引用本文： 李文仿, 王明華, 王耕, 趙宗彬. 乳腺癌患者外周血乳腺珠蛋白檢測的臨床意義. 中國普外基礎與臨床雜志, 2015, 22(1): 91-94. doi: 10.7507/1007-9424.20150022 復制
目前乳腺癌被認為是一種全身性疾病，早期即可出現全身轉移，該觀點被全球乳腺癌專家廣泛接受[1]。乳腺癌細胞通過血行轉移，到達肝臟、腦、骨髓等重要靶器官，由微轉移癌細胞逐步發生增殖，形成具有破壞力的乳腺癌轉移灶，并可導致患者的死亡。是否發生血行轉移被認為是影響乳腺癌患者生存的重要影響因素[2-3]。組織特異性人乳腺珠蛋白（human mammary gland globin，hMAM）mRNA的表達可以判斷乳腺癌存在微轉移的可能性，并被用于乳腺癌骨髓微轉移的檢測[4]，腦脊液中hMAM陽性表達是乳腺癌腦部轉移的重要分子指標[5]；乳腺癌患者外周血中檢出hMAM被認為預后較差[6]。本研究通過檢測hMAM mRNA在乳腺癌患者外周血的表達情況，以探討外周血hMAM mRNA與乳腺癌患者的臨床病理因素之間的關系。
1 資料和方法
1.1 一般資料
本研究收集2011年6月至2012年10月期間筆者所在醫院收治的乳腺癌患者78例以及乳腺良性病變患者30例（乳腺增生癥15例，乳腺纖維腺瘤15例）作為研究對象。15例乳腺纖維腺瘤患者均為青年女性，年齡(18.3±3.2)歲（14～25歲）；15例乳腺增生癥均為女性患者，年齡（36.3±7.3）歲（28～43歲）。78例乳腺癌患者均為女性，年齡（44.5±6.3）歲（34～55歲），其中≤45歲35例，> 45歲43例；腫瘤臨床分期：Ⅰ期22例，Ⅱ期25例，Ⅲ期26例，Ⅳ期5例；淋巴結轉移0～3枚30例，4～9枚37例，> 9枚11例。本組所有乳腺癌患者均檢測了雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）及人表皮生長因子受體-2（Her-2）表達狀態，結果ER陽性32例，PR陽性33例，Her-2陽性31例。
1.2 外周血hMAM mRNA表達的檢測方法
1.2.1 標本采集
分別于手術后2～3周期后抽取患者肘靜脈外周血5 mL，加入1/8體積的檸檬酸鈉(武漢博士德生物有限公司)抗凝，采用淋巴細胞分離液(上海研謹生物有限公司，貨號：LTS1077)分離單個核細胞, 在倒置顯微鏡（德國徠卡DMI4000）下計數細胞數在5×106個，用Trizol試劑盒（百泰克生物有限公司）抽提細胞總RNA，具體操作按試劑盒說明書進行。用紫外分光光度計（德國耶拿SPEKOL1300）測定260 nm和280 nm處的吸光度值（A值），A260/A280的比值在1.8～2.0為質量合格RNA，用于后續實驗。
1.2.2 引物
hMAM引物序列均由上海生工技術服務有限公司合成[6]，外引物的上游引物為5′-GAAGT-TGCTGATGGTCCTCATGCTGGC-3′，下游引物為5′-CTCACCATACCCTGC AGTTCTGTGAGC-3′；內引物的上游引物為5′-CTCCCAGCACTGCTACGCAGGCTC-3′，下游引物為5′-CACCTCAACATTGCTCAGAGTTTCATCCG-3′。以GAPDH作為內參物，引物序列上游為5′-CCACCCATGGCAAATTCCATGGCA-3′，下游為5′-TCTAGACGGCAGGTAAGGTCCACC-3′。
1.2.3 巢式-逆轉錄-聚合酶鏈反應（Nested-RT-PCR）[6 ]
