淋巴轉移是食管癌轉移擴散的主要渠道之一，是影響食管癌患者預后最關鍵的因素之一。局部化療相較于全身給藥，對正常組織的毒性作用、系統性的副作用影響更小。納米炭是目前術中淋巴化療最常用安全有效的載體。在許多腫瘤淋巴化療中，納米炭起到很好的示蹤和靶向作用。淋巴化療應用于腫瘤的治療之中，可誘導腫瘤變性壞死、促進腫瘤凋亡。在食管癌治療中，活性炭靶向淋巴化療可提高淋巴清掃數目及轉移檢出率，減小腫瘤體積，提高患者的生存質量和生存率。淋巴化療可以作為一種輔助治療，殺傷在淋巴結中的腫瘤細胞及微轉移癌灶。本文就食管癌轉移特點、納米炭載體淋巴化療的意義、機制以及臨床應用予以討論。
引用本文： 蔡杰, 倪彭智, 王文憑, 鄭希, 陳龍奇. 淋巴化療在食管癌治療中的應用現狀. 中國胸心血管外科臨床雜志, 2017, 24(8): 635-639. doi: 10.7507/1007-4848.201605002 復制
食管癌是一種起源于食管黏膜上皮的惡性腫瘤，主要可分為鱗癌和腺癌[1]。食管癌被認為是最難治愈的惡性腫瘤之一，其發病率有顯著的地區差異，我國是食管癌最高發的國家之一[2]。全世界每年新發 45 萬多例食管癌患者，約有 40 多萬患者死亡[2]。食管癌切除術被認為是沒有遠處轉移及鄰近器官侵犯最適合的治療方法。但預后較差，輔以放化療仍不能有效提高生存率。其中，淋巴結轉移是術后復發及導致死亡的重要原因之一[3]。無淋巴結轉移患者生存率較高，5 年生存率可超過 70%[4]；若病理發現淋巴結有轉移，患者生存率則比較差，約為 18%～47%[3]。化療是術后治療淋巴結轉移的常用方法，但由于化療藥物全身均勻分布，靶器官藥物濃度不高，同時給正常組織帶來組織毒性[5]。局部給予化療藥物，可以局部增加濃度，但容易流向正常組織及血漿。隨著技術的發展，利用一些小直徑載體吸附化療藥物在腫瘤局部注射，靶向淋巴結治療。納米技術的發展，將活性炭制成總共直徑約 150 nm 的微粒，可以靶向抵達淋巴系統[6-8]。
1 食管癌的轉移特點
1.1 食管癌淋巴解剖特點及轉移特點
食管的淋巴管密集不間斷分布在黏膜下層、固有肌層及固有層之間，同時相互交通；食管的上三分之一部分主要引流到支氣管旁淋巴結及鎖骨下淋巴結，中間部分則主要引流到縱隔淋巴結，下三分之一則主要引流到肝臟胃之間淋巴結或者腹腔干淋巴結[8]。淋巴液可上下流動，當腫瘤發生轉移時，可能轉移到頸部和腹部。淋巴結轉移是食管癌復發和轉移的主要原因之一[3]。食管癌可以早期即發生轉移，一些研究發現，即使是 T1 期都有大量的患者術后病理證實淋巴結轉移，尤其是鱗癌，有淋巴結轉移的患者生存率比沒有轉移的患者生存率低 30%[9]。同時在一些病理切片中發現，經過特殊染色，可以發現約 10%～30% 的患者有微轉移[10-13]。微轉移對食管癌預后的影響存在爭議。一些專家認為微轉移對患者預后無影響，不影響患者遠期生存[14-17]。但許多人提出不同觀點，認為出現微轉移的患者，預后出現復發轉移的概率大大提高[12, 18]，建議將淋巴結微轉移定義為 N1 期。同時，醫源性因素可能也是術后出現復發轉移的因素之一。手術中，游離腫瘤及淋巴結時，不可避免需要擠壓牽連，可能導致癌細胞外漏，造成轉移。以及由于癌細胞的跳躍性轉移等因素，可能導致癌灶殘留，未能在術中徹底清掃。
