引用本文： 馬霖杰, 陳曉, 鄒龍, 陳剛, 劉洪. 干細胞治療慢加急性肝衰竭相關基因研究進展. 中國普外基礎與臨床雜志, 2016, 23(10): 1276-1279. doi: 10.7507/1007-9424.20160327 復制
慢加急性肝衰竭（acute-on-chronic liver failure, ACLF）是在已知或尚未發現的慢性肝病基礎上，出現以黃疸和（或）凝血功能障礙為最初臨床表現的急性肝臟損害，并在發病4周內合并腹水和（或）肝性腦病，診斷標準為部分活化凝血酶原時間（PTA）≤40%或國際化標準比值（INR）≥1.5，且總膽紅素（TBIL）≥442 μmol/L。其特點為臨床病死率高，為60%～80%。其致病機理復雜，具有一定的肝臟疾病基礎，是在慢性肝病基礎上出現的急性肝功能失代償[1-2]。針對其治療手段主要有內科綜合支持治療、粒細胞集落刺激因子（G-CSF）治療、人工肝支持系統治療、肝移植等方法[3]。隨著新型治療方法的出現，近年來，干細胞成為有效的治療手段而得到越來越廣泛的應用。其中具有臨床廣泛應用的則是間充質干細胞（mesenchymal stem cell，MSC），這是一類能在體外分化、增殖、具有自我更新及多向分化潛能的低免疫原性成體干細胞，因此成為較為理想的治療來源[4-5]。ACLF的發病率不斷升高，結合干細胞治療的應用前景，那么通過一定手段來監測，則可對其治療的療效、臨床實用價值等進行評估。目前研究干細胞在治療過程中的基因差異性表達，可能成為監測療效和指導臨床治療的有效手段。現對目前研究較多的幾個相關基因總結如下。
1 mir-27b
人miR-27b定位于17號染色體上（chr17 :7 351 449～7 351 545）上，近年來研究其有促進乳腺癌細胞增殖，并證實在胃腫瘤侵襲性進展中有上調表達, 并同肝臟腫瘤的發生有一定聯系[6-8]。其主要由過氧化物酶體增殖物激活受體（PPARγ）的抑制生長及炎癥反應發揮作用。相關研究表明，干細胞治療ACLF時，隨著干細胞分化為肝細胞的推進，miR-27b表達呈下降趨勢，具體機理如下。
1.1 通過結合基質細胞衍生因子-1（SDF-1）mRNA的3’UTR來調控SDF-1蛋白的表達，影響MSC遷徙
Lü等[9]運用四氯化碳（CCl4）建立肝衰竭小鼠模型，從C57BL/6小鼠的骨髓組織分離出MSC后，再注入小鼠體內，利用ELISA法分別在注射后的1、2、3、4、7及21 d測定血清SDF-1α水平, 并在小鼠肝損傷21 d后，分離出肝組織的RNA，通過qPCR和熒光素酶報告基因檢測miRNA的表達，證實在MSC分化為肝細胞過程中mir-27b表達下調。李長珠[10]通過構建肝損傷小鼠模型，應用real-time PCR（RT-PCR）技術及雙熒光素酶實驗，證實miR-27b表達呈下調趨勢，并進一步采用Transwell穿膜實驗證實miR-27b可以通過下調SDF-1的表達減少MSCs的趨化作用。李光耀等[11]還對肝大部分切除術后肝再生過程中miR-27b與跨膜泛素樣蛋白1（Tumb1）表達相關性進行了探討，其結果顯示，肝再生過程中miR-27b表達下調，減弱了對Tmub1表達的抑制作用，從而達到調控肝細胞增殖的效果。
