引用本文： 郭海, 袁楊, 覃勝, 黃建鳴, 肖波, 方強, 任光國. Podoplanin 在食管鱗狀細胞癌患者中的表達及臨床預后：回顧性隊列研究. 中國胸心血管外科臨床雜志, 2018, 25(2): 148-152. doi: 10.7507/1007-4848.201608039 復制
食管癌是最常見的惡性腫瘤之一，我國是食管癌高發地區，是我國第 4 位致死性疾病，平均每年約有 15 萬患者死亡；其中主要病理類型是鱗狀細胞癌（鱗癌），占 90% 以上，其次為腺癌[1]。食管癌患者術后 5 年生存率總體較低，僅為 20%～30%，導致食管癌術后生存率不高的主要原因是食管癌患者術后腫瘤易出現復發和遠處轉移[2]。近年，食管癌患者脈管內出現瘤栓這一病理現象對食管癌患者淋巴結轉移和預后產生影響越來越受到重視。研究顯示對于頸段和胸段食管鱗癌患者，脈管內出現瘤栓是淋巴結轉移的獨立預后因素，且脈管瘤栓陽性的食管鱗癌患者總體生存時間顯著短于脈管瘤栓陰性者；脈管內出現瘤栓這一現象目前考慮與腫瘤本身具有的侵襲性和轉移性有關[3]。Podoplanin 蛋白已被證實在介導腫瘤轉移和侵襲的過程中發揮著重要作用，Podoplanin 在淋巴管特異性同源轉錄因子 Prox1 的調節作用下促進淋巴內皮細胞分化，誘導淋巴管祖細胞從胚胎靜脈發育形成淋巴內皮細胞，為腫瘤的淋巴結轉移提供條件[4-5]。本研究通過觀察 Podoplanin 陽性表達與食管癌淋巴管瘤栓形成的關系，并分析其與腫瘤分化程度、淋巴結轉移、預后等之間的關系，以期找出影響該類患者預后的可能危險因素。
1 資料與方法
1.1 臨床資料和分組
選取 2010 年 6 月至 2012 年 6 月于我院胸外科同一手術組行手術治療的 70 例食管鱗癌患者的術后病理石蠟塊（腫瘤組），其中男 39 例、女 31 例，平均年齡 63.6 歲。另選該組患者的正常食管組織（即距腫瘤邊緣>5 cm 的食管組織）作為對照。病理分期采用 2009 年版國際抗癌聯盟（UICC）食管鱗癌 TNM 分期，Ⅰ～Ⅱ 期 41 例，Ⅲ 期 29 例。腫瘤位于食管胸上段 12 例、中段 37 例、下段 21 例。高分化 15 例，中分化 24 例，低分化 31 例。
1.2 主要試劑
兔抗人 Podoplanin 單克隆抗體、兔抗人 D2-40 單克隆抗體、0.01 M 磷酸鹽緩沖液（PBS）、枸櫞酸組織抗原修復液、抗體稀釋液、GTVisionTMⅢ 抗鼠/兔通用型免疫組化檢測試劑。
1.3 方法
1.3.1 切片準備
將選取的石蠟標本連續切片（片厚約 4 μm）。每張石蠟塊切 4 張片（Podoplanin，蘇木素-伊紅染色，D2-40，空白對照切片各一張），漂片后干燥。
1.3.2 石蠟切片脫蠟和水化
將切片依次浸沒在二甲苯 Ⅰ、二甲苯 Ⅱ 溶液中各 10～15 min，隨后再依次放入濃度 100%、95% 乙醇溶液中繼續浸泡各 2～3 min，最后在濃度 80% 乙醇溶液中浸泡 2 min 完成脫蠟和水化過程。充分沖洗切片后用蒸餾水浸泡 3～5 min，再用 PBS（0.01 M，pH 7.5±0.1）充分沖洗。
1.3.3 抗原修復
將石蠟組織片置于 92～96℃ 恒溫枸櫞酸組織抗原修復液（0.01M，pH 6.0）中浸泡 20 min，取出后用 PBS 充分沖洗。
1.3.4 沖洗
將石蠟組織切片置于濃度為 3% 的 H2O2 溶液 10～15 min，后用 PBS 充分沖洗以清除內源性過氧化物酶的活性。
1.3.5 制片
每張切片分別加 1 滴兔血清工作液并維持 15 min；再清除封閉用的兔血清，滴加 50 μl 兔抗人 Podoplanin 單克隆抗體（工作濃度為 1∶1 000，抗體稀釋液稀釋），放在 4℃ 的濕盒中過夜。
1.3.6 染色
