型密切相關，PTEN 和 Basigin1 蛋白的表達與分子亞型有何關系？由于浸潤性導管癌占據乳腺癌的大部分，因此，本研究采用免疫組織化學法檢測了 76 例乳腺浸潤性導管癌組織中 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白的表達情況，分析 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白表達與臨床病理學特征及分子亞型的關系，以及二者表達的相關性，以此來回答上述問題，為拓展和豐富乳腺癌的侵襲和轉移機制提供研究思路。
1 資料與方法
1.1 臨床資料
本研究乳腺原發浸潤性導管癌病例的納入標準：① 術前均未接受化療或放療；② 臨床資料完整；③ 術后病理學檢查證實為乳腺浸潤性導管癌。所有病例均滿足上述標準，如不滿足則剔除。乳腺良性增生患者為同時期就診的女性患者，良性增生組織均為普通型導管上皮增生，如果是非典型增生或導管原位癌則剔除。
回顧性收集鄭州人民醫院 2014 年 1 月至 2015 年 12 月期間的 76 例乳腺原發浸潤性導管癌病理活檢標本，并收集患者相關的臨床資料。分別按照 2012 年 WHO 乳腺癌組織病理分級分類法[10]和 12 屆 St.Gallen 專家共識[11]的乳腺癌分子分型標準進行病理分級和分子分型。76 例乳腺癌患者均系女性，年齡 22～66 歲、（49±7）歲，其中≥50 歲 38 例；左乳腫瘤 29 例，右乳腫瘤 47 例；腫瘤最大徑≤2 cm 者 17 例，2～5 cm 者 35 例，>5 cm 者 24 例；WHO 分級：Ⅰ級 32 例，Ⅱ級 24 例，Ⅲ級 20 例；淋巴結轉移 43 例，無淋巴結轉移 33 例；TNM 分期：Ⅰ+Ⅱ期 43 例，Ⅲ+Ⅳ期 33 例；分子分型：Luminal A 型 23 例，Luminal B 型 25 例，人類表皮生長因子受體-2（Her-2）過表達型 12 例，基底樣亞型 16 例。20 例乳腺良性病變患者均為女性，年齡 20～50 歲、（35±11）歲；包括乳腺腺病 15 例，普通型導管上皮增生3 例，纖維腺瘤 2 例。所有標本均經 10% 甲醛固定，石蠟包埋，并經鄭州人民醫院病理科診斷確診。
1.2 主要試劑
PTEN 和 Basigin1 蛋白的一抗兔抗人單克隆抗體（即用型）、二抗及二氨基聯苯胺（DAB）均為福州邁新公司產品。
1.3 免疫組織化學染色
免疫組織化學染色的主要步驟如下：① 石蠟組織切片、烤片、脫蠟并水化；② 抗原修復；③ 一抗 37℃ 孵育 2 h；④ 二抗 37℃ 孵育 20～30 min；⑤ DAB 顯色 5～10 min；⑥ 脫水、透明和封片。用已知 PTEN 和 Basigin1 蛋白表達陽性的乳腺癌組織作為陽性對照，以 PBS 溶液代替一抗作為空白對照。
1.4 免疫組織化學結果判斷
根據染色強度和染色細胞所占百分比進行評分，進行半定量判定[7]。低表達包括：① 陰性即無陽性著色（–）；② 弱陽性（+）或中等強度陽性（++）、染色細胞所占百分比<30%，或弱陽性（+）、染色細胞所占百分比≥30%。高表達包括：① 中等強度陽性（++）、染色細胞所占百分比≥30%，或強陽性（+++）、染色細胞所占百分比<50%；② 強陽性（+++）、染色細胞所占百分比≥50%。本研究中免疫組織化學結果的判讀由兩位高年資病理主治醫師采用雙盲法進行，若兩位醫生意見不同，則由副高以上病理科醫師判讀。
1.5 統計學方法
采用 SPSS 17.0 統計軟件進行數據處理與統計分析。乳腺原發浸潤性導管癌和乳腺良性增生組織中 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白的高表達率比較，以及 PTEN 蛋白和 Basigin 蛋白的高表達和臨床病理學特征的相關性分析采用成組χ2檢驗，PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白表達的相關性分析采用 Spearman 秩相關分析。檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白在乳腺浸潤性導管癌組織中的表達
免疫組織化學染色結果顯示，PTEN 蛋白主要定位于細胞漿，呈棕褐色顆粒，在乳腺癌組織中低表達或不表達（圖 1a 和 1b）。76 例乳腺浸潤性導管癌組織中 PTEN 蛋白的高表達率為 56.6%（43/76），低于乳腺良性增生組織的 85.0%（17/20），χ2=5.457，P=0.019。見表 1。