microRNA是一類進化保守的內源性表達的小RNA，由20.25個核苷酸組成，它廣泛存在于真核生物中，是一組不編碼蛋白質的短序列RNA，其本身不具有開放閱讀框。而成熟的microRNA可通過形成RNA誘導沉默復合物（RNA induced silencing complex，RISC），起到降解mRNA或抑制mRNA的翻譯作用，其主要與靶基因3’端非編碼區（3’UTR）結合，起著負性調控的作用[12]。MSC在肝衰竭微環境中歸巢至肝臟過程中，主要通過SDF-1/CXCR進行遷徙，而mir-27b在MSC歸巢中起到負性調控作用，其調控主要通過SDF-1上的3’UTR序列進行互補結合從而干擾SDF-1 mRNA的正常翻譯，從而影響SDF-1蛋白的表達。MSC分化為肝細胞過程中，通過下調mir-27b表達水平，起到了增強肝細胞分化作用[13-14]。
1.2 抗纖維化，修復肝損傷
肝臟纖維化為ACLF基本的病理進程。張愛民等[15]通過對185例乙型肝炎病毒相關ACLF患者血清纖維化指標進行分析，發現纖維化是ACLF重要的病理過程，其中mir-27b基因表達的下調在對抗肝臟纖維化進程中具有重要作用。Ji等[16]證實，通過下調mir-27b的表達可逆轉活化的肝星狀細胞為靜止狀態，并恢復脂肪細胞的儲存，起到了抗纖維化的作用。史曉盟等[17]在轉染干預mir-27b后，利用油紅染色與劃痕實驗檢測LX-2細胞的脂滴沉積與遷移能力，發現mir-27b表達上調后可促進脂滴儲存，并推斷mir-27b作用的靶基因可能是視黃醇X受體（RXRa），并影響人肝星狀細胞系（LX-2）遷移與脂滴沉積。以上實驗表明，mir-27b在調控肝細胞的分化及抗纖維化中起著重要的作用，在MSC分化為肝細胞的過程中，通過引發mir-27b表達的改變，起到進一步修復肝損傷的作用。
1.3 抑制T淋巴細胞增殖，緩解免疫反應所致的肝臟損傷
以乙型肝炎為基礎的ACLF肝臟損傷主要依賴于宿主的免疫反應，在HBV所致ACLF中，NK細胞、T淋巴細胞、樹突狀細胞等均參與免疫損傷過程。Chen等[18]通過大鼠脾富集CD4+ T淋巴細胞建立免疫模型，運用mir-27b阻斷劑對照，發現在脂肪來源的MSC分化為肝細胞過程中，出現mir-27b表達下調，并且證實其有抑制T淋巴細胞增殖的積極作用。其可能通過趨化因子CXCL12（又稱SDF-1）信號發揮免疫抑制作用。而MSC治療ACLF則具有抑制免疫活化作用，其在誘導分化為肝細胞過程中，下調mir-27b表達起到了協同抑制免疫、緩解肝臟損傷的作用。
mir-27b基因在干細胞治療ACLF中，存在差異性表達，具體表現為在干細胞分化為肝細胞過程中，出現mir-27b表達下調趨勢，因此臨床上可通過基因檢測技術對其定量、定性測定，以達到評估療效、指導治療的作用。
2 TRAIL
人TRAIL基因定位于3號染色體長臂2區6帶（3q26），由5個外顯子組成，編碼1.77 kb mRNA，并可編碼一種相對分子質量為32.5×103的由281個氨基酸組成的Ⅱ型跨膜蛋白，在機體中廣泛分布[19]。其編碼的TRAIL是可溶性腫瘤細胞壞死因子相關凋亡誘導配體，有5種特異性結合受體，即TRAIL R1、TRAIL R2、TRAIL R3、TRAIL R4和護骨索(OPG)，其中主要發揮凋亡作用的受體為TRAIL R1（DR4）和TRAIL R2（DR5），因其胞內區含有死亡結構域，多分布在脾、外周血淋巴細胞、小腸、胸腺、活化的T淋巴細胞及某些腫瘤細胞株，其中DR5的mRNA可分布于正常組織中[20]。楊文等[21]和張君紅等[22]，將骨髓MSC與肝星狀細胞共培養，發現MSC組的TRAIL濃度明顯高于其他組，進一步揭示了在干細胞治療肝損傷時，TRAIL水平將升高，認為MSC可能通過旁分泌誘導TRAIL上調Caspase-3和死亡受體5蛋白的表達來實現其功能的。