PBS 反復沖洗后去掉 PBS，再滴加 l 滴通用型免疫組化染色劑（二抗與 DAB 染色一體試劑），DAB 顯微鏡下控制染色，染色后用清水沖洗，直至達到滿意的染色效果；蘇木素染色后清水水沖洗。
1.3.7 封片
將切片分別在 80%、95%、100% 乙醇溶液中各浸泡大約 2 min 脫水，在 60℃ 烘箱烘干 1 min；切片透明處理：二甲苯Ⅰ溶液浸泡 10 min 后，二甲苯 Ⅱ 溶液浸泡 10 min；中性樹膠封片。
1.4 結果判定
免疫組織化學結果采用半定量記分法判定，按陽性著色程度評分：0 分為無著色；1 分為淺黃色；2 分為棕色；3 分為棕褐色。再按陽性細胞所占比例評分：0 分為陰性；1 分為<10%；2 分為 11%～50%；3 分為 51% 以上，以兩者乘積判定結果：<4 分（–），4～6 分（+），6～9 分（++），9 分以上（+++）；
1.5 隨訪
對納入患者以電話隨訪為主，門診復查為補充，隨訪時間為 2012 年 9 月至 2014 年 6 月，連續 3 次未能完成電話隨訪者記為失訪（9 例），通過查閱患者門診復查病例完善隨訪資料，明確復發或進展時間，最終獲得所納入患者的全部無病生存期數據。
1.6 統計學分析
應用 IBM SPSS22.0 統計軟件包進行統計分析。計數資料采用率及構成比表示，比較采用 χ2 檢驗。計量資料比較采用 t 檢驗。生存分析采用 Kaplan-Meier 法及 log-rank 檢驗，預后危險因素采用 Cox 回歸分析。不同表達強度與預后之間的秩次分析采用 Bonferroni 法和 Spearman 檢驗。P<0.05 為差異有統計學意義。
2 結果
2.1 Podoplanin 在食管癌不同組織中的表達
Podoplanin 在腫瘤組織、脈管瘤栓陽性及淋巴結轉移陽性的病例中陽性表達率較正常食管組織、脈管內瘤栓陰性以及無淋巴結轉移者均高，差異有統計學意義（P<0.05）；見表 1。Podoplanin 在腫瘤細胞中的陽性表達與食管鱗癌患者年齡、性別、腫瘤浸潤深度（T 分期）、腫瘤分化程度不存在相關性（P>0.05）。免疫組化光鏡觀察結果見圖 1。
表1
Podoplanin在食管癌不同組織中的表達情況
圖1
Podoplanin 在不同組織中的表達（免疫組化染色，×400）
a：Podoplanin 在脈管內的陽性表達；b：Podoplanin 在腫瘤細胞中的陽性表達；c：Podoplanin 陰性表達
2.2 Podoplanin 不同表達強度與食管鱗癌患者無病生存期的關系
食管鱗癌患者 Podoplanin 表達（–）、（+）、（++）、（+++）的平均無病生存期分別為 15.2 個月、8.7 個月、8.0 個月、7.3 個月，差異有統計學意義（P<0.05）；見表 2。利用 Bonferroni 法對各組患者無病生存曲線進行兩兩比較：Podoplanin 陰性表達的食管鱗癌患者無病生存期明顯長于 Podoplanin 陽性表達的患者（P<0.01），Podoplanin 表達強度為（+）（++）（+++）三組間無病生存期差異無統計學意義（P>0.05）；見圖 2。
表2
Podoplanin不同強度與預后的關系
圖2
不同 Podoplanin 表達強度的生存曲線
2.3 影響食管鱗癌患者術后無病生存期的多因素危險因素分析
Cox 回歸分析顯示：Podoplanin 陽性表達、淋巴結轉移、分化程度低是影響食管鱗癌患者的獨立預后因素。Podoplanin 陽性表達的患者術后復發風險是 Podoplanin 陰性表達患者的 6.65 倍；淋巴結轉移陽性患者術后復發風險是淋巴結轉移陰性患者的 3.20 倍；低分化腫瘤患者術后復發風險是中分化及高分化腫瘤患者的 4.77 倍；見表 3。
表3
多因素分析預后因素
3 討論