Trizol抽提細胞總RNA，第1步采用RT-PCR，采用Promega公司提供的試劑盒，反應體系如下：濃度為0.1 U/μL鳥類成髓細胞性白細胞病毒（avian myeloblastosis virus，AMV）反應緩沖液10μL，濃度為0.5 mmol/L的外上游及外下游引物各1μL，取濃度為0.2 mmol/L的dNTP 1μL，濃度為0.1 U/μL的DNA聚合酶1μL, RNA量為2μg，加去離子水至總反應體積50μL。PCR反應條件為：48℃條件下45 min逆轉錄，94℃條件下行AMV RT滅活2 min及RNA/cDNA引物變性，PCR反應條件：94℃、3 min預變性，94℃、30 s解聚模板DNA，58℃條件下1 min退火，68℃條件下1.5 min擴增模板DNA，反應共計35個循環，70℃條件下延伸7 min后結束反應。第2步反應體系如下：AMV反應緩沖液10μL，濃度為0.5 mmol/L外上游及外下游引物各1μL，0.2 mmol/L的dNTP 1μL，濃度為0.1 U/μL的DNA聚合酶1μL，反應中取第1次反應產物2μL，加無離子水至總體積50μL。PCR反應條件：94℃、3 min預變性，94℃、30 s解聚模板DNA，59℃條件下1 min退火，68℃條件下1 min擴增模板DNA，共35個循環，然后70℃條件下延伸7 min后結束反應。
1.2.4 結果觀察
對PCR擴增產物采用2%瓊脂糖凝膠電泳分離，溴化乙錠染色顯示DNA條帶，紫外線下光顯像，201 bp處出現DNA條帶時判斷為陽性結果[6]。
1.3 統計學方法
數據分析采用SPSS 17.0統計分析軟件，乳腺增生癥、乳腺纖維腺瘤及乳腺癌患者外周血hMAM mRNA表達檢測結果先行3組間的χ2檢驗，如P < 0.05，則再用χ2分割進行兩兩比較分析；乳腺癌患者外周血hMAM mRNA表達檢測結果與患者年齡、腫瘤直徑、ER、PR及HER-2表達關系的分析采用χ2檢驗或精確概率分析方法，與腫瘤分期及淋巴結轉移情況分析采用Mann-Whitney等級資料的非參數秩和檢驗方法。檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 乳腺增生癥、乳腺纖維腺瘤和乳腺癌患者外周血hMAM mRNA表達檢測結果
15例乳腺增生癥及15例乳腺纖維腺瘤患者外周血中均未檢測到hMAM mRNA表達，而在78例乳腺癌患者外周血中，共檢出hMAM mRNA陽性表達者38例（48.72%），見圖 1。乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA表達陽性率明顯高于乳腺增生癥及乳腺纖維腺瘤患者，3組間χ2檢驗結果提示其差異有統計學意義(χ2=22.549，P=0.000），而兩兩卡方分割檢驗重新確定檢驗水準α=0.0167，結果提示乳腺癌患者外周血中的hMAM mRNA表達陽性率與乳腺纖維腺瘤（χ2=12.357，P=0.000）和乳腺增生癥（χ2=12.357，P=0.000）患者比較差異仍有統計學意義。
圖1
示外周血hMAM mRNA表達的PCR產物凝膠電泳結果（巢式PCR法）。1：表達陽性乳腺癌；2：表達陰性乳腺癌；3：乳腺增生癥；4：乳腺纖維腺瘤；M：標記條帶
2.2 乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA表達與其臨床病理特征的關系
結果見表 1。由表 1可見，乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA的表達與患者年齡、腫瘤大小、病理學類型以及ER、PR和HER-2表達情況均無關（P > 0.05）；而與淋巴結轉移（Z=-2.754，P=0.006）和腫瘤的臨床分期（Z=-2.214，P=0.027）有關。
表1
乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA的表達與其臨床病理特征的關系
3 討論