乙型肝炎為基礎的ACLF肝臟損傷主要依賴于宿主的免疫反應，而TRAIL與ACLF相關聯主要表現在免疫系統。早在2005年就有利用流式細胞技術及夾心酶聯免疫吸附法對乙型肝炎患者外周血CD4+及CD8+ T淋巴細胞膜TRAIL及血清可溶性TRAIL（sTRAIL）的表達水平進行研究[23-24]，其結果表明，sTRAIL升高同肝臟受損相關。其主要通過NK細胞來發揮主要介導肝損傷作用[25-26]。鄒勇[27]通過多色流式細胞技術檢測HBV-ACLF和HBV患者外周血NK細胞表面天然細胞毒受體表達情況，證實了肝臟NK細胞可能通過TRAIL/TRAIL-R途徑誘導肝細胞死亡, 這為肝臟NK細胞在HBV引起的肝細胞損傷中的作用提供了直接的證據。相似的王艷海[28]通過分析慢性乙型肝炎患者體內NK細胞的表達情況，發現NK細胞表達TRAIL比健康對照者明顯增高，從而證明高表達TRAIL的NK細胞可能與慢性乙型肝炎患者肝損傷機理相關。
那么干細胞在治療ACLF當中，TRAIL濃度升高引發肝損傷修復的主要機理是什么呢?這主要同TRAIL的性質相關，通過使TRAIL細胞膜表面的DR4及DR5三聚體化，并同死亡受體胞外的Cys區域相結合后，激活DR4和DR5中的死亡結構域（DD），進一步通過同嗜作用招募Fas相關死亡結構域（FADD），FADD含有2個相互作用的結構域蛋白（DED），通過DED結合凋亡信號起始因子胱冬酶原（pro-caspase-8)，從而形成“死亡配體-死亡受體-FADD-胱冬酶原分子”（DISC）。隨后DISC中的2個pro-caspase-8發生分子內水解后，二聚體化為胱冬酶caspase-8（FLICE），其后主要通過線粒體途徑和非線粒體途徑誘導凋亡[29]。
在干細胞治療過程中，通過調控TRAIL的表達，實現抑制免疫、抗纖維化的作用，臨床上則可通過測定TRAIL基因水平，對干細胞治療ACLF的療效進行評估，起到監測作用。
3 Tg737
Tg737基因位于人體13號染色體著絲粒附近的q12.1區，由26個外顯子構成，轉錄加工后可形成1個2.8 kb的mRNA，該mRNA編碼824個氨基酸的多肽序列，該多肽鏈中包含有10個串行排列的TPR，該基序是Tg737蛋白發揮功能的重要結構域。其主要為抑癌基因，在肝受損中有差異性表達[30-31]。
ACLF的重要病理過程是肝細胞受損，而干細胞治療ACLF過程中，Tg737基因表達是呈升高趨勢。其中國內的黨立力等[32-33]研究得較多，國外也有類似報道。運用三步分離法富集MSC，并在肝細胞生長因子（HGF）誘導MSC的不同時間點，運用PT-PCR檢測AFP、ALB、Tg737及肝細胞核因子4α（HNF4α）的mRNA表達，在HGF誘導MSC的過程中，Tg737及HNF4α的mRNA和蛋白表達均呈逐漸升高的趨勢，表明在治療過程中該基因存在差異性表達。
