引用本文: 查文云. 婦科白帶鹽水法和快速染色法的比較分析. 華西醫學, 2014, 29(1): 100-101. doi: 10.7507/1002-0179.20140030 復制
白帶涂片多項檢查快速染色法(CTB)是國家“九五”科技成果重點推廣項目,原衛生部十年百項推廣項目之一。其原理是根據病原體、細胞等含有多種氨基酸,其極性基帶不同的電荷,與帶不同電荷的染液親合,而染成不同的顏色,達到對病原體形態的鑒別作用。該法一片多用,可在同一張涂片上同時作滴蟲、霉菌、纖毛菌、腎形相對雙球菌、加特納球桿菌、核異質細胞及癌細胞等多項檢查。我院自采用CTB技術檢查各種婦科炎癥以來,為廣大婦女的婦科炎癥診治提供了積極幫助。目前針對臨床實習、進修帶教的需要,以及我州一些縣、鄉鎮醫院仍然采用鹽水法的現況,我們對2012年1月-8月婦科門診和住院治療的1 443例患者同時采用鹽水法和CTB法檢查其白帶,并比較其結果,現報告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選擇2012年1月-8月在我院婦科門診和住院患者1 443例。年齡12~67歲,平均39歲,取子宮頸或陰道分泌物。
1.2 方法
每份標本涂片2張,一張用鹽水法鏡檢[1],另一張用CTB染色后鏡檢:此染液由湖南株州千金藥業股份有限公司生產,分Ⅰ液和Ⅱ液,Ⅰ液主要成分為伊紅,Ⅱ液主要成分為甲苯胺藍和蘇木素。操作方法:采用混合染色法,涂片經干燥固定后,于玻片一端滴Ⅱ液4~5滴,再滴加Ⅰ液2~3滴,充分混勻后,倒于白帶涂膜上,染5~6 min后水洗,趁濕鏡檢。陰道桿菌:深藍色粗長桿菌;滴蟲:多為圓形、梨形、橢圓形或不規則形,細胞質豐富,染灰藍或藍色,細胞核偏于一側,染紫紅色,梭形或棗核狀;霉菌:菌絲呈藍色,分節狀排列,孢子呈深藍色;纖毛菌:鏡下呈頭發彎曲,灰紫色,打(+)以上報告;加特納球桿菌:呈細沙樣球桿菌,染灰紫色,在涂片中看到較多的球桿菌及有線索細胞(細胞質中布滿了球桿菌的上皮細胞或中性粒細胞)方可報告;淋球菌:染黑藍色,腎形相對。
1.3 統計學方法
采用SPSS 13.0進行數據處理與分析,兩種方法的檢出率比較,用χ2檢驗,P值<0.05為有統計學意義。
2 結果
1 443例標本中CTB法檢出滴蟲73例,占5.1%;霉菌267例,占18.5%,腎形雙球菌17例,占1.2%;加特納球桿菌248例,占17.2%;纖毛菌68例,占4.7%;混和感染89例,占6.2%;核異質細胞4例,占0.3%;總檢出例數677例,總陽性率46.9%。CTB法與鹽水法兩組對照滴蟲與霉菌陽性檢出率差異有統計學意義(χ2=16.46,P<0.01)。見表 1。

3 討論
陰道炎是婦科常見病,主要有滴蟲性陰道炎、霉菌性陰道炎及細菌性陰道炎。傳統鹽水法查白帶能檢出滴蟲、霉菌,但特異性效果不佳,CTB快速染色法可在一張涂片中同時作滴蟲、霉菌、纖毛菌、加特納球桿菌、腎形相對雙球菌、陰道清潔度等多項檢查,方法簡便,不需重復取樣[2]。鹽水法查霉菌,由于上皮細胞膜的卷曲,各種成分的重疊,涂片背景不潔等原因,常使霉菌難以辨認,霉菌喜依附于上皮細胞上生長,而上皮細胞在鹽水中透明度差,有遮蓋,影響霉菌檢出率[3]。而CTB染色后,霉菌的芽生孢子、小菌絲被染成藍色,陰道上皮、白細胞染成天藍色,而細胞核染成紫藍色,細胞內可見粗細均勻的顆粒,各種染色成分清晰,形態清楚,直觀。鹽水法查滴蟲雖直接易檢,但受取標本時間及氣溫的限制,只有在滴蟲活動時才易于鑒別,否則容易誤診。冬季氣溫低,滴蟲活動受影響,常使陽性率偏低。CTB不受季節、離體時間、溫度等影響[4],經染色后滴蟲形態規則,細胞質豐富,染灰藍色或天藍色,邊緣色深,蟲體多為梨形,圓形,橢圓形或不規則形,細胞核染紫紅色位于蟲體一端。對試驗結果進行客觀、科學分析,可為臨床選擇性用藥提供依據,對控制抗生素濫用,防止耐藥菌株進一步增多具有積極的指導作用。CTB避免了鹽水白帶標本在運送過程中容易被打翻污染的問題[5]。染色標本可以長期保存以供臨床教學或復查[6]。鹽水法對真菌性及滴蟲性陰道炎的診斷有一定的臨床價值,但是對老年性陰道炎、細菌性陰道炎的診斷則有較大的局限性[7]。我們通過對1 443例同時使用CTB技術和鹽水法的檢查結果比較發現,CTB技術操作簡單,容易掌握,染色時間短,形態結構清晰,陽性檢出率滿意,結果判斷客觀,便于大量臨床標本的常規檢測;而且價格便宜,適宜各種層次患者,較好地彌補了傳統方法的不足,有效地解決了條件致病菌及混合感染病原檢查的問題,具有很強的實用性,易于基層醫療單位推廣使用[8]。