研究顯示，食管鱗癌患者淋巴結轉移是影響預后的主要危險因素，脈管內瘤栓則是淋巴結轉移的獨立危險因素[6-7]。Podoplanin 主要表達于全身多個器官的淋巴內皮細胞的管腔內側壁，是淋巴管內皮細胞的特異性標記物[8]。Podoplanin 在多種腫瘤細胞中高表達，介導腫瘤周圍淋巴管生成，使腫瘤淋巴管密度增加，進而促進腫瘤通過淋巴結轉移[9]。Podoplanin 還可以促進腫瘤侵襲，Podoplanin 通過肌動蛋白細胞骨架重塑，使其與肌動蛋白的結合比生理狀態下更加緊密和牢固；同時 Podoplanin 還能增加相關酶活性，使腫瘤細胞的運動能力增強[10]。本研究中，Podoplanin 在脈管瘤栓陽性的食管鱗癌患者的標本中陽性表達率（77.1%）明顯高于脈管內瘤栓陰性者（48.6%）；淋巴結轉移陽性的食管鱗癌患者標本腫瘤細胞內 Podoplanin 表達陽性率（71.9%）明顯高于淋巴結轉移陰性者（23.1%），差異均有統計學意義（P<0.05）。通過 Spearman 相關性分析顯示食管鱗癌患者腫瘤細胞內 Podoplanin 陽性表達與患者脈管內出現瘤栓存在相關性。我們認為這種相關性產生的原因與 Podoplanin 通過促進腫瘤的轉移和侵襲的分子生物學機制有關。
Kato 等[11]發現 Podoplanin 還能促進血小板凝集使腫瘤細胞逃避免疫攻擊而發生血行轉移。他們將脈管瘤栓陽性的食管鱗癌患者的瘤栓進一步分為血管瘤栓和淋巴管瘤栓，旨在探究 Podoplanin 是否與腫瘤侵犯血管有關，結果顯示 Podoplanin 在淋巴管內瘤栓的陽性表達率和血管內瘤栓的陽性表達率分別為 77.1% 和 65.7%，差異無統計學意義（P>0.05）；提示 Podoplanin 在食管鱗癌的血管和淋巴管的侵襲和轉移均有關，并非只參與淋巴結途徑。這可能與 Podoplanin 介導腫瘤侵襲和轉移的機制以及 Podoplanin 在腫瘤邊緣陽性表達有關[12]。腫瘤細胞本身易形成異聚物，當腫瘤細胞侵襲到脈管刺激血管和淋巴管時，釋放促凝血物質、炎癥介質并在脈管內形成瘤栓[13]。腫瘤細胞在淋巴結轉移和（或）血管轉移過程中，易侵犯脈管[5]。作者通過 Podoplanin 在腫瘤細胞中和脈管瘤栓中的表達情況進行了分析比較：Podoplanin 在食管鱗癌腫瘤細胞中的陽性表達率為 77.1%，在脈管瘤栓中陽性表達率為 65.7%，兩者表達差異無統計學意義（P>0.05），說明 Podoplanin 在食管鱗癌腫瘤細胞中和脈管瘤栓中的表達具有一致性，提示食管鱗癌患者脈管瘤栓的出現是腫瘤細胞轉移侵襲到脈管的結果。由此可見，Podoplanin 在促進腫瘤的淋巴管生成介導淋巴節轉移的同時，在血行轉移的過程中亦起著重要作用。
Podoplanin 具有促進腫瘤發生、進展、侵襲和轉移的作用，對食管鱗癌患者術后預后可能產生不良影響。Chuang 等[7]的研究結果顯示淋巴結轉移的食管鱗癌患者 Podoplanin 的陽性率顯著高于淋巴結陰性的患者，且淋巴結轉移與腫瘤細胞中 Podoplanin 的表達存在正相關；Podoplanin 陽性表達強度越高，腫瘤分期越靠近晚期。Nakayama 等[14]研究顯示 Podoplanin 表達率高的患者腫瘤淋巴管密度明顯較高，生存率明顯低于 Podoplanin 表達率低的患者。本研究中：Podoplanin 在腫瘤細胞中陰性、（+）、（++）、（+++）表達的食管鱗癌患者平均無病生存期分別為 15.2 個月、8.7 個月、8.0 個月、7.3 個月，差異有統計學意義（P<0.05），其中 Podoplanin 陰性表達的食管鱗癌患者無病生存期明顯優于 Podoplanin 陽性表達的患者（P<0.01），而 Podoplanin 表達強度為（+）（++）（+++）三組間無病生存期差異無統計學意義（P>0.01）。Cox 回歸生存分析顯示 Podoplanin 陽性表達是影響食管鱗癌患者無病生存期的獨立危險因素。因此，Podoplanin 表達可能成為判斷食管鱗癌患者預后的重要指標。