在干細胞治療ACLF的過程中，Tg737基因的表達逐漸增強，一方面同HNF4α相聯系，HNF4α是配體依賴的轉錄因子（NR2A1）核受體超家族和肝臟富集的轉錄因子（TF）的一個成員，其在肝臟發育和肝細胞分化過程中是必不可少的因子。通過調控HNF4α的表達，從而促進干細胞向肝細胞分化。另一方面，通過抑制經典的WnT信號通路，從而減弱細胞的激活，使細胞分化受阻。與此同時，HNF4α同Wnt/β-catenin通路又相互聯系，HNF4α通過上皮-間質轉化/間質-上皮轉化（EMT/MET）同Snail蛋白的此消彼長，從而促進肝細胞分化。在干細胞治療ACLF過程當中，可以通過監測Tg737基因，對臨床治療進行有效指導[32, 34]。
4 miR-30a、miR-1290、miR-1246、miR-542-5p、miR-424及miR-148a
王雪[35]在microRNA介導MSC向肝細胞轉分化的研究中，通過提取人臍帶MSC，建立MSC向肝細胞分化體外模型，運用microRNA基因芯片和PCR的一致性比對篩選出6個在MSC向肝細胞分化過程中線性升高的一組microRNA，表明在干細胞治療ACLF過程中，miR-30a、miR-1290、miR-1246、miR-542-5p、miR-424和miR-148a基因表達呈升高趨勢，具體機理以及臨床檢測價值有待進一步實驗證實。
5 小結
干細胞治療ACLF成為目前較為新型的治療手段，其可能成為肝衰竭患者等待肝源行肝移植的過渡橋梁，甚至成為治愈肝損傷充滿前景的治療方式。但不得不承認，其治療存在一定的臨床盲點，相關療效未能完全保證，經濟開銷的評估，治療機理需要進一步探討。但其治療過程當中引發的基因變化可能成為日后解決這些盲點的手段之一，通過部分基礎實驗已經初步證實在干細胞治療肝損傷過程當中，存在以上基因的改變。我們下一步可將這些基因運用于臨床試驗中，同時探究定量、定性分析可能，以評估療效和實用價值，這可能為ACLF乃至肝損傷的治療開辟一片新天地。
慢加急性肝衰竭（acute-on-chronic liver failure, ACLF）是在已知或尚未發現的慢性肝病基礎上，出現以黃疸和（或）凝血功能障礙為最初臨床表現的急性肝臟損害，并在發病4周內合并腹水和（或）肝性腦病，診斷標準為部分活化凝血酶原時間（PTA）≤40%或國際化標準比值（INR）≥1.5，且總膽紅素（TBIL）≥442 μmol/L。其特點為臨床病死率高，為60%～80%。其致病機理復雜，具有一定的肝臟疾病基礎，是在慢性肝病基礎上出現的急性肝功能失代償[1-2]。針對其治療手段主要有內科綜合支持治療、粒細胞集落刺激因子（G-CSF）治療、人工肝支持系統治療、肝移植等方法[3]。隨著新型治療方法的出現，近年來，干細胞成為有效的治療手段而得到越來越廣泛的應用。其中具有臨床廣泛應用的則是間充質干細胞（mesenchymal stem cell，MSC），這是一類能在體外分化、增殖、具有自我更新及多向分化潛能的低免疫原性成體干細胞，因此成為較為理想的治療來源[4-5]。ACLF的發病率不斷升高，結合干細胞治療的應用前景，那么通過一定手段來監測，則可對其治療的療效、臨床實用價值等進行評估。目前研究干細胞在治療過程中的基因差異性表達，可能成為監測療效和指導臨床治療的有效手段。現對目前研究較多的幾個相關基因總結如下。
1 mir-27b