1.2 食管癌術后復發轉移模式
過去十幾年來，圍手術期死亡率大大降低，但術后長期生存率卻增長緩慢[18-19]。復發是術后死亡的主要原因[20-21]，一旦出現復發輔助治療則療效不明顯[20]。研究表明術后的復發率高達 34%～79%[22-23]，食管癌復發后患者的平均生存時間只有 10～14 個月[24]。淋巴結轉移是術后局部復發及導致死亡的主要原因之一。有研究指出淋巴結清掃部位的淋巴結復發是局部復發最主要的原因[19, 25-26]。Chen 等[22]發現 54% 的患者因為淋巴結復發和轉移而死亡。 Mariette 等[27]回顧性分析了 264 例食管癌的臨床資料，有 230 例患者因為出現食管癌相關的復發轉移，有 206 例死亡，其中有 24 例生存，有接近 50% 的患者因為淋巴結轉移或者局部復發而死亡，遠處轉移及局部轉移各占 50%，局部轉移包括局部腫瘤復發，吻合口復發及淋巴轉移。有研究發現淋巴結數目陽性數目越多患者預后越差，也有研究認為即使是 NO 的患者仍有大量患者死于復發，尤其是局部復發[28]。擴大淋巴結清掃及徹底的食管根治術可以提高患者的生存率[4]。Nakagawa 等[24]在三野淋巴結清掃、徹底的淋巴結清掃中，仍有 43% 的患者死于術后復發，死亡病例中有 40% 的患者死于局部復發。縱隔淋巴清掃可以控制局部復發，但不能顯著提高預后，有人甚至認為，如果有縱隔淋巴結轉移，應該圍手術期即開始化療[29]。
2 淋巴化療的意義
人們總是在尋找不同的方法來提高藥物的有效利用，通過皮下注射、肌肉注射或者腹膜注射。有效的抗癌化療需要有選擇性地在腫瘤組織中的長期作用。當一種抗癌劑在水溶液中注射到靜脈時，它不僅分布于癌組織，而且還分布于整個組織當中[30]。因此，抗癌藥物在實體腫瘤化療時不總是有效的。此外，全身給藥有時會帶來對正常組織的毒性作用，并導致系統性的副作用。克服這些問題的方法之一是局部注射抗癌藥物。然而，在局部注射的水溶性抗癌藥物，容易地從靶向擴散到其他“正常”組織和血漿中的血漿。抗癌藥物的濃度在靶部位的抗癌劑持續較短時間。一些載體的研究出現，增加了藥物的給藥方式。這些載體如納米炭、脂質體可以持續在局部靶組織存在，并可長時間釋放吸附的化療藥物。目前活性炭是術中及局部淋巴化療使用最多的載體之一。
2.1 納米炭的特點及淋巴化療的機制
活性炭具有相當大的比表面積，較好的吸附緩釋作用，對多種化療藥物都有良好的吸附作用。腫瘤藥物吸附在活性炭顆粒上的，在自由狀態下的濃度是動態平衡。當在自由狀態下周圍藥物的濃度降低，活性炭顆粒可釋放的藥物并和周圍保持動態平衡。因此，活性炭在固定的濃度范圍內可以緩慢釋放吸附的抗癌劑[31]。在董怡民等[32]的試驗中，發現活性炭對氟尿嘧啶有較好的吸附作用，并呈指數關系，對于納米炭的累積釋放可長達十幾個小時。在曲秋蓮等[33]的試驗中，發現活性炭吸附絲裂霉素在解吸附試驗中，在最開始 2 h 內釋放速率比較快，后逐漸減慢，釋放 12 h 后，仍可吸附 40% 左右。張李等[34]發現納米炭吸附絲裂霉素可以在網膜和腹腔液中，持續 24 h 以上，同時在血液中的濃度較小。對于其他抗癌藥物，也有大量的研究，認為活性對抗癌藥物具有良好的吸附緩釋作用[35-38]。
