引用本文： 楊富強, 王巖, 馬競優, 李政, 劉珍. Notch-2 及 Numb 蛋白在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達及其臨床意義. 中國普外基礎與臨床雜志, 2018, 25(1): 59-64. doi: 10.7507/1007-9424.201707059 復制
甲狀腺癌是頭頸部最常見的惡性腫瘤之一，以女性多發，近年來甲狀腺癌的發病率呈逐年上升趨勢，嚴重威脅著人類的生命健康[1]。從病理學角度來講甲狀腺癌可分為以下 4 種類型：甲狀腺乳頭狀癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）、甲狀腺濾泡狀癌、未分化癌以及甲狀腺髓樣癌，其中 PTC 的發病率最高，多見于 30～45 歲女性，且較早發生淋巴結轉移[2]。隨著現代分子生物學的迅速發展，特別是對腫瘤基因及其表達機制的深入研究，已有研究[3]證實，經典的 Notch 信號通路在機體的細胞分化和器官發育，以及腫瘤的發生、發展、侵襲和轉移中均發揮非常重要的作用。當前，隨著對 PTC 發生發展的進一步深入探索及認識，已有研究[4]表明，Notch 信號通路是 PTC 進程的重要通路之一。然而，在 PTC 組織中，關于 Notch 信號通路中的 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白表達的報道較少。因此，本研究通過檢測 Notch 信號通路中的 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白在 PTC 組織中的表達及其與患者臨床病理學特征之間的關系，以期進一步探索兩者在 PTC 發生、發展、侵襲和轉移中的作用，為 PTC 的早期診斷、術前評估、手術治療、預后判斷及基因治療提供思路。
1 資料與方法
1.1 研究對象
回顧性收集 2014 年 3 月至 2017 年 3 月期間于內蒙古民族大學附屬醫院行手術切除的 50 例 PTC 患者的癌組織及其癌旁組織標本（以后續病理學切片判定，切緣距離癌灶以遠 1 cm），所有入選病例術前均未進行放化療，且均經術后病理組織學檢查證實為 PTC。50 例患者中，男 8 例，女 42 例；年齡 19～69 歲，平均年齡為 46.5 歲，其中<45 歲 26 例，≥45 歲 24 例。臨床分期：Ⅰ期 16 例，Ⅱ期9 例，Ⅲ期 13 例，Ⅳ期 12 例。腫瘤直徑：≤2 cm 30 例，>2 cm 20 例；存在包膜浸潤 11 例，有頸部淋巴結轉移 23 例。對于腫瘤直徑小于 1 cm 且無頸部放射史、無遠處轉移、無甲狀腺外侵犯、切緣陰性和對側淋巴結正常者行患側腺葉切除術＋患側中央區淋巴結清掃術，本組有 29 例；對腫瘤直徑≥1 cm 及有患側淋巴結轉移者行甲狀腺全切除或次全切除術+患側中央區淋巴結清掃術，本組有 13 例；對于有頸部淋巴結陽性或懷疑有頸部淋巴結轉移者（無論腫瘤直徑大小），行甲狀腺癌改良根治術，已明確對側頸部淋巴結轉移者同時行對側淋巴結清掃，本組有 8 例。
1.2 主要試劑和材料
兔抗人 Notch-2 和 Numb 多克隆抗體均購于武漢艾美捷科技有限公司，SP 免疫組織化學染色試劑盒和檸檬酸抗原修復試劑均購于北京中杉金橋生物技術有限公司，PBS 緩沖液由內蒙古民族大學附屬醫院病理科贊助提供。
1.3 免疫組織化學染色
采用免疫組織化學 SP 法檢測癌組織及其癌旁組織中 Notch-2 蛋白及 Numb 蛋白的表達。首先將標本制成 4 μm 厚的組織切片，行常規脫蠟水化；給予檸檬酸抗原修復，然后用 3% H2O2 去離子水滅活內源性過氧化物酶，在室溫下孵育 10 min 后，滴加動物非免疫血清，再在室溫下孵育 10 min；除去血清，滴加一抗，在室溫下孵育 90 min；滴加生物素標記的二抗，在室溫下孵育 30 min；以 DAB 顯色，鏡下觀察。詳細操作及抗體稀釋比例見試劑盒說明書。以 PBS 溶液代替一抗作為陰性對照，以已知的 Notch-2 蛋白及 Numb 蛋白陽性染色的 PTC 癌旁組織作為陽性對照。