人miR-27b定位于17號染色體上（chr17 :7 351 449～7 351 545）上，近年來研究其有促進乳腺癌細胞增殖，并證實在胃腫瘤侵襲性進展中有上調表達, 并同肝臟腫瘤的發生有一定聯系[6-8]。其主要由過氧化物酶體增殖物激活受體（PPARγ）的抑制生長及炎癥反應發揮作用。相關研究表明，干細胞治療ACLF時，隨著干細胞分化為肝細胞的推進，miR-27b表達呈下降趨勢，具體機理如下。
1.1 通過結合基質細胞衍生因子-1（SDF-1）mRNA的3’UTR來調控SDF-1蛋白的表達，影響MSC遷徙
Lü等[9]運用四氯化碳（CCl4）建立肝衰竭小鼠模型，從C57BL/6小鼠的骨髓組織分離出MSC后，再注入小鼠體內，利用ELISA法分別在注射后的1、2、3、4、7及21 d測定血清SDF-1α水平, 并在小鼠肝損傷21 d后，分離出肝組織的RNA，通過qPCR和熒光素酶報告基因檢測miRNA的表達，證實在MSC分化為肝細胞過程中mir-27b表達下調。李長珠[10]通過構建肝損傷小鼠模型，應用real-time PCR（RT-PCR）技術及雙熒光素酶實驗，證實miR-27b表達呈下調趨勢，并進一步采用Transwell穿膜實驗證實miR-27b可以通過下調SDF-1的表達減少MSCs的趨化作用。李光耀等[11]還對肝大部分切除術后肝再生過程中miR-27b與跨膜泛素樣蛋白1（Tumb1）表達相關性進行了探討，其結果顯示，肝再生過程中miR-27b表達下調，減弱了對Tmub1表達的抑制作用，從而達到調控肝細胞增殖的效果。
microRNA是一類進化保守的內源性表達的小RNA，由20.25個核苷酸組成，它廣泛存在于真核生物中，是一組不編碼蛋白質的短序列RNA，其本身不具有開放閱讀框。而成熟的microRNA可通過形成RNA誘導沉默復合物（RNA induced silencing complex，RISC），起到降解mRNA或抑制mRNA的翻譯作用，其主要與靶基因3’端非編碼區（3’UTR）結合，起著負性調控的作用[12]。MSC在肝衰竭微環境中歸巢至肝臟過程中，主要通過SDF-1/CXCR進行遷徙，而mir-27b在MSC歸巢中起到負性調控作用，其調控主要通過SDF-1上的3’UTR序列進行互補結合從而干擾SDF-1 mRNA的正常翻譯，從而影響SDF-1蛋白的表達。MSC分化為肝細胞過程中，通過下調mir-27b表達水平，起到了增強肝細胞分化作用[13-14]。
1.2 抗纖維化，修復肝損傷
肝臟纖維化為ACLF基本的病理進程。張愛民等[15]通過對185例乙型肝炎病毒相關ACLF患者血清纖維化指標進行分析，發現纖維化是ACLF重要的病理過程，其中mir-27b基因表達的下調在對抗肝臟纖維化進程中具有重要作用。Ji等[16]證實，通過下調mir-27b的表達可逆轉活化的肝星狀細胞為靜止狀態，并恢復脂肪細胞的儲存，起到了抗纖維化的作用。史曉盟等[17]在轉染干預mir-27b后，利用油紅染色與劃痕實驗檢測LX-2細胞的脂滴沉積與遷移能力，發現mir-27b表達上調后可促進脂滴儲存，并推斷mir-27b作用的靶基因可能是視黃醇X受體（RXRa），并影響人肝星狀細胞系（LX-2）遷移與脂滴沉積。以上實驗表明，mir-27b在調控肝細胞的分化及抗纖維化中起著重要的作用，在MSC分化為肝細胞的過程中，通過引發mir-27b表達的改變，起到進一步修復肝損傷的作用。
1.3 抑制T淋巴細胞增殖，緩解免疫反應所致的肝臟損傷