乳腺癌是高度惡性的腫瘤，轉移是乳腺癌的重要特點，即使在診斷早期，也可有血液、肝、腦等臟器微轉移，是乳腺癌術后復發和轉移的重要因素[7-8]。而目前認為腋窩淋巴結轉移與否是乳腺癌患者是否需行腋窩淋巴結清掃的重要指標[9]。hMAM是第1個應用差異篩選分離到的新的乳腺組織相關基因，位于11號染色體q13上，具有兩大特點：①表達僅限于成人乳腺組織；②在乳腺癌細胞株和乳腺腫瘤中過度表達[10]。hMAM是一種應用前景良好的乳腺癌標志物，在乳腺癌的篩選、診斷、療效檢測、預后判斷、轉移檢測等方面都具有重要意義。Zhao等[11]通過RT-PCR方法檢測98例乳腺癌患者外周血hMAM，發現在68例（69.4%）患者中可檢測到hMAM，而且外周血hMAM陽性患者具有較低的無病生存率及無復發生存率。另一研究[12]發現，66例行手術后的乳腺癌患者外周血中hMAM陽性率為13.6%，但其中26例明確有轉移患者的外周血hMAM陽性率卻達到30.8%。本研究發現，乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA表達陽性率為48.72%，而乳腺纖維腺瘤及乳腺增生癥患者外周血中未檢出hMAM mRNA表達，表明外周血檢出hMAM mRNA具有一定的乳腺癌診斷特異性，與乳腺癌是否發生血性轉移有關。筆者認為，乳腺癌患者外周血hMAM表達陽性率的差異性與不同研究納入患者存在差異有一定關系，也可能與納入樣本量偏小有關。
影響乳腺癌預后的因素包括腫瘤大小、臨床分期、腋窩淋巴結轉移情況以及ER、PR和HER-2狀況[13-14]。Ferro等[15]報道，外周血中hMAM的陽性表達與乳腺癌預后較差相關。Liu等[16]的研究表明，在乳腺癌骨髓微轉移患者中可檢測出hMAM，而且hMAM陽性患者更易發生遠處轉移，伴有較差的預后。淋巴結狀態一直是乳腺癌預后的重要參數之一，Lee等[10]報道乳腺癌外周血中hMAM陽性表達與淋巴結轉移密切相關。本研究結果也表明，在乳腺癌淋巴結轉移患者中更易檢出hMAM，提示外周血中hMAM表達陽性與患者的腫瘤是否發生轉移存在一定的關系。本研究還發現，外周血hMAM的表達與患者的年齡、腫瘤大小、病理學類型以及ER、PR和HER-2狀態無明顯關系。ER及PR陽性乳腺癌細胞對以他莫西芬為基礎的內分泌治療效果較好，ER、PR和HER-2均陰性的三陰性乳腺癌對內分泌治療一般認為無效，同時對化療耐藥，是乳腺癌相對預后較差的分子生物學標志物[17-18]。Lee等[10]報道，乳腺癌外周血中hMAM表達與ER和PR有關，但本研究中乳腺癌患者外周血hMAM的表達與患者的ER及PR表達情況無關，這可能與病例選擇數量和hMAM表達檢測方法，以及ER和PR陽性判斷方法存在一定的差異有關。因此，外周血hMAM的表達與乳腺癌患者ER及PR表達的關系需要大樣本、多中心研究來進一步確定，外周血hMAM表達與乳腺癌患者內分泌治療及化療敏感性是否有明確關系也需要進一步明確。
HER-2陽性是乳腺癌預后較差的指標，HER-2陽性乳腺癌細胞增殖率較高，對多種化療藥物耐藥[19-20]。即使在早期HER-2陽性乳腺癌患者中，HER-2陽性仍是患者生存率較差的因素[21-22]。多因素分析結果表明，HER-2陽性是患者預后較差的因素，且有對內分泌治療耐藥、術后容易復發等特點[23-24]。本研究發現，HER-2陽性乳腺癌患者較陰性者hMAM mRNA表達陽性率并未明顯增高，提示外周血發生微轉移概率并未增高, 但可能與本研究樣本量較少有關，是否HER-2陽性乳腺癌患者外周血更易檢出hMAM值得進一步多中心大樣本研究。Koh等[25]研究發現，hMAM在乳腺癌組織中的表達較正常乳腺上皮的表達明顯增高，但乳腺癌細胞中過表達的hMAM卻抑制乳腺癌細胞的遷移和侵襲，表明hMAM并不一定促進乳腺癌細胞的增殖和轉移，相反，Koh的研究發現hMAM在一定程度上具有抑制乳腺癌細胞增殖的功能。因此，乳腺癌中hMAM與HER-2是否具有相互作用及具體的作用機理值得進一步探討。
總之，本研究結果表明，乳腺癌患者外周血中存在hMAM表達，外周血檢出hMAM是乳腺癌患者發生淋巴結、骨髓等臟器轉移的標志，提示有較差的預后。因此，乳腺癌患者外周血檢出hMAM可能在乳腺癌預后判斷、臨床治療效果觀察等方面具有重要的臨床價值，具體的分子作用機理需進一步研究探討。