Notch-2 蛋白主要表達在細胞質和細胞核內，Numb 蛋白主要表達于細胞質和細胞膜上，黃色顆粒為陽性表達[5-6]。依據半定量積分方法對陽性結果進行判定[7]。高倍光鏡下（×100）每個標本隨機選取 10 個視野，計算出陽性細胞百分比（以 10 個視野的陽性細胞數占細胞總數的比例作為該標本的陽性細胞百分比），然后據此進行評分：<10% 判定為 0 分，10%～25% 判定為 1 分，26%～50% 判定為 2 分，51%～70% 判定為 3 分，>70% 判定為 4 分。再根據細胞染色強度進行評分：無色判定為 0 分，黃色判定為 1 分，棕黃色判定為 2 分，棕褐色判定為 3 分。最后將陽性細胞百分比評分與染色強度評分相乘，得到的乘積作為綜合評分：0 分為陰性（–），1～4 分為弱陽性（+），5～8 分為中度陽性（++），大于 8 分為強陽性（+++）。陰性（–）和弱陽性（+）者判為陰性表達，中度陽性（++）和強陽性（+++）者判為陽性表達[8]。
1.4 統計學方法
采用 SPSS 19.0 統計學軟件對數據進行分析。癌組織和癌旁組織中 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白的表達陽性率比較采用配對 χ2 檢驗；癌組織中 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白表達的相關性分析采用 Spearman 秩相關分析；癌組織中 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白的表達與患者臨床病理學特征的關系分析采用成組 χ2 檢驗。檢驗水準 α=0.05。
2 結果
2.1 癌組織和癌旁組織中 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白的表達
免疫組織化學染色結果顯示：Notch-2 蛋白主要表達于細胞漿和細胞核內，Numb 蛋白主要表達于細胞質和細胞膜上，均呈黃色顆粒（圖 1）。癌組織中 Notch-2 蛋白表達陽性 41 例，表達陽性率為 82.00%；癌旁組織中 Notch-2 蛋白表達陽性 9 例，表達陽性率為 18.00%，低于癌組織，差異有統計學意義（χ2=40.960，P<0.001），見表 1。癌組織中 Numb 蛋白表達陽性 33 例，表達陽性率為 66.00%；癌旁組織中 Numb 蛋白均呈陰性表達，表達陽性率為 0，低于癌組織，差異有統計學意義（χ2=49.254，P<0.001），見表 2。
圖1
示 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白在癌組織和癌旁組織中的表達（SP ×100）
a：癌組織中 Notch-2 蛋白呈中度陽性表達；b：癌組織中 Notch-2 蛋白呈陰性表達；c：癌組織中 Numb 蛋白呈中度陽性表達；d：癌組織中 Numb 蛋白呈陰性表達；e：癌旁組織中 Notch-2 蛋白呈中度陽性表達；f：癌旁組織中 Notch-2 蛋白呈陰性表達；g：癌旁組織中 Numb 蛋白呈弱陽性表達；h：癌旁組織中 Numb 蛋白呈陰性表達
表1
癌組織和癌旁組織中 Notch-2 蛋白的表達（例）
表2
癌組織和癌旁組織中 Numb 蛋白的表達（例）
2.2 癌組織中 Notch-2 蛋白與 Numb 蛋白表達的相關性
Spearman 秩相關分析結果示，癌組織中 Notch-2 蛋白與 Numb 蛋白的表達呈正相關關系（rs=0.323，P=0.022），見表 3。
表3
癌組織中 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白表達的關系（例）
2.3 癌組織中 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白的表達與患者臨床病理學特征之間的關系
癌組織中 Notch-2 蛋白的表達與患者的性別、年齡、腫瘤直徑、包膜浸潤、頸部淋巴結轉移及 TNM 分期均無關（P>0.05）；癌組織中 Numb 蛋白的表達與患者的性別、年齡、腫瘤直徑和包膜浸潤均無關（P>0.05），而與頸部淋巴結轉移和 TNM 分期均有關，無淋巴結轉移組患者的 Numb 蛋白的表達陽性率高于發生頸部淋巴結轉移組，Ⅰ期+Ⅱ期組患者的 Numb 蛋白的表達陽性率高于Ⅲ期+Ⅳ期組。具體見表 4。