圖1
示 PTEN 和 Basigin1 蛋白在乳腺良性增生組織和浸潤性導管癌組織中的表達（SP ×200）
a：PTEN 蛋白在乳腺良性增生組織中有較強的表達，主要定位于細胞漿；b：PTEN 蛋白在乳腺浸潤性導管癌組織中幾乎不表達；c：Basigin1 蛋白在乳腺良性增生組織中幾乎不表達；d：Basigin1 蛋白在乳腺浸潤性導管癌組織中有較強的表達，主要定位于細胞膜和（或）胞漿
表1
PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白在乳腺浸潤性導管癌組織和良性增生組織中的表達(例)
Basigin1 蛋白在乳腺浸潤性導管癌組織中主要定位于細胞膜和（或）胞漿，為粗細不等的棕褐色顆粒，其在乳腺良性增生組織中幾乎不表達（圖 1c 和 1d）。76 例乳腺浸潤性導管癌組織中 Basigin1 蛋白的高表達率為 51.3%（39/76），高于乳腺良性增生組織的 25.0%（5/20），χ2=4.417，P=0.036。見表 1。
2.2 乳腺浸潤性導管癌組織中 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白表達的相關性
Spearman 秩相關分析結果顯示，76 例乳腺浸潤性導管癌組織中，PTEN 蛋白與 Basigin1 蛋白的表達呈負相關，相關系數有統計學意義（rs=–0.481，P<0.001）。具體見表 2。
表2
乳腺浸潤性導管癌組織中 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白的表達（例）
2.3 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白表達與乳腺浸潤性導管癌臨床病理學特征的關系
在乳腺浸潤性導管癌組織中，PTEN 蛋白的高表達與年齡、腫瘤位置、腫瘤最大徑和 TNM 分期均無關（P>0.05），但與 WHO 分級和淋巴結轉移狀況均相關（P<0.05）。WHO 分級越高，PTEN 蛋白的高表達率越低；且無淋巴結轉移者的 PTEN 蛋白的高表達率高于有淋巴結轉移者。具體見表 3。
表3
乳腺浸潤性導管癌組織中 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白的表達與臨床病理學特征的關系（例）
Basigin1 蛋白的高表達與年齡、腫瘤位置及腫瘤最大徑均無關（P>0.05），但與 WHO 分級、淋巴結轉移狀況和 TNM 分期均相關（P<0.05），WHO 分級越高，Basigin1 蛋白的高表達率越高；無淋巴結轉移者的 Basigin1 蛋白的高表達率低于有淋巴結轉移者；TNM 分期為Ⅰ+Ⅱ期者的 PTEN 蛋白的高表達率低于Ⅲ+Ⅳ者。具體見表 3。
2.4 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白表達與乳腺癌分子亞型的關系
76 例乳腺浸潤性導管癌中，PTEN 蛋白的高表達與乳腺癌的分子亞型有關（P<0.001），其在 Luminal A 型和 Luminal B 型中的高表達率高于 Her-2 過表達型和基底樣亞型；Basigin1 蛋白的高表達與乳腺癌的分子亞型也有關（P<0.001），其在 Her-2 過表達型和基底樣亞型中的高表達率高于 Luminal A 型和 Luminal B 型。具體見表 3。
3 討論
隨著對腫瘤基因的不斷深入研究，人們對乳腺癌的發病機制有了進一步的認識，乳腺癌的發生、發展和預后涉及多個癌基因和抑癌基因的異常表達，如 Her-2、P53 等基因[12-13]。PTEN 和 Basigin1 基因作為調控細胞生長和凋亡的關鍵基因，其在包括乳腺癌在內的多種實體腫瘤中的作用已受到關注。
3.1 PTEN 分子在腫瘤中的生物學作用
PTEN 基因是一種抑癌基因，目前已在多種腫瘤中發現存在 PTEN 基因的突變，如乳腺癌、肺癌、前列腺癌等[14-16]，它能夠負性調節細胞生長，誘導凋亡并抑制細胞浸潤和轉移[17-18]。本研究結果表明，乳腺浸潤性導管癌組織中 PTEN 蛋白的高表達率低于乳腺良性增生組織，其表達與乳腺癌的 WHO 分級以及淋巴結轉移有關，而 PTEN 蛋白的表達與其他臨床病理學特征包括年齡、腫瘤部位、腫瘤直徑以及 TNM 分期均無關。以往文獻[3, 19]報道，乳腺癌中 PTEN 蛋白呈低表達，其表達與 WHO 分級、淋巴結轉移、增殖指數、雌激素受體（ER）失表達和預后密切相關。不同的是，本研究結果顯示，PTEN 蛋白的高表達與腫瘤直徑和 TNM 分期均無關，推測其可能與樣本量較小有關，或者是本研究選取的乳腺癌組織學亞型為浸潤性導管癌；此外也有可能是免疫組織化學染色結果判讀標準不一導致的。