目前乳腺癌被認為是一種全身性疾病，早期即可出現全身轉移，該觀點被全球乳腺癌專家廣泛接受[1]。乳腺癌細胞通過血行轉移，到達肝臟、腦、骨髓等重要靶器官，由微轉移癌細胞逐步發生增殖，形成具有破壞力的乳腺癌轉移灶，并可導致患者的死亡。是否發生血行轉移被認為是影響乳腺癌患者生存的重要影響因素[2-3]。組織特異性人乳腺珠蛋白（human mammary gland globin，hMAM）mRNA的表達可以判斷乳腺癌存在微轉移的可能性，并被用于乳腺癌骨髓微轉移的檢測[4]，腦脊液中hMAM陽性表達是乳腺癌腦部轉移的重要分子指標[5]；乳腺癌患者外周血中檢出hMAM被認為預后較差[6]。本研究通過檢測hMAM mRNA在乳腺癌患者外周血的表達情況，以探討外周血hMAM mRNA與乳腺癌患者的臨床病理因素之間的關系。
1 資料和方法
1.1 一般資料
本研究收集2011年6月至2012年10月期間筆者所在醫院收治的乳腺癌患者78例以及乳腺良性病變患者30例（乳腺增生癥15例，乳腺纖維腺瘤15例）作為研究對象。15例乳腺纖維腺瘤患者均為青年女性，年齡(18.3±3.2)歲（14～25歲）；15例乳腺增生癥均為女性患者，年齡（36.3±7.3）歲（28～43歲）。78例乳腺癌患者均為女性，年齡（44.5±6.3）歲（34～55歲），其中≤45歲35例，> 45歲43例；腫瘤臨床分期：Ⅰ期22例，Ⅱ期25例，Ⅲ期26例，Ⅳ期5例；淋巴結轉移0～3枚30例，4～9枚37例，> 9枚11例。本組所有乳腺癌患者均檢測了雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）及人表皮生長因子受體-2（Her-2）表達狀態，結果ER陽性32例，PR陽性33例，Her-2陽性31例。
1.2 外周血hMAM mRNA表達的檢測方法
1.2.1 標本采集
分別于手術后2～3周期后抽取患者肘靜脈外周血5 mL，加入1/8體積的檸檬酸鈉(武漢博士德生物有限公司)抗凝，采用淋巴細胞分離液(上海研謹生物有限公司，貨號：LTS1077)分離單個核細胞, 在倒置顯微鏡（德國徠卡DMI4000）下計數細胞數在5×106個，用Trizol試劑盒（百泰克生物有限公司）抽提細胞總RNA，具體操作按試劑盒說明書進行。用紫外分光光度計（德國耶拿SPEKOL1300）測定260 nm和280 nm處的吸光度值（A值），A260/A280的比值在1.8～2.0為質量合格RNA，用于后續實驗。
1.2.2 引物
hMAM引物序列均由上海生工技術服務有限公司合成[6]，外引物的上游引物為5′-GAAGT-TGCTGATGGTCCTCATGCTGGC-3′，下游引物為5′-CTCACCATACCCTGC AGTTCTGTGAGC-3′；內引物的上游引物為5′-CTCCCAGCACTGCTACGCAGGCTC-3′，下游引物為5′-CACCTCAACATTGCTCAGAGTTTCATCCG-3′。以GAPDH作為內參物，引物序列上游為5′-CCACCCATGGCAAATTCCATGGCA-3′，下游為5′-TCTAGACGGCAGGTAAGGTCCACC-3′。
1.2.3 巢式-逆轉錄-聚合酶鏈反應（Nested-RT-PCR）[6 ]