表4
癌組織中 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白的表達與患者臨床病理學特征的關系 ［例（%） ］
3 討論
在進化過程中，經典的 Notch 信號通路是高度保守的信號通路，它是介導細胞與細胞之間直接接觸的非常重要的信號通路之一，其調控了多細胞機體的細胞凋亡、增殖以及分化過程[9]。經典 Notch 信號通路的異常激活或其結構性活化與多種惡性腫瘤的發生和發展有關[10-11]。本研究觀察了經典 Notch 信號通路中 Notch-2 蛋白及其重要調節因子 Numb 蛋白在 PTC 組織中的表達情況，并分析了兩者表達與 PTC 患者臨床病理學特征之間的相關關系，以期進一步探索研究這 2 種蛋白與 PTC 生物學行為的關系。
Notch 信號通路中的 Notch-2 蛋白是此信號通路中的重要蛋白之一，它在 PTC 組織中的異常表達可能對腫瘤的發生和發展起重要的調控作用[12-13]。有多項研究[14-15]結果證明：Notch-2 蛋白與多種惡性腫瘤的發生和發展相關，并且在不同組織、甚至在相同組織的不同發展階段中，Notch-2 蛋白所起的作用也不盡相同，表現為促癌作用或抑癌作用。本研究結果顯示，PTC 組織中 Notch-2 蛋白的表達陽性率為 82.00%，高于癌旁組織。該結果提示，Notch-2 蛋白在 PTC 組織中的表達明顯上調，可能參與了 PTC 發生的早期分子事件且極可能促進了 PTC 的發生，但其在 PTC 中的具體作用機制尚未完全闡明。本研究進一步分析了 PTC 組織中 Notch-2 蛋白表達與患者臨床病理學特征之間的關系，但結果表明：Notch-2 蛋白的表達與患者的性別、年齡、腫瘤直徑、包膜浸潤、頸部淋巴結轉移及 TNM 分期均無關（P>0.05），此結果提示，Notch-2 蛋白可能參與了 PTC 的發生，但其與之后的生物學行為關系不大，有待進一步研究。
Numb 蛋白又稱細胞命運決定子，作為 Notch 信號通路中的重要調節因子，是一種與細胞內膜相連的磷酸酪氨酸結合域（PTB）包含蛋白，在生物體內 Numb 蛋白是最重要的細胞命運決定因子[16]。Numb 蛋白在人體成熟組織中廣泛分布，作為經典 Notch 信號通路中重要的調節因子，可能對 Notch 信號通路起到抑制或阻斷作用，廣泛參與分化/增殖的平衡、凋亡調控、細胞遷徙、組織再生等重要的生理過程[17-18]。本研究結果顯示，Numb 蛋白在 PTC 組織中的表達陽性率為 66.00%，高于癌旁組織的 0；在 PTC 組織中，Numb 蛋白的表達與患者的頸部淋巴結轉移和 TNM 分期有關，有頸部淋巴結轉移組和Ⅲ期+Ⅳ期組患者的表達陽性率相應低于無頸部淋巴結轉移組和Ⅰ期+Ⅱ期組。該結果提示，Numb 蛋白的表達可能與 PTC 的發生和發展有關，它可能起到抑癌的作用。
目前，在 Wnt 信號通路及經典的 Notch 信號通路方面對 PTC 的研究相對較為活躍，且在其 Notch 信號通路的研究上取得了較為豐富的成果[16-21]。本研究探討了 Notch 通路中的關鍵蛋白 Notch-2 和 Numb 在 PTC 組織中的表達并分析研究了兩者的相關性，結果顯示，Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白在 PTC 組織中的表達呈正相關關系，提示兩者在 PTC 的發生和發展過程中可能存在協同關系。
綜上，在 PTC 的疾病演變過程中，經典的 Notch 細胞信號通路起到了非常重要的作用，特別是信號通路中的 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白與 PTC 的發生及發展密切相關[22-25]。是否可以以 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白作為切入點做進一步的研究，通過抑制通路中的相關致癌因子及激活相關的抑癌因子，以達到遏制 PTC 發生、發展及早期轉移的目的，為臨床預防、早期診斷及治療 PTC 提供新的途徑[25-28]，值得進一步研究。此外，PTC 發生及進展過程中，Notch 信號通路各進程（信號激活及傳遞→與下游蛋白結合→整個信號通路激活→最終蛋白表達）中具體的分子作用機制尚需進一步探索及研究。