食管癌是最常見的惡性腫瘤之一，我國是食管癌高發地區，是我國第 4 位致死性疾病，平均每年約有 15 萬患者死亡；其中主要病理類型是鱗狀細胞癌（鱗癌），占 90% 以上，其次為腺癌[1]。食管癌患者術后 5 年生存率總體較低，僅為 20%～30%，導致食管癌術后生存率不高的主要原因是食管癌患者術后腫瘤易出現復發和遠處轉移[2]。近年，食管癌患者脈管內出現瘤栓這一病理現象對食管癌患者淋巴結轉移和預后產生影響越來越受到重視。研究顯示對于頸段和胸段食管鱗癌患者，脈管內出現瘤栓是淋巴結轉移的獨立預后因素，且脈管瘤栓陽性的食管鱗癌患者總體生存時間顯著短于脈管瘤栓陰性者；脈管內出現瘤栓這一現象目前考慮與腫瘤本身具有的侵襲性和轉移性有關[3]。Podoplanin 蛋白已被證實在介導腫瘤轉移和侵襲的過程中發揮著重要作用，Podoplanin 在淋巴管特異性同源轉錄因子 Prox1 的調節作用下促進淋巴內皮細胞分化，誘導淋巴管祖細胞從胚胎靜脈發育形成淋巴內皮細胞，為腫瘤的淋巴結轉移提供條件[4-5]。本研究通過觀察 Podoplanin 陽性表達與食管癌淋巴管瘤栓形成的關系，并分析其與腫瘤分化程度、淋巴結轉移、預后等之間的關系，以期找出影響該類患者預后的可能危險因素。
1 資料與方法
1.1 臨床資料和分組
選取 2010 年 6 月至 2012 年 6 月于我院胸外科同一手術組行手術治療的 70 例食管鱗癌患者的術后病理石蠟塊（腫瘤組），其中男 39 例、女 31 例，平均年齡 63.6 歲。另選該組患者的正常食管組織（即距腫瘤邊緣>5 cm 的食管組織）作為對照。病理分期采用 2009 年版國際抗癌聯盟（UICC）食管鱗癌 TNM 分期，Ⅰ～Ⅱ 期 41 例，Ⅲ 期 29 例。腫瘤位于食管胸上段 12 例、中段 37 例、下段 21 例。高分化 15 例，中分化 24 例，低分化 31 例。
1.2 主要試劑
兔抗人 Podoplanin 單克隆抗體、兔抗人 D2-40 單克隆抗體、0.01 M 磷酸鹽緩沖液（PBS）、枸櫞酸組織抗原修復液、抗體稀釋液、GTVisionTMⅢ 抗鼠/兔通用型免疫組化檢測試劑。
1.3 方法
1.3.1 切片準備
將選取的石蠟標本連續切片（片厚約 4 μm）。每張石蠟塊切 4 張片（Podoplanin，蘇木素-伊紅染色，D2-40，空白對照切片各一張），漂片后干燥。
1.3.2 石蠟切片脫蠟和水化
將切片依次浸沒在二甲苯 Ⅰ、二甲苯 Ⅱ 溶液中各 10～15 min，隨后再依次放入濃度 100%、95% 乙醇溶液中繼續浸泡各 2～3 min，最后在濃度 80% 乙醇溶液中浸泡 2 min 完成脫蠟和水化過程。充分沖洗切片后用蒸餾水浸泡 3～5 min，再用 PBS（0.01 M，pH 7.5±0.1）充分沖洗。
1.3.3 抗原修復
將石蠟組織片置于 92～96℃ 恒溫枸櫞酸組織抗原修復液（0.01M，pH 6.0）中浸泡 20 min，取出后用 PBS 充分沖洗。
1.3.4 沖洗
將石蠟組織切片置于濃度為 3% 的 H2O2 溶液 10～15 min，后用 PBS 充分沖洗以清除內源性過氧化物酶的活性。
1.3.5 制片
每張切片分別加 1 滴兔血清工作液并維持 15 min；再清除封閉用的兔血清，滴加 50 μl 兔抗人 Podoplanin 單克隆抗體（工作濃度為 1∶1 000，抗體稀釋液稀釋），放在 4℃ 的濕盒中過夜。
1.3.6 染色
PBS 反復沖洗后去掉 PBS，再滴加 l 滴通用型免疫組化染色劑（二抗與 DAB 染色一體試劑），DAB 顯微鏡下控制染色，染色后用清水沖洗，直至達到滿意的染色效果；蘇木素染色后清水水沖洗。