以乙型肝炎為基礎的ACLF肝臟損傷主要依賴于宿主的免疫反應，在HBV所致ACLF中，NK細胞、T淋巴細胞、樹突狀細胞等均參與免疫損傷過程。Chen等[18]通過大鼠脾富集CD4+ T淋巴細胞建立免疫模型，運用mir-27b阻斷劑對照，發現在脂肪來源的MSC分化為肝細胞過程中，出現mir-27b表達下調，并且證實其有抑制T淋巴細胞增殖的積極作用。其可能通過趨化因子CXCL12（又稱SDF-1）信號發揮免疫抑制作用。而MSC治療ACLF則具有抑制免疫活化作用，其在誘導分化為肝細胞過程中，下調mir-27b表達起到了協同抑制免疫、緩解肝臟損傷的作用。
mir-27b基因在干細胞治療ACLF中，存在差異性表達，具體表現為在干細胞分化為肝細胞過程中，出現mir-27b表達下調趨勢，因此臨床上可通過基因檢測技術對其定量、定性測定，以達到評估療效、指導治療的作用。
2 TRAIL
人TRAIL基因定位于3號染色體長臂2區6帶（3q26），由5個外顯子組成，編碼1.77 kb mRNA，并可編碼一種相對分子質量為32.5×103的由281個氨基酸組成的Ⅱ型跨膜蛋白，在機體中廣泛分布[19]。其編碼的TRAIL是可溶性腫瘤細胞壞死因子相關凋亡誘導配體，有5種特異性結合受體，即TRAIL R1、TRAIL R2、TRAIL R3、TRAIL R4和護骨索(OPG)，其中主要發揮凋亡作用的受體為TRAIL R1（DR4）和TRAIL R2（DR5），因其胞內區含有死亡結構域，多分布在脾、外周血淋巴細胞、小腸、胸腺、活化的T淋巴細胞及某些腫瘤細胞株，其中DR5的mRNA可分布于正常組織中[20]。楊文等[21]和張君紅等[22]，將骨髓MSC與肝星狀細胞共培養，發現MSC組的TRAIL濃度明顯高于其他組，進一步揭示了在干細胞治療肝損傷時，TRAIL水平將升高，認為MSC可能通過旁分泌誘導TRAIL上調Caspase-3和死亡受體5蛋白的表達來實現其功能的。
乙型肝炎為基礎的ACLF肝臟損傷主要依賴于宿主的免疫反應，而TRAIL與ACLF相關聯主要表現在免疫系統。早在2005年就有利用流式細胞技術及夾心酶聯免疫吸附法對乙型肝炎患者外周血CD4+及CD8+ T淋巴細胞膜TRAIL及血清可溶性TRAIL（sTRAIL）的表達水平進行研究[23-24]，其結果表明，sTRAIL升高同肝臟受損相關。其主要通過NK細胞來發揮主要介導肝損傷作用[25-26]。鄒勇[27]通過多色流式細胞技術檢測HBV-ACLF和HBV患者外周血NK細胞表面天然細胞毒受體表達情況，證實了肝臟NK細胞可能通過TRAIL/TRAIL-R途徑誘導肝細胞死亡, 這為肝臟NK細胞在HBV引起的肝細胞損傷中的作用提供了直接的證據。相似的王艷海[28]通過分析慢性乙型肝炎患者體內NK細胞的表達情況，發現NK細胞表達TRAIL比健康對照者明顯增高，從而證明高表達TRAIL的NK細胞可能與慢性乙型肝炎患者肝損傷機理相關。
那么干細胞在治療ACLF當中，TRAIL濃度升高引發肝損傷修復的主要機理是什么呢?這主要同TRAIL的性質相關，通過使TRAIL細胞膜表面的DR4及DR5三聚體化，并同死亡受體胞外的Cys區域相結合后，激活DR4和DR5中的死亡結構域（DD），進一步通過同嗜作用招募Fas相關死亡結構域（FADD），FADD含有2個相互作用的結構域蛋白（DED），通過DED結合凋亡信號起始因子胱冬酶原（pro-caspase-8)，從而形成“死亡配體-死亡受體-FADD-胱冬酶原分子”（DISC）。隨后DISC中的2個pro-caspase-8發生分子內水解后，二聚體化為胱冬酶caspase-8（FLICE），其后主要通過線粒體途徑和非線粒體途徑誘導凋亡[29]。