Trizol抽提細胞總RNA，第1步采用RT-PCR，采用Promega公司提供的試劑盒，反應體系如下：濃度為0.1 U/μL鳥類成髓細胞性白細胞病毒（avian myeloblastosis virus，AMV）反應緩沖液10μL，濃度為0.5 mmol/L的外上游及外下游引物各1μL，取濃度為0.2 mmol/L的dNTP 1μL，濃度為0.1 U/μL的DNA聚合酶1μL, RNA量為2μg，加去離子水至總反應體積50μL。PCR反應條件為：48℃條件下45 min逆轉錄，94℃條件下行AMV RT滅活2 min及RNA/cDNA引物變性，PCR反應條件：94℃、3 min預變性，94℃、30 s解聚模板DNA，58℃條件下1 min退火，68℃條件下1.5 min擴增模板DNA，反應共計35個循環，70℃條件下延伸7 min后結束反應。第2步反應體系如下：AMV反應緩沖液10μL，濃度為0.5 mmol/L外上游及外下游引物各1μL，0.2 mmol/L的dNTP 1μL，濃度為0.1 U/μL的DNA聚合酶1μL，反應中取第1次反應產物2μL，加無離子水至總體積50μL。PCR反應條件：94℃、3 min預變性，94℃、30 s解聚模板DNA，59℃條件下1 min退火，68℃條件下1 min擴增模板DNA，共35個循環，然后70℃條件下延伸7 min后結束反應。
1.2.4 結果觀察
對PCR擴增產物采用2%瓊脂糖凝膠電泳分離，溴化乙錠染色顯示DNA條帶，紫外線下光顯像，201 bp處出現DNA條帶時判斷為陽性結果[6]。
1.3 統計學方法
數據分析采用SPSS 17.0統計分析軟件，乳腺增生癥、乳腺纖維腺瘤及乳腺癌患者外周血hMAM mRNA表達檢測結果先行3組間的χ2檢驗，如P < 0.05，則再用χ2分割進行兩兩比較分析；乳腺癌患者外周血hMAM mRNA表達檢測結果與患者年齡、腫瘤直徑、ER、PR及HER-2表達關系的分析采用χ2檢驗或精確概率分析方法，與腫瘤分期及淋巴結轉移情況分析采用Mann-Whitney等級資料的非參數秩和檢驗方法。檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 乳腺增生癥、乳腺纖維腺瘤和乳腺癌患者外周血hMAM mRNA表達檢測結果
15例乳腺增生癥及15例乳腺纖維腺瘤患者外周血中均未檢測到hMAM mRNA表達，而在78例乳腺癌患者外周血中，共檢出hMAM mRNA陽性表達者38例（48.72%），見圖 1。乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA表達陽性率明顯高于乳腺增生癥及乳腺纖維腺瘤患者，3組間χ2檢驗結果提示其差異有統計學意義(χ2=22.549，P=0.000），而兩兩卡方分割檢驗重新確定檢驗水準α=0.0167，結果提示乳腺癌患者外周血中的hMAM mRNA表達陽性率與乳腺纖維腺瘤（χ2=12.357，P=0.000）和乳腺增生癥（χ2=12.357，P=0.000）患者比較差異仍有統計學意義。
圖1
示外周血hMAM mRNA表達的PCR產物凝膠電泳結果（巢式PCR法）。1：表達陽性乳腺癌；2：表達陰性乳腺癌；3：乳腺增生癥；4：乳腺纖維腺瘤；M：標記條帶
2.2 乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA表達與其臨床病理特征的關系
結果見表 1。由表 1可見，乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA的表達與患者年齡、腫瘤大小、病理學類型以及ER、PR和HER-2表達情況均無關（P > 0.05）；而與淋巴結轉移（Z=-2.754，P=0.006）和腫瘤的臨床分期（Z=-2.214，P=0.027）有關。
表1
乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA的表達與其臨床病理特征的關系
3 討論