納米活性炭是將活性炭經過納米科技打磨之后，成為一種直徑為納米級的微粒，大于毛細血管的細胞間隙，但小于毛細淋巴管的細胞間隙。人體的淋巴系統有吞噬大分子物質的特點。在淋巴豐富的部位注射納米炭粒后，可以通過淋巴管，再轉移沉積到淋巴結中。因此，納米炭粒最開始作為一種較好的淋巴染色劑使用。Hagiwara 等[39]在胃癌手術患者中，發現與印度墨相比，納米炭有具有更好的效果，有 76% 的淋巴結黑染。Yokota 等[40]用納米炭在乳腺癌切除術可以隨著淋巴結引流到區域淋巴結中，可以提高乳腺癌淋巴結的清掃率，提供更精確的分期。Okamoto 等[41]在胃癌手術中，使用納米炭可以提高患者轉移淋巴結的清掃率。曹建偉等研究中發現食管癌術中使用納米炭可以提高總的淋巴結清掃數目。Kitamura 等[42]在腹腔鏡直腸癌切除術中，用納米炭可以清晰地勾勒出腫瘤的形態，可以更精確地進行手術。李紅強等[43]研究中發現使用納米炭作為示蹤劑在甲狀腺癌切除術中應用，可以保護甲狀旁腺及其血供，并可以提高淋巴結清掃數目，減少并發癥的發生。蒲敏等[44]回顧性研究在腔鏡下注射納米炭后全胃或者胃大部切除術中，沒有提高術中出血量及延長手術時間及住院時間的情況下，提高了淋巴結清掃及轉移淋巴結的檢出率。大量的研究表明，活性炭作為一種示蹤劑可以大大提高淋巴結的清掃率，及轉移淋巴結的檢出率。
2.2 淋巴化療在腫瘤中的臨床應用
目前，淋巴化療廣泛應用于腫瘤的治療之中。從上世紀 70 年代開始，活性炭微粒吸附絲裂霉素制成抗癌劑后，各種抗癌劑逐漸產生，并廣泛用于臨床。李偉等[45]在乳腺癌中，使用納米炭吸附多西紫杉醇在術中局部注射，發現納米炭組在淋巴結藥物濃度明顯高于對照組，同時具有更高的細胞凋亡率。Kin 等[46]在不可切除的結腸癌患者中，用內鏡給予淋巴化療，使部分患者的腫瘤減小，同時副作用較小。Hagiwara 等[47]用納米炭吸附化療藥物治療有腹膜轉移的患者比未使用的患者有更高的生存率。黃斌等[48]使用納米碳吸附氟尿嘧啶對胃癌靶向化療，可以降低 bcl-2 表達，誘導腫瘤細胞凋亡。Chen 等[49]在乳腺癌的切除中，納米炭吸附表阿霉素在局部淋巴結的濃度高于靜脈化療。Hagiwara 等[50]在胃癌術前內鏡下注射納米炭吸附化療藥物，術后病理發現轉移癌灶中出現了變性和壞死。Guo 等[51]在胰腺癌切除術中，用納米炭吸附吉西他濱明顯比對照組濃度高，且持續時間長。在國內外還有大量的臨床試驗中，取得了較好的療效，提高了患者的生存率。
2.3 淋巴化療在食管癌中的應用
Shimada 等[52]用活性炭吸附博來霉素與博來霉素水溶液在犬類的食管注射，發現頸部腹部淋巴結中都查見了藥物，從而認為活性炭吸附博來霉素是可以靶向治療食管癌。Hirao 等[53]在犬類食管上注射 PEP-CH 和 PEP 注射劑，內鏡注入犬食管壁被優先保留超過 7 d 逐漸交付在一個更高的選擇性水平 83% 的區域節點，近端和遠端，為超過 7 d，全身 PEP 的水平要低得多。Oyama 等[54]在 10 例不能手術的食管癌患者中，給予培洛霉素-納米炭淋巴化療，有 5 例患者完成了治療，有 2 例患者生存時間超過 1 年。