在干細胞治療過程中，通過調控TRAIL的表達，實現抑制免疫、抗纖維化的作用，臨床上則可通過測定TRAIL基因水平，對干細胞治療ACLF的療效進行評估，起到監測作用。
3 Tg737
Tg737基因位于人體13號染色體著絲粒附近的q12.1區，由26個外顯子構成，轉錄加工后可形成1個2.8 kb的mRNA，該mRNA編碼824個氨基酸的多肽序列，該多肽鏈中包含有10個串行排列的TPR，該基序是Tg737蛋白發揮功能的重要結構域。其主要為抑癌基因，在肝受損中有差異性表達[30-31]。
ACLF的重要病理過程是肝細胞受損，而干細胞治療ACLF過程中，Tg737基因表達是呈升高趨勢。其中國內的黨立力等[32-33]研究得較多，國外也有類似報道。運用三步分離法富集MSC，并在肝細胞生長因子（HGF）誘導MSC的不同時間點，運用PT-PCR檢測AFP、ALB、Tg737及肝細胞核因子4α（HNF4α）的mRNA表達，在HGF誘導MSC的過程中，Tg737及HNF4α的mRNA和蛋白表達均呈逐漸升高的趨勢，表明在治療過程中該基因存在差異性表達。
在干細胞治療ACLF的過程中，Tg737基因的表達逐漸增強，一方面同HNF4α相聯系，HNF4α是配體依賴的轉錄因子（NR2A1）核受體超家族和肝臟富集的轉錄因子（TF）的一個成員，其在肝臟發育和肝細胞分化過程中是必不可少的因子。通過調控HNF4α的表達，從而促進干細胞向肝細胞分化。另一方面，通過抑制經典的WnT信號通路，從而減弱細胞的激活，使細胞分化受阻。與此同時，HNF4α同Wnt/β-catenin通路又相互聯系，HNF4α通過上皮-間質轉化/間質-上皮轉化（EMT/MET）同Snail蛋白的此消彼長，從而促進肝細胞分化。在干細胞治療ACLF過程當中，可以通過監測Tg737基因，對臨床治療進行有效指導[32, 34]。
4 miR-30a、miR-1290、miR-1246、miR-542-5p、miR-424及miR-148a
王雪[35]在microRNA介導MSC向肝細胞轉分化的研究中，通過提取人臍帶MSC，建立MSC向肝細胞分化體外模型，運用microRNA基因芯片和PCR的一致性比對篩選出6個在MSC向肝細胞分化過程中線性升高的一組microRNA，表明在干細胞治療ACLF過程中，miR-30a、miR-1290、miR-1246、miR-542-5p、miR-424和miR-148a基因表達呈升高趨勢，具體機理以及臨床檢測價值有待進一步實驗證實。
5 小結
干細胞治療ACLF成為目前較為新型的治療手段，其可能成為肝衰竭患者等待肝源行肝移植的過渡橋梁，甚至成為治愈肝損傷充滿前景的治療方式。但不得不承認，其治療存在一定的臨床盲點，相關療效未能完全保證，經濟開銷的評估，治療機理需要進一步探討。但其治療過程當中引發的基因變化可能成為日后解決這些盲點的手段之一，通過部分基礎實驗已經初步證實在干細胞治療肝損傷過程當中，存在以上基因的改變。我們下一步可將這些基因運用于臨床試驗中，同時探究定量、定性分析可能，以評估療效和實用價值，這可能為ACLF乃至肝損傷的治療開辟一片新天地。