乳腺癌是高度惡性的腫瘤，轉移是乳腺癌的重要特點，即使在診斷早期，也可有血液、肝、腦等臟器微轉移，是乳腺癌術后復發和轉移的重要因素[7-8]。而目前認為腋窩淋巴結轉移與否是乳腺癌患者是否需行腋窩淋巴結清掃的重要指標[9]。hMAM是第1個應用差異篩選分離到的新的乳腺組織相關基因，位于11號染色體q13上，具有兩大特點：①表達僅限于成人乳腺組織；②在乳腺癌細胞株和乳腺腫瘤中過度表達[10]。hMAM是一種應用前景良好的乳腺癌標志物，在乳腺癌的篩選、診斷、療效檢測、預后判斷、轉移檢測等方面都具有重要意義。Zhao等[11]通過RT-PCR方法檢測98例乳腺癌患者外周血hMAM，發現在68例（69.4%）患者中可檢測到hMAM，而且外周血hMAM陽性患者具有較低的無病生存率及無復發生存率。另一研究[12]發現，66例行手術后的乳腺癌患者外周血中hMAM陽性率為13.6%，但其中26例明確有轉移患者的外周血hMAM陽性率卻達到30.8%。本研究發現，乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA表達陽性率為48.72%，而乳腺纖維腺瘤及乳腺增生癥患者外周血中未檢出hMAM mRNA表達，表明外周血檢出hMAM mRNA具有一定的乳腺癌診斷特異性，與乳腺癌是否發生血性轉移有關。筆者認為，乳腺癌患者外周血hMAM表達陽性率的差異性與不同研究納入患者存在差異有一定關系，也可能與納入樣本量偏小有關。
影響乳腺癌預后的因素包括腫瘤大小、臨床分期、腋窩淋巴結轉移情況以及ER、PR和HER-2狀況[13-14]。Ferro等[15]報道，外周血中hMAM的陽性表達與乳腺癌預后較差相關。Liu等[16]的研究表明，在乳腺癌骨髓微轉移患者中可檢測出hMAM，而且hMAM陽性患者更易發生遠處轉移，伴有較差的預后。淋巴結狀態一直是乳腺癌預后的重要參數之一，Lee等[10]報道乳腺癌外周血中hMAM陽性表達與淋巴結轉移密切相關。本研究結果也表明，在乳腺癌淋巴結轉移患者中更易檢出hMAM，提示外周血中hMAM表達陽性與患者的腫瘤是否發生轉移存在一定的關系。本研究還發現，外周血hMAM的表達與患者的年齡、腫瘤大小、病理學類型以及ER、PR和HER-2狀態無明顯關系。ER及PR陽性乳腺癌細胞對以他莫西芬為基礎的內分泌治療效果較好，ER、PR和HER-2均陰性的三陰性乳腺癌對內分泌治療一般認為無效，同時對化療耐藥，是乳腺癌相對預后較差的分子生物學標志物[17-18]。Lee等[10]報道，乳腺癌外周血中hMAM表達與ER和PR有關，但本研究中乳腺癌患者外周血hMAM的表達與患者的ER及PR表達情況無關，這可能與病例選擇數量和hMAM表達檢測方法，以及ER和PR陽性判斷方法存在一定的差異有關。因此，外周血hMAM的表達與乳腺癌患者ER及PR表達的關系需要大樣本、多中心研究來進一步確定，外周血hMAM表達與乳腺癌患者內分泌治療及化療敏感性是否有明確關系也需要進一步明確。
HER-2陽性是乳腺癌預后較差的指標，HER-2陽性乳腺癌細胞增殖率較高，對多種化療藥物耐藥[19-20]。即使在早期HER-2陽性乳腺癌患者中，HER-2陽性仍是患者生存率較差的因素[21-22]。多因素分析結果表明，HER-2陽性是患者預后較差的因素，且有對內分泌治療耐藥、術后容易復發等特點[23-24]。本研究發現，HER-2陽性乳腺癌患者較陰性者hMAM mRNA表達陽性率并未明顯增高，提示外周血發生微轉移概率并未增高, 但可能與本研究樣本量較少有關，是否HER-2陽性乳腺癌患者外周血更易檢出hMAM值得進一步多中心大樣本研究。Koh等[25]研究發現，hMAM在乳腺癌組織中的表達較正常乳腺上皮的表達明顯增高，但乳腺癌細胞中過表達的hMAM卻抑制乳腺癌細胞的遷移和侵襲，表明hMAM并不一定促進乳腺癌細胞的增殖和轉移，相反，Koh的研究發現hMAM在一定程度上具有抑制乳腺癌細胞增殖的功能。因此，乳腺癌中hMAM與HER-2是否具有相互作用及具體的作用機理值得進一步探討。
總之，本研究結果表明，乳腺癌患者外周血中存在hMAM表達，外周血檢出hMAM是乳腺癌患者發生淋巴結、骨髓等臟器轉移的標志，提示有較差的預后。因此，乳腺癌患者外周血檢出hMAM可能在乳腺癌預后判斷、臨床治療效果觀察等方面具有重要的臨床價值，具體的分子作用機理需進一步研究探討。