Natsugoe 等[55]研究了 10 例術前 2 d 內鏡下將納米炭攜帶博萊霉素注射到腫瘤及正常黏膜下的病例，發現胸部縱隔及頸部、腹部都有黑染的淋巴結，并可以探測到博來霉素；并且在病理研究中，發現 6 例患者的 23 枚淋巴結都有不同程度的退性改變或者炎性病變。Hagiwara 等[56]在動物實驗中將培洛霉素-納米炭混懸液及培洛霉素水溶液注射到大鼠身上，可發現前者在局部淋巴結濃度明顯高于后者；在 6 例未手術的食管癌中，通過內鏡下注射培洛霉素-納米炭進行淋巴化療，術后有 5 例患者存活約 27 個月以上，明顯延長了患者的生存時間。Kitamura 等[57]內鏡下注射納米炭攜帶博來霉素于腫瘤或癌旁正常食管組織，使腫瘤明顯縮小，使患者在術前均可以進食。Domitsu 在狗的模型上，比較納米炭-順鉑混懸液及順鉑-水溶液到胸腔縱隔中，發現順鉑水劑型血漿及淋巴結濃度迅速上升，但混懸劑型則上升緩慢，并且在淋巴結的濃度明顯高于水劑型。許天文等[58]隨機對照試驗中，注射順鉑-納米炭混懸注射液組比對照組，淋巴結清掃數目及轉移檢出率高，3 年生存時間長。Ortner 等[59]通過前瞻性研究，納入 10 例Ⅳ期食管癌患者，在內鏡下注射納米炭吸附絲裂霉素，發現患者吞咽困難明顯減輕、腫瘤體積明顯減小，生存時間比使用支架的患者明顯延長，表明這種治療方法可以提高食管癌患者生存質量。
綜上所述，國內外研究表明淋巴化療已經在多種腫瘤中應用取得較好療效。可以在術前經內鏡下給藥后，再行手術。也可以直接在手術中應用，一方面作為淋巴示蹤劑，對淋巴結進行顯影，提高區域淋巴結及轉移淋巴結的清掃。研究表明血液轉移及局部復發也是腫瘤轉移的主要方式之一[20, 22]。術中淋巴化療可以殺傷淋巴清掃未能清掃到的淋巴結微轉移癌灶，但不能替代靜脈化療及放療。尤其是腫瘤可能出現遠處轉移，術后需要輔助化療以及局部浸潤較深的腫瘤需要放療。淋巴化療可以作為一種輔助治療，殺傷在淋巴結中的腫瘤細胞及微轉移癌灶。目前，已有新的研究認為單壁納米炭管可以更好地攜帶化療藥物進行淋巴化療[60]。未來可能會出現更多更高效的載體及抗癌藥物，來為患者帶來更好的治療[61]。
食管癌是一種起源于食管黏膜上皮的惡性腫瘤，主要可分為鱗癌和腺癌[1]。食管癌被認為是最難治愈的惡性腫瘤之一，其發病率有顯著的地區差異，我國是食管癌最高發的國家之一[2]。全世界每年新發 45 萬多例食管癌患者，約有 40 多萬患者死亡[2]。食管癌切除術被認為是沒有遠處轉移及鄰近器官侵犯最適合的治療方法。但預后較差，輔以放化療仍不能有效提高生存率。其中，淋巴結轉移是術后復發及導致死亡的重要原因之一[3]。無淋巴結轉移患者生存率較高，5 年生存率可超過 70%[4]；若病理發現淋巴結有轉移，患者生存率則比較差，約為 18%～47%[3]。化療是術后治療淋巴結轉移的常用方法，但由于化療藥物全身均勻分布，靶器官藥物濃度不高，同時給正常組織帶來組織毒性[5]。局部給予化療藥物，可以局部增加濃度，但容易流向正常組織及血漿。隨著技術的發展，利用一些小直徑載體吸附化療藥物在腫瘤局部注射，靶向淋巴結治療。納米技術的發展，將活性炭制成總共直徑約 150 nm 的微粒，可以靶向抵達淋巴系統[6-8]。
1 食管癌的轉移特點
1.1 食管癌淋巴解剖特點及轉移特點