白帶涂片多項檢查快速染色法(CTB)是國家“九五”科技成果重點推廣項目,原衛生部十年百項推廣項目之一。其原理是根據病原體、細胞等含有多種氨基酸,其極性基帶不同的電荷,與帶不同電荷的染液親合,而染成不同的顏色,達到對病原體形態的鑒別作用。該法一片多用,可在同一張涂片上同時作滴蟲、霉菌、纖毛菌、腎形相對雙球菌、加特納球桿菌、核異質細胞及癌細胞等多項檢查。我院自采用CTB技術檢查各種婦科炎癥以來,為廣大婦女的婦科炎癥診治提供了積極幫助。目前針對臨床實習、進修帶教的需要,以及我州一些縣、鄉鎮醫院仍然采用鹽水法的現況,我們對2012年1月-8月婦科門診和住院治療的1 443例患者同時采用鹽水法和CTB法檢查其白帶,并比較其結果,現報告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選擇2012年1月-8月在我院婦科門診和住院患者1 443例。年齡12~67歲,平均39歲,取子宮頸或陰道分泌物。
1.2 方法
每份標本涂片2張,一張用鹽水法鏡檢[1],另一張用CTB染色后鏡檢:此染液由湖南株州千金藥業股份有限公司生產,分Ⅰ液和Ⅱ液,Ⅰ液主要成分為伊紅,Ⅱ液主要成分為甲苯胺藍和蘇木素。操作方法:采用混合染色法,涂片經干燥固定后,于玻片一端滴Ⅱ液4~5滴,再滴加Ⅰ液2~3滴,充分混勻后,倒于白帶涂膜上,染5~6 min后水洗,趁濕鏡檢。陰道桿菌:深藍色粗長桿菌;滴蟲:多為圓形、梨形、橢圓形或不規則形,細胞質豐富,染灰藍或藍色,細胞核偏于一側,染紫紅色,梭形或棗核狀;霉菌:菌絲呈藍色,分節狀排列,孢子呈深藍色;纖毛菌:鏡下呈頭發彎曲,灰紫色,打(+)以上報告;加特納球桿菌:呈細沙樣球桿菌,染灰紫色,在涂片中看到較多的球桿菌及有線索細胞(細胞質中布滿了球桿菌的上皮細胞或中性粒細胞)方可報告;淋球菌:染黑藍色,腎形相對。
1.3 統計學方法
采用SPSS 13.0進行數據處理與分析,兩種方法的檢出率比較,用χ2檢驗,P值<0.05為有統計學意義。
2 結果
1 443例標本中CTB法檢出滴蟲73例,占5.1%;霉菌267例,占18.5%,腎形雙球菌17例,占1.2%;加特納球桿菌248例,占17.2%;纖毛菌68例,占4.7%;混和感染89例,占6.2%;核異質細胞4例,占0.3%;總檢出例數677例,總陽性率46.9%。CTB法與鹽水法兩組對照滴蟲與霉菌陽性檢出率差異有統計學意義(χ2=16.46,P<0.01)。見表 1。

3 討論
陰道炎是婦科常見病,主要有滴蟲性陰道炎、霉菌性陰道炎及細菌性陰道炎。傳統鹽水法查白帶能檢出滴蟲、霉菌,但特異性效果不佳,CTB快速染色法可在一張涂片中同時作滴蟲、霉菌、纖毛菌、加特納球桿菌、腎形相對雙球菌、陰道清潔度等多項檢查,方法簡便,不需重復取樣[2]。鹽水法查霉菌,由于上皮細胞膜的卷曲,各種成分的重疊,涂片背景不潔等原因,常使霉菌難以辨認,霉菌喜依附于上皮細胞上生長,而上皮細胞在鹽水中透明度差,有遮蓋,影響霉菌檢出率[3]。而CTB染色后,霉菌的芽生孢子、小菌絲被染成藍色,陰道上皮、白細胞染成天藍色,而細胞核染成紫藍色,細胞內可見粗細均勻的顆粒,各種染色成分清晰,形態清楚,直觀。鹽水法查滴蟲雖直接易檢,但受取標本時間及氣溫的限制,只有在滴蟲活動時才易于鑒別,否則容易誤診。冬季氣溫低,滴蟲活動受影響,常使陽性率偏低。CTB不受季節、離體時間、溫度等影響[4],經染色后滴蟲形態規則,細胞質豐富,染灰藍色或天藍色,邊緣色深,蟲體多為梨形,圓形,橢圓形或不規則形,細胞核染紫紅色位于蟲體一端。對試驗結果進行客觀、科學分析,可為臨床選擇性用藥提供依據,對控制抗生素濫用,防止耐藥菌株進一步增多具有積極的指導作用。CTB避免了鹽水白帶標本在運送過程中容易被打翻污染的問題[5]。染色標本可以長期保存以供臨床教學或復查[6]。鹽水法對真菌性及滴蟲性陰道炎的診斷有一定的臨床價值,但是對老年性陰道炎、細菌性陰道炎的診斷則有較大的局限性[7]。我們通過對1 443例同時使用CTB技術和鹽水法的檢查結果比較發現,CTB技術操作簡單,容易掌握,染色時間短,形態結構清晰,陽性檢出率滿意,結果判斷客觀,便于大量臨床標本的常規檢測;而且價格便宜,適宜各種層次患者,較好地彌補了傳統方法的不足,有效地解決了條件致病菌及混合感染病原檢查的問題,具有很強的實用性,易于基層醫療單位推廣使用[8]。