甲狀腺癌是頭頸部最常見的惡性腫瘤之一，以女性多發，近年來甲狀腺癌的發病率呈逐年上升趨勢，嚴重威脅著人類的生命健康[1]。從病理學角度來講甲狀腺癌可分為以下 4 種類型：甲狀腺乳頭狀癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）、甲狀腺濾泡狀癌、未分化癌以及甲狀腺髓樣癌，其中 PTC 的發病率最高，多見于 30～45 歲女性，且較早發生淋巴結轉移[2]。隨著現代分子生物學的迅速發展，特別是對腫瘤基因及其表達機制的深入研究，已有研究[3]證實，經典的 Notch 信號通路在機體的細胞分化和器官發育，以及腫瘤的發生、發展、侵襲和轉移中均發揮非常重要的作用。當前，隨著對 PTC 發生發展的進一步深入探索及認識，已有研究[4]表明，Notch 信號通路是 PTC 進程的重要通路之一。然而，在 PTC 組織中，關于 Notch 信號通路中的 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白表達的報道較少。因此，本研究通過檢測 Notch 信號通路中的 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白在 PTC 組織中的表達及其與患者臨床病理學特征之間的關系，以期進一步探索兩者在 PTC 發生、發展、侵襲和轉移中的作用，為 PTC 的早期診斷、術前評估、手術治療、預后判斷及基因治療提供思路。
1 資料與方法
1.1 研究對象
回顧性收集 2014 年 3 月至 2017 年 3 月期間于內蒙古民族大學附屬醫院行手術切除的 50 例 PTC 患者的癌組織及其癌旁組織標本（以后續病理學切片判定，切緣距離癌灶以遠 1 cm），所有入選病例術前均未進行放化療，且均經術后病理組織學檢查證實為 PTC。50 例患者中，男 8 例，女 42 例；年齡 19～69 歲，平均年齡為 46.5 歲，其中<45 歲 26 例，≥45 歲 24 例。臨床分期：Ⅰ期 16 例，Ⅱ期9 例，Ⅲ期 13 例，Ⅳ期 12 例。腫瘤直徑：≤2 cm 30 例，>2 cm 20 例；存在包膜浸潤 11 例，有頸部淋巴結轉移 23 例。對于腫瘤直徑小于 1 cm 且無頸部放射史、無遠處轉移、無甲狀腺外侵犯、切緣陰性和對側淋巴結正常者行患側腺葉切除術＋患側中央區淋巴結清掃術，本組有 29 例；對腫瘤直徑≥1 cm 及有患側淋巴結轉移者行甲狀腺全切除或次全切除術+患側中央區淋巴結清掃術，本組有 13 例；對于有頸部淋巴結陽性或懷疑有頸部淋巴結轉移者（無論腫瘤直徑大小），行甲狀腺癌改良根治術，已明確對側頸部淋巴結轉移者同時行對側淋巴結清掃，本組有 8 例。
1.2 主要試劑和材料
兔抗人 Notch-2 和 Numb 多克隆抗體均購于武漢艾美捷科技有限公司，SP 免疫組織化學染色試劑盒和檸檬酸抗原修復試劑均購于北京中杉金橋生物技術有限公司，PBS 緩沖液由內蒙古民族大學附屬醫院病理科贊助提供。
1.3 免疫組織化學染色
采用免疫組織化學 SP 法檢測癌組織及其癌旁組織中 Notch-2 蛋白及 Numb 蛋白的表達。首先將標本制成 4 μm 厚的組織切片，行常規脫蠟水化；給予檸檬酸抗原修復，然后用 3% H2O2 去離子水滅活內源性過氧化物酶，在室溫下孵育 10 min 后，滴加動物非免疫血清，再在室溫下孵育 10 min；除去血清，滴加一抗，在室溫下孵育 90 min；滴加生物素標記的二抗，在室溫下孵育 30 min；以 DAB 顯色，鏡下觀察。詳細操作及抗體稀釋比例見試劑盒說明書。以 PBS 溶液代替一抗作為陰性對照，以已知的 Notch-2 蛋白及 Numb 蛋白陽性染色的 PTC 癌旁組織作為陽性對照。