3.2 Basigin1 分子在腫瘤中的生物學作用
Basigin1 基因是一種促癌基因，文獻[6, 20-21]報道，其在肝癌、結腸癌、前列腺癌等惡性腫瘤組織中高表達，其高表達提示腫瘤的預后不良。本研究結果表明，Basigin1 蛋白與乳腺浸潤性導管癌的 WHO 分級、TNM 分期及淋巴結轉移均有關，提示該蛋白在乳腺癌的進展過程中可能發揮了重要的作用。本研究 Basigin1 蛋白的研究結果與以往文獻[6, 20-21]基本相似。
3.3 PTEN 和 Basigin1 分子在腫瘤中的相關性研究
關于 PTEN 和 Basigin1 分子二者的關系，兩者在肺癌、食管癌和膠質瘤組織中的相關性已有文獻報道[7-9]。本研究結果表明，乳腺浸潤性導管癌組織中，二者的表達呈負相關，提示二者的表達失調在乳腺癌的發生和發展中可能具有協同作用。研究[22]表明，抑癌基因的抑癌作用以及癌基因的致癌作用不僅僅是某個基因的行為，而是多個基因表達共同協作的結果。PTEN 蛋白的表達下調可使細胞間的黏附力下降，上調 MMPs 和 VEGF 蛋白的表達，進而促進腫瘤細胞的浸潤以及腫瘤血管形成[4-5]。乳腺癌組織中 Basigin1 蛋白的高表達能夠上調 MMPs 和 VEGF 蛋白的表達，促進腫瘤細胞的浸潤、轉移和腫瘤血管的形成[23-24]。此外，Basigin1 蛋白還可以刺激腫瘤本身以及其周圍的基質分泌 MMPs 和 VEGF[25]。有文獻研究表明，PTEN 基因可以通過抑制絲裂原活化蛋白激酶/細胞外調節蛋白激酶（MAPK/ERK）、磷脂酰肌醇 3 激酶/（蛋白激酶 B（PI3K/AKT）等信號通路來抑制 MMPs 和 VEGF 蛋白的表達，進而發揮腫瘤抑制作用[26-27]；Basigin1 基因同樣可以通過激活 MAPK/ERK 信號通路并且上調 MMP-9 的表達，來促進腫瘤上皮間質轉化途徑，進而影響腫瘤的浸潤和轉移[28-29]。根據本研究結果，可推測在乳腺癌中，PTEN 蛋白的失表達和 Basigin1 蛋白的過表達可能會導致相同的信號通路顯著激活，從而上調 MMPs 和 VEGF 蛋白的表達，促進腫瘤的發生和發展。由此提示，PTEN 和 Basigin1 蛋白涉及共同的信號通路，共同促進 MMPs 和 VEGF 蛋白的表達，兩者產生的協同作用促進了乳腺癌的發生和發展。本研究中對 PTEN 和 Basigin1 蛋白相關性的探索將為乳腺癌侵襲和轉移機制研究提供新的思路，不足之處在于僅是從蛋白水平分析了二者表達的相關性，其具體分子作用機制有待進一步研究。
3.4 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白與乳腺癌分子分型的關系
乳腺癌的分子分型和預后及治療密切相關[30]。本研究結果顯示，PTEN 蛋白的表達與乳腺癌的分子亞型有關，其中預后較好的 Luminal A 型和 Luminal B 型有較高的高表達率，這與以往研究報道[30]較一致；Basigin1 蛋白的高表達率在 Her-2 過表達型和基底樣亞型中較高，但目前有關 Basigin1 蛋白在乳腺浸潤性癌各分子亞型中的表達報道甚少，有待繼續研究。
綜上所述，PTEN 蛋白在乳腺良性增生組織中高表達，在乳腺浸潤性導管癌組織中低表達，其低表達提示組織學 WHO 分級高及淋巴結易轉移，其在 Luminal A 型和 Luminal B 型患者中有較高的高表達率；Basigin1 蛋白在乳腺良性增生組織中幾乎不表達，在乳腺浸潤性導管癌組織中高表達，該蛋白的高表達率提示 WHO 分級高，腫瘤分期高及淋巴結易轉移，其在 Her-2 過表達型和基底樣亞型患者中的高表達率較高；乳腺浸潤性導管癌組織中 PTEN 蛋白和 Basigin1 蛋白的表達呈負相關，二者可能通過相同的信號通路、共同作用，促進了乳腺癌的發生和發展，但其分子機制有待進一步研究。
重要聲明
利益沖突聲明：本文全體作者閱讀并理解了《中國普外基礎與臨床雜志》的政策聲明，我們沒有相互競爭的利益。
作者貢獻聲明：王建君進行研究設計與實施、資料收集整理、撰寫論文并對文章負責；徐小艷進行資料收集及統計分析；馮智坤主要負責免疫組織化學染色工作；楊金花對文章的知識性內容作批評性審閱，并進行質量控制和審校。
倫理聲明：本研究已通過鄭州人民醫院的倫理審核批準。