食管的淋巴管密集不間斷分布在黏膜下層、固有肌層及固有層之間，同時相互交通；食管的上三分之一部分主要引流到支氣管旁淋巴結及鎖骨下淋巴結，中間部分則主要引流到縱隔淋巴結，下三分之一則主要引流到肝臟胃之間淋巴結或者腹腔干淋巴結[8]。淋巴液可上下流動，當腫瘤發生轉移時，可能轉移到頸部和腹部。淋巴結轉移是食管癌復發和轉移的主要原因之一[3]。食管癌可以早期即發生轉移，一些研究發現，即使是 T1 期都有大量的患者術后病理證實淋巴結轉移，尤其是鱗癌，有淋巴結轉移的患者生存率比沒有轉移的患者生存率低 30%[9]。同時在一些病理切片中發現，經過特殊染色，可以發現約 10%～30% 的患者有微轉移[10-13]。微轉移對食管癌預后的影響存在爭議。一些專家認為微轉移對患者預后無影響，不影響患者遠期生存[14-17]。但許多人提出不同觀點，認為出現微轉移的患者，預后出現復發轉移的概率大大提高[12, 18]，建議將淋巴結微轉移定義為 N1 期。同時，醫源性因素可能也是術后出現復發轉移的因素之一。手術中，游離腫瘤及淋巴結時，不可避免需要擠壓牽連，可能導致癌細胞外漏，造成轉移。以及由于癌細胞的跳躍性轉移等因素，可能導致癌灶殘留，未能在術中徹底清掃。
1.2 食管癌術后復發轉移模式
過去十幾年來，圍手術期死亡率大大降低，但術后長期生存率卻增長緩慢[18-19]。復發是術后死亡的主要原因[20-21]，一旦出現復發輔助治療則療效不明顯[20]。研究表明術后的復發率高達 34%～79%[22-23]，食管癌復發后患者的平均生存時間只有 10～14 個月[24]。淋巴結轉移是術后局部復發及導致死亡的主要原因之一。有研究指出淋巴結清掃部位的淋巴結復發是局部復發最主要的原因[19, 25-26]。Chen 等[22]發現 54% 的患者因為淋巴結復發和轉移而死亡。 Mariette 等[27]回顧性分析了 264 例食管癌的臨床資料，有 230 例患者因為出現食管癌相關的復發轉移，有 206 例死亡，其中有 24 例生存，有接近 50% 的患者因為淋巴結轉移或者局部復發而死亡，遠處轉移及局部轉移各占 50%，局部轉移包括局部腫瘤復發，吻合口復發及淋巴轉移。有研究發現淋巴結數目陽性數目越多患者預后越差，也有研究認為即使是 NO 的患者仍有大量患者死于復發，尤其是局部復發[28]。擴大淋巴結清掃及徹底的食管根治術可以提高患者的生存率[4]。Nakagawa 等[24]在三野淋巴結清掃、徹底的淋巴結清掃中，仍有 43% 的患者死于術后復發，死亡病例中有 40% 的患者死于局部復發。縱隔淋巴清掃可以控制局部復發，但不能顯著提高預后，有人甚至認為，如果有縱隔淋巴結轉移，應該圍手術期即開始化療[29]。
2 淋巴化療的意義
人們總是在尋找不同的方法來提高藥物的有效利用，通過皮下注射、肌肉注射或者腹膜注射。有效的抗癌化療需要有選擇性地在腫瘤組織中的長期作用。當一種抗癌劑在水溶液中注射到靜脈時，它不僅分布于癌組織，而且還分布于整個組織當中[30]。因此，抗癌藥物在實體腫瘤化療時不總是有效的。此外，全身給藥有時會帶來對正常組織的毒性作用，并導致系統性的副作用。克服這些問題的方法之一是局部注射抗癌藥物。然而，在局部注射的水溶性抗癌藥物，容易地從靶向擴散到其他“正常”組織和血漿中的血漿。抗癌藥物的濃度在靶部位的抗癌劑持續較短時間。一些載體的研究出現，增加了藥物的給藥方式。這些載體如納米炭、脂質體可以持續在局部靶組織存在，并可長時間釋放吸附的化療藥物。目前活性炭是術中及局部淋巴化療使用最多的載體之一。