1.3.7 封片
將切片分別在 80%、95%、100% 乙醇溶液中各浸泡大約 2 min 脫水，在 60℃ 烘箱烘干 1 min；切片透明處理：二甲苯Ⅰ溶液浸泡 10 min 后，二甲苯 Ⅱ 溶液浸泡 10 min；中性樹膠封片。
1.4 結果判定
免疫組織化學結果采用半定量記分法判定，按陽性著色程度評分：0 分為無著色；1 分為淺黃色；2 分為棕色；3 分為棕褐色。再按陽性細胞所占比例評分：0 分為陰性；1 分為<10%；2 分為 11%～50%；3 分為 51% 以上，以兩者乘積判定結果：<4 分（–），4～6 分（+），6～9 分（++），9 分以上（+++）；
1.5 隨訪
對納入患者以電話隨訪為主，門診復查為補充，隨訪時間為 2012 年 9 月至 2014 年 6 月，連續 3 次未能完成電話隨訪者記為失訪（9 例），通過查閱患者門診復查病例完善隨訪資料，明確復發或進展時間，最終獲得所納入患者的全部無病生存期數據。
1.6 統計學分析
應用 IBM SPSS22.0 統計軟件包進行統計分析。計數資料采用率及構成比表示，比較采用 χ2 檢驗。計量資料比較采用 t 檢驗。生存分析采用 Kaplan-Meier 法及 log-rank 檢驗，預后危險因素采用 Cox 回歸分析。不同表達強度與預后之間的秩次分析采用 Bonferroni 法和 Spearman 檢驗。P<0.05 為差異有統計學意義。
2 結果
2.1 Podoplanin 在食管癌不同組織中的表達
Podoplanin 在腫瘤組織、脈管瘤栓陽性及淋巴結轉移陽性的病例中陽性表達率較正常食管組織、脈管內瘤栓陰性以及無淋巴結轉移者均高，差異有統計學意義（P<0.05）；見表 1。Podoplanin 在腫瘤細胞中的陽性表達與食管鱗癌患者年齡、性別、腫瘤浸潤深度（T 分期）、腫瘤分化程度不存在相關性（P>0.05）。免疫組化光鏡觀察結果見圖 1。
表1
Podoplanin在食管癌不同組織中的表達情況
圖1
Podoplanin 在不同組織中的表達（免疫組化染色，×400）
a：Podoplanin 在脈管內的陽性表達；b：Podoplanin 在腫瘤細胞中的陽性表達；c：Podoplanin 陰性表達
2.2 Podoplanin 不同表達強度與食管鱗癌患者無病生存期的關系
食管鱗癌患者 Podoplanin 表達（–）、（+）、（++）、（+++）的平均無病生存期分別為 15.2 個月、8.7 個月、8.0 個月、7.3 個月，差異有統計學意義（P<0.05）；見表 2。利用 Bonferroni 法對各組患者無病生存曲線進行兩兩比較：Podoplanin 陰性表達的食管鱗癌患者無病生存期明顯長于 Podoplanin 陽性表達的患者（P<0.01），Podoplanin 表達強度為（+）（++）（+++）三組間無病生存期差異無統計學意義（P>0.05）；見圖 2。
表2
Podoplanin不同強度與預后的關系
圖2
不同 Podoplanin 表達強度的生存曲線
2.3 影響食管鱗癌患者術后無病生存期的多因素危險因素分析
Cox 回歸分析顯示：Podoplanin 陽性表達、淋巴結轉移、分化程度低是影響食管鱗癌患者的獨立預后因素。Podoplanin 陽性表達的患者術后復發風險是 Podoplanin 陰性表達患者的 6.65 倍；淋巴結轉移陽性患者術后復發風險是淋巴結轉移陰性患者的 3.20 倍；低分化腫瘤患者術后復發風險是中分化及高分化腫瘤患者的 4.77 倍；見表 3。
表3
多因素分析預后因素
3 討論