Notch-2 蛋白主要表達在細胞質和細胞核內，Numb 蛋白主要表達于細胞質和細胞膜上，黃色顆粒為陽性表達[5-6]。依據半定量積分方法對陽性結果進行判定[7]。高倍光鏡下（×100）每個標本隨機選取 10 個視野，計算出陽性細胞百分比（以 10 個視野的陽性細胞數占細胞總數的比例作為該標本的陽性細胞百分比），然后據此進行評分：<10% 判定為 0 分，10%～25% 判定為 1 分，26%～50% 判定為 2 分，51%～70% 判定為 3 分，>70% 判定為 4 分。再根據細胞染色強度進行評分：無色判定為 0 分，黃色判定為 1 分，棕黃色判定為 2 分，棕褐色判定為 3 分。最后將陽性細胞百分比評分與染色強度評分相乘，得到的乘積作為綜合評分：0 分為陰性（–），1～4 分為弱陽性（+），5～8 分為中度陽性（++），大于 8 分為強陽性（+++）。陰性（–）和弱陽性（+）者判為陰性表達，中度陽性（++）和強陽性（+++）者判為陽性表達[8]。
1.4 統計學方法
采用 SPSS 19.0 統計學軟件對數據進行分析。癌組織和癌旁組織中 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白的表達陽性率比較采用配對 χ2 檢驗；癌組織中 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白表達的相關性分析采用 Spearman 秩相關分析；癌組織中 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白的表達與患者臨床病理學特征的關系分析采用成組 χ2 檢驗。檢驗水準 α=0.05。
2 結果
2.1 癌組織和癌旁組織中 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白的表達
免疫組織化學染色結果顯示：Notch-2 蛋白主要表達于細胞漿和細胞核內，Numb 蛋白主要表達于細胞質和細胞膜上，均呈黃色顆粒（圖 1）。癌組織中 Notch-2 蛋白表達陽性 41 例，表達陽性率為 82.00%；癌旁組織中 Notch-2 蛋白表達陽性 9 例，表達陽性率為 18.00%，低于癌組織，差異有統計學意義（χ2=40.960，P<0.001），見表 1。癌組織中 Numb 蛋白表達陽性 33 例，表達陽性率為 66.00%；癌旁組織中 Numb 蛋白均呈陰性表達，表達陽性率為 0，低于癌組織，差異有統計學意義（χ2=49.254，P<0.001），見表 2。
圖1
示 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白在癌組織和癌旁組織中的表達（SP ×100）
a：癌組織中 Notch-2 蛋白呈中度陽性表達；b：癌組織中 Notch-2 蛋白呈陰性表達；c：癌組織中 Numb 蛋白呈中度陽性表達；d：癌組織中 Numb 蛋白呈陰性表達；e：癌旁組織中 Notch-2 蛋白呈中度陽性表達；f：癌旁組織中 Notch-2 蛋白呈陰性表達；g：癌旁組織中 Numb 蛋白呈弱陽性表達；h：癌旁組織中 Numb 蛋白呈陰性表達
表1
癌組織和癌旁組織中 Notch-2 蛋白的表達（例）
表2
癌組織和癌旁組織中 Numb 蛋白的表達（例）
2.2 癌組織中 Notch-2 蛋白與 Numb 蛋白表達的相關性
Spearman 秩相關分析結果示，癌組織中 Notch-2 蛋白與 Numb 蛋白的表達呈正相關關系（rs=0.323，P=0.022），見表 3。
表3
癌組織中 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白表達的關系（例）
2.3 癌組織中 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白的表達與患者臨床病理學特征之間的關系
癌組織中 Notch-2 蛋白的表達與患者的性別、年齡、腫瘤直徑、包膜浸潤、頸部淋巴結轉移及 TNM 分期均無關（P>0.05）；癌組織中 Numb 蛋白的表達與患者的性別、年齡、腫瘤直徑和包膜浸潤均無關（P>0.05），而與頸部淋巴結轉移和 TNM 分期均有關，無淋巴結轉移組患者的 Numb 蛋白的表達陽性率高于發生頸部淋巴結轉移組，Ⅰ期+Ⅱ期組患者的 Numb 蛋白的表達陽性率高于Ⅲ期+Ⅳ期組。具體見表 4。
表4