2.1 納米炭的特點及淋巴化療的機制
活性炭具有相當大的比表面積，較好的吸附緩釋作用，對多種化療藥物都有良好的吸附作用。腫瘤藥物吸附在活性炭顆粒上的，在自由狀態下的濃度是動態平衡。當在自由狀態下周圍藥物的濃度降低，活性炭顆粒可釋放的藥物并和周圍保持動態平衡。因此，活性炭在固定的濃度范圍內可以緩慢釋放吸附的抗癌劑[31]。在董怡民等[32]的試驗中，發現活性炭對氟尿嘧啶有較好的吸附作用，并呈指數關系，對于納米炭的累積釋放可長達十幾個小時。在曲秋蓮等[33]的試驗中，發現活性炭吸附絲裂霉素在解吸附試驗中，在最開始 2 h 內釋放速率比較快，后逐漸減慢，釋放 12 h 后，仍可吸附 40% 左右。張李等[34]發現納米炭吸附絲裂霉素可以在網膜和腹腔液中，持續 24 h 以上，同時在血液中的濃度較小。對于其他抗癌藥物，也有大量的研究，認為活性對抗癌藥物具有良好的吸附緩釋作用[35-38]。
納米活性炭是將活性炭經過納米科技打磨之后，成為一種直徑為納米級的微粒，大于毛細血管的細胞間隙，但小于毛細淋巴管的細胞間隙。人體的淋巴系統有吞噬大分子物質的特點。在淋巴豐富的部位注射納米炭粒后，可以通過淋巴管，再轉移沉積到淋巴結中。因此，納米炭粒最開始作為一種較好的淋巴染色劑使用。Hagiwara 等[39]在胃癌手術患者中，發現與印度墨相比，納米炭有具有更好的效果，有 76% 的淋巴結黑染。Yokota 等[40]用納米炭在乳腺癌切除術可以隨著淋巴結引流到區域淋巴結中，可以提高乳腺癌淋巴結的清掃率，提供更精確的分期。Okamoto 等[41]在胃癌手術中，使用納米炭可以提高患者轉移淋巴結的清掃率。曹建偉等研究中發現食管癌術中使用納米炭可以提高總的淋巴結清掃數目。Kitamura 等[42]在腹腔鏡直腸癌切除術中，用納米炭可以清晰地勾勒出腫瘤的形態，可以更精確地進行手術。李紅強等[43]研究中發現使用納米炭作為示蹤劑在甲狀腺癌切除術中應用，可以保護甲狀旁腺及其血供，并可以提高淋巴結清掃數目，減少并發癥的發生。蒲敏等[44]回顧性研究在腔鏡下注射納米炭后全胃或者胃大部切除術中，沒有提高術中出血量及延長手術時間及住院時間的情況下，提高了淋巴結清掃及轉移淋巴結的檢出率。大量的研究表明，活性炭作為一種示蹤劑可以大大提高淋巴結的清掃率，及轉移淋巴結的檢出率。
2.2 淋巴化療在腫瘤中的臨床應用
目前，淋巴化療廣泛應用于腫瘤的治療之中。從上世紀 70 年代開始，活性炭微粒吸附絲裂霉素制成抗癌劑后，各種抗癌劑逐漸產生，并廣泛用于臨床。李偉等[45]在乳腺癌中，使用納米炭吸附多西紫杉醇在術中局部注射，發現納米炭組在淋巴結藥物濃度明顯高于對照組，同時具有更高的細胞凋亡率。Kin 等[46]在不可切除的結腸癌患者中，用內鏡給予淋巴化療，使部分患者的腫瘤減小，同時副作用較小。Hagiwara 等[47]用納米炭吸附化療藥物治療有腹膜轉移的患者比未使用的患者有更高的生存率。黃斌等[48]使用納米碳吸附氟尿嘧啶對胃癌靶向化療，可以降低 bcl-2 表達，誘導腫瘤細胞凋亡。Chen 等[49]在乳腺癌的切除中，納米炭吸附表阿霉素在局部淋巴結的濃度高于靜脈化療。Hagiwara 等[50]在胃癌術前內鏡下注射納米炭吸附化療藥物，術后病理發現轉移癌灶中出現了變性和壞死。Guo 等[51]在胰腺癌切除術中，用納米炭吸附吉西他濱明顯比對照組濃度高，且持續時間長。在國內外還有大量的臨床試驗中，取得了較好的療效，提高了患者的生存率。