研究顯示，食管鱗癌患者淋巴結轉移是影響預后的主要危險因素，脈管內瘤栓則是淋巴結轉移的獨立危險因素[6-7]。Podoplanin 主要表達于全身多個器官的淋巴內皮細胞的管腔內側壁，是淋巴管內皮細胞的特異性標記物[8]。Podoplanin 在多種腫瘤細胞中高表達，介導腫瘤周圍淋巴管生成，使腫瘤淋巴管密度增加，進而促進腫瘤通過淋巴結轉移[9]。Podoplanin 還可以促進腫瘤侵襲，Podoplanin 通過肌動蛋白細胞骨架重塑，使其與肌動蛋白的結合比生理狀態下更加緊密和牢固；同時 Podoplanin 還能增加相關酶活性，使腫瘤細胞的運動能力增強[10]。本研究中，Podoplanin 在脈管瘤栓陽性的食管鱗癌患者的標本中陽性表達率（77.1%）明顯高于脈管內瘤栓陰性者（48.6%）；淋巴結轉移陽性的食管鱗癌患者標本腫瘤細胞內 Podoplanin 表達陽性率（71.9%）明顯高于淋巴結轉移陰性者（23.1%），差異均有統計學意義（P<0.05）。通過 Spearman 相關性分析顯示食管鱗癌患者腫瘤細胞內 Podoplanin 陽性表達與患者脈管內出現瘤栓存在相關性。我們認為這種相關性產生的原因與 Podoplanin 通過促進腫瘤的轉移和侵襲的分子生物學機制有關。
Kato 等[11]發現 Podoplanin 還能促進血小板凝集使腫瘤細胞逃避免疫攻擊而發生血行轉移。他們將脈管瘤栓陽性的食管鱗癌患者的瘤栓進一步分為血管瘤栓和淋巴管瘤栓，旨在探究 Podoplanin 是否與腫瘤侵犯血管有關，結果顯示 Podoplanin 在淋巴管內瘤栓的陽性表達率和血管內瘤栓的陽性表達率分別為 77.1% 和 65.7%，差異無統計學意義（P>0.05）；提示 Podoplanin 在食管鱗癌的血管和淋巴管的侵襲和轉移均有關，并非只參與淋巴結途徑。這可能與 Podoplanin 介導腫瘤侵襲和轉移的機制以及 Podoplanin 在腫瘤邊緣陽性表達有關[12]。腫瘤細胞本身易形成異聚物，當腫瘤細胞侵襲到脈管刺激血管和淋巴管時，釋放促凝血物質、炎癥介質并在脈管內形成瘤栓[13]。腫瘤細胞在淋巴結轉移和（或）血管轉移過程中，易侵犯脈管[5]。作者通過 Podoplanin 在腫瘤細胞中和脈管瘤栓中的表達情況進行了分析比較：Podoplanin 在食管鱗癌腫瘤細胞中的陽性表達率為 77.1%，在脈管瘤栓中陽性表達率為 65.7%，兩者表達差異無統計學意義（P>0.05），說明 Podoplanin 在食管鱗癌腫瘤細胞中和脈管瘤栓中的表達具有一致性，提示食管鱗癌患者脈管瘤栓的出現是腫瘤細胞轉移侵襲到脈管的結果。由此可見，Podoplanin 在促進腫瘤的淋巴管生成介導淋巴節轉移的同時，在血行轉移的過程中亦起著重要作用。
Podoplanin 具有促進腫瘤發生、進展、侵襲和轉移的作用，對食管鱗癌患者術后預后可能產生不良影響。Chuang 等[7]的研究結果顯示淋巴結轉移的食管鱗癌患者 Podoplanin 的陽性率顯著高于淋巴結陰性的患者，且淋巴結轉移與腫瘤細胞中 Podoplanin 的表達存在正相關；Podoplanin 陽性表達強度越高，腫瘤分期越靠近晚期。Nakayama 等[14]研究顯示 Podoplanin 表達率高的患者腫瘤淋巴管密度明顯較高，生存率明顯低于 Podoplanin 表達率低的患者。本研究中：Podoplanin 在腫瘤細胞中陰性、（+）、（++）、（+++）表達的食管鱗癌患者平均無病生存期分別為 15.2 個月、8.7 個月、8.0 個月、7.3 個月，差異有統計學意義（P<0.05），其中 Podoplanin 陰性表達的食管鱗癌患者無病生存期明顯優于 Podoplanin 陽性表達的患者（P<0.01），而 Podoplanin 表達強度為（+）（++）（+++）三組間無病生存期差異無統計學意義（P>0.01）。Cox 回歸生存分析顯示 Podoplanin 陽性表達是影響食管鱗癌患者無病生存期的獨立危險因素。因此，Podoplanin 表達可能成為判斷食管鱗癌患者預后的重要指標。