癌組織中 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白的表達與患者臨床病理學特征的關系 ［例（%） ］
3 討論
在進化過程中，經典的 Notch 信號通路是高度保守的信號通路，它是介導細胞與細胞之間直接接觸的非常重要的信號通路之一，其調控了多細胞機體的細胞凋亡、增殖以及分化過程[9]。經典 Notch 信號通路的異常激活或其結構性活化與多種惡性腫瘤的發生和發展有關[10-11]。本研究觀察了經典 Notch 信號通路中 Notch-2 蛋白及其重要調節因子 Numb 蛋白在 PTC 組織中的表達情況，并分析了兩者表達與 PTC 患者臨床病理學特征之間的相關關系，以期進一步探索研究這 2 種蛋白與 PTC 生物學行為的關系。
Notch 信號通路中的 Notch-2 蛋白是此信號通路中的重要蛋白之一，它在 PTC 組織中的異常表達可能對腫瘤的發生和發展起重要的調控作用[12-13]。有多項研究[14-15]結果證明：Notch-2 蛋白與多種惡性腫瘤的發生和發展相關，并且在不同組織、甚至在相同組織的不同發展階段中，Notch-2 蛋白所起的作用也不盡相同，表現為促癌作用或抑癌作用。本研究結果顯示，PTC 組織中 Notch-2 蛋白的表達陽性率為 82.00%，高于癌旁組織。該結果提示，Notch-2 蛋白在 PTC 組織中的表達明顯上調，可能參與了 PTC 發生的早期分子事件且極可能促進了 PTC 的發生，但其在 PTC 中的具體作用機制尚未完全闡明。本研究進一步分析了 PTC 組織中 Notch-2 蛋白表達與患者臨床病理學特征之間的關系，但結果表明：Notch-2 蛋白的表達與患者的性別、年齡、腫瘤直徑、包膜浸潤、頸部淋巴結轉移及 TNM 分期均無關（P>0.05），此結果提示，Notch-2 蛋白可能參與了 PTC 的發生，但其與之后的生物學行為關系不大，有待進一步研究。
Numb 蛋白又稱細胞命運決定子，作為 Notch 信號通路中的重要調節因子，是一種與細胞內膜相連的磷酸酪氨酸結合域（PTB）包含蛋白，在生物體內 Numb 蛋白是最重要的細胞命運決定因子[16]。Numb 蛋白在人體成熟組織中廣泛分布，作為經典 Notch 信號通路中重要的調節因子，可能對 Notch 信號通路起到抑制或阻斷作用，廣泛參與分化/增殖的平衡、凋亡調控、細胞遷徙、組織再生等重要的生理過程[17-18]。本研究結果顯示，Numb 蛋白在 PTC 組織中的表達陽性率為 66.00%，高于癌旁組織的 0；在 PTC 組織中，Numb 蛋白的表達與患者的頸部淋巴結轉移和 TNM 分期有關，有頸部淋巴結轉移組和Ⅲ期+Ⅳ期組患者的表達陽性率相應低于無頸部淋巴結轉移組和Ⅰ期+Ⅱ期組。該結果提示，Numb 蛋白的表達可能與 PTC 的發生和發展有關，它可能起到抑癌的作用。
目前，在 Wnt 信號通路及經典的 Notch 信號通路方面對 PTC 的研究相對較為活躍，且在其 Notch 信號通路的研究上取得了較為豐富的成果[16-21]。本研究探討了 Notch 通路中的關鍵蛋白 Notch-2 和 Numb 在 PTC 組織中的表達并分析研究了兩者的相關性，結果顯示，Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白在 PTC 組織中的表達呈正相關關系，提示兩者在 PTC 的發生和發展過程中可能存在協同關系。
綜上，在 PTC 的疾病演變過程中，經典的 Notch 細胞信號通路起到了非常重要的作用，特別是信號通路中的 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白與 PTC 的發生及發展密切相關[22-25]。是否可以以 Notch-2 蛋白和 Numb 蛋白作為切入點做進一步的研究，通過抑制通路中的相關致癌因子及激活相關的抑癌因子，以達到遏制 PTC 發生、發展及早期轉移的目的，為臨床預防、早期診斷及治療 PTC 提供新的途徑[25-28]，值得進一步研究。此外，PTC 發生及進展過程中，Notch 信號通路各進程（信號激活及傳遞→與下游蛋白結合→整個信號通路激活→最終蛋白表達）中具體的分子作用機制尚需進一步探索及研究。