2.3 淋巴化療在食管癌中的應用
Shimada 等[52]用活性炭吸附博來霉素與博來霉素水溶液在犬類的食管注射，發現頸部腹部淋巴結中都查見了藥物，從而認為活性炭吸附博來霉素是可以靶向治療食管癌。Hirao 等[53]在犬類食管上注射 PEP-CH 和 PEP 注射劑，內鏡注入犬食管壁被優先保留超過 7 d 逐漸交付在一個更高的選擇性水平 83% 的區域節點，近端和遠端，為超過 7 d，全身 PEP 的水平要低得多。Oyama 等[54]在 10 例不能手術的食管癌患者中，給予培洛霉素-納米炭淋巴化療，有 5 例患者完成了治療，有 2 例患者生存時間超過 1 年。Natsugoe 等[55]研究了 10 例術前 2 d 內鏡下將納米炭攜帶博萊霉素注射到腫瘤及正常黏膜下的病例，發現胸部縱隔及頸部、腹部都有黑染的淋巴結，并可以探測到博來霉素；并且在病理研究中，發現 6 例患者的 23 枚淋巴結都有不同程度的退性改變或者炎性病變。Hagiwara 等[56]在動物實驗中將培洛霉素-納米炭混懸液及培洛霉素水溶液注射到大鼠身上，可發現前者在局部淋巴結濃度明顯高于后者；在 6 例未手術的食管癌中，通過內鏡下注射培洛霉素-納米炭進行淋巴化療，術后有 5 例患者存活約 27 個月以上，明顯延長了患者的生存時間。Kitamura 等[57]內鏡下注射納米炭攜帶博來霉素于腫瘤或癌旁正常食管組織，使腫瘤明顯縮小，使患者在術前均可以進食。Domitsu 在狗的模型上，比較納米炭-順鉑混懸液及順鉑-水溶液到胸腔縱隔中，發現順鉑水劑型血漿及淋巴結濃度迅速上升，但混懸劑型則上升緩慢，并且在淋巴結的濃度明顯高于水劑型。許天文等[58]隨機對照試驗中，注射順鉑-納米炭混懸注射液組比對照組，淋巴結清掃數目及轉移檢出率高，3 年生存時間長。Ortner 等[59]通過前瞻性研究，納入 10 例Ⅳ期食管癌患者，在內鏡下注射納米炭吸附絲裂霉素，發現患者吞咽困難明顯減輕、腫瘤體積明顯減小，生存時間比使用支架的患者明顯延長，表明這種治療方法可以提高食管癌患者生存質量。
綜上所述，國內外研究表明淋巴化療已經在多種腫瘤中應用取得較好療效。可以在術前經內鏡下給藥后，再行手術。也可以直接在手術中應用，一方面作為淋巴示蹤劑，對淋巴結進行顯影，提高區域淋巴結及轉移淋巴結的清掃。研究表明血液轉移及局部復發也是腫瘤轉移的主要方式之一[20, 22]。術中淋巴化療可以殺傷淋巴清掃未能清掃到的淋巴結微轉移癌灶，但不能替代靜脈化療及放療。尤其是腫瘤可能出現遠處轉移，術后需要輔助化療以及局部浸潤較深的腫瘤需要放療。淋巴化療可以作為一種輔助治療，殺傷在淋巴結中的腫瘤細胞及微轉移癌灶。目前，已有新的研究認為單壁納米炭管可以更好地攜帶化療藥物進行淋巴化療[60]。未來可能會出現更多更高效的載體及抗癌藥物，來為患者帶來更好的治療[61]。