微粒是細胞凋亡或者受刺激后以出芽方式產生的細胞膜碎片。內皮細胞、血小板、巨噬細胞、淋巴細胞和腫瘤細胞等多種細胞都可以釋放微粒。其生物學功能主要包括促進凝血、參與炎癥反應和促進腫瘤生長。現有研究表明，增生型糖尿病視網膜病變（PDR）患者玻璃體中的微粒可以誘導內皮細胞增生遷徙以及新生血管的形成，從而促進PDR患者病理性新生血管的形成。氧化應激誘導視網膜色素上皮細胞產生的表達膜補體調節蛋白的微粒可能與老年性黃斑變性中玻璃膜疣形成有一定關系；淋巴細胞來源微粒（LMP）可以改變巨噬細胞中血管生成相關因子的基因表達模式，發揮重要的抗血管形成作用。LMP還可通過下調脾臟酪氨酸激酶的基因表達和上調p53及p21，最終激活半胱天冬酶-3，從而誘導視網膜母細胞瘤細胞的凋亡。但是微粒在眼底疾病中的研究尚屬起步階段，如何將微粒應用于臨床防治眼底疾病是我們面臨的一大難題。相信隨著研究的進一步深入，微粒在眼底疾病中的應用會越來越廣泛。
引用本文： 宋尹婷, 顏華. 微粒在眼底疾病中的應用研究現狀及進展. 中華眼底病雜志, 2018, 34(2): 193-197. doi: 10.3760/cma.j.issn.1005-1015.2018.02.025 復制
微粒是存在于活化血小板周圍的具有促凝作用的“塵埃”樣物質[1]。其本質是直徑為100～1000 nm的細胞膜碎片。微粒因為表面表達多種膜受體和黏附因子以及攜帶豐富的細胞因子、趨化因子、酶和信號蛋白而具有多種生物學功能[2-4]。微粒因其在促進凝血、炎癥反應和腫瘤生長等方面的作用，已成為近年來的研究熱點；而它在糖尿病視網膜病變（DR）、老年性黃斑變性（AMD）等眼底疾病中的作用和相關機制也日益受到人們的關注。現就微粒的生物學功能及其在眼底疾病中的應用研究現狀及進展作一綜述。
1 微粒概述
微粒是細胞凋亡或者受刺激后以出芽方式產生的細胞膜碎片，其表面富含磷脂和其來源細胞的特異性表面抗原[5]。目前主要按照微粒的細胞來源對其進行分類（表1）[6-10]。
表1
常見微粒的特異性表面抗原
雖然根據所檢測樣本的不同，微粒分離檢查方法在操作細節上有所差異，但實驗方法基本一致。目前常用的檢測方法是流式細胞術。收集血液、關節液和玻璃體液等待測樣本，經多次高速離心將樣本中的細胞成分除去，從而制備無細胞樣本進行流式細胞術檢測。在流式細胞術檢測時，首先利用標準微粒確定所檢測微粒的大小范圍并對其進行“圈選”，然后利用標記特異性表面抗原的方法實現定性、定量分析[10]。
微粒的形成與釋放過程可由多種生物學行為誘導產生，包括細胞活化、衰老和凋亡等。研究顯示，同一種細胞在活化和凋亡過程中所形成的微粒在表型和數量上也不盡相同，這可能與微粒形成的機制有關[11]。細胞凋亡過程中微粒的形成機制主要依賴于Rho-相關激酶（ROCKI），ROCKI在細胞凋亡過程中經胱天蛋白酶切割后活化，活化的ROCKI可以觸發細胞骨架重排和凋亡微粒的釋放[12]。細胞活化過程中微粒釋放的機制則與鈣離子內流密切相關。細胞活化后胞內鈣離子濃度上升，一方面在氨基磷脂轉位酶、觸發酶和爬行酶的作用下，局部細胞膜上磷脂酰絲氨酸從細胞膜內側轉移至細胞膜外側，發生磷脂不對稱性的重排[13]。另一方面，胞內鈣離子濃度上升引起鈣蛋白酶和凝溶膠蛋白等鈣敏感酶活化，促進了脫落的膜蛋白轉變為細胞骨架從而實現微粒的形成。此外，不同的刺激因素引起細胞活化過程所產生的微粒也有所不同，主要表現為活化微粒表面組分的差異[14]。總之，微粒的形成與釋放是一個較為復雜的生物學過程，微粒的來源、引起微粒釋放的激動因素和微粒形成時的微環境共同決定了微粒表面的組分和生物學功能。
2 微粒的生物學功能
微粒不僅存在于血液中，而且存在于可以發生炎癥、細胞活化和凋亡的其他組織中[15, 16]。研究證實，微粒具有多種生物學功能，包括促進凝血、參與炎癥反應和促進腫瘤進展等[5, 12]。
微粒具有促凝作用[17, 18]。Sinauridze等[19]發現，血小板來源微粒（PDMP）的促凝活性是活化血小板的50～100倍。這種促凝活性可能與PDMP表面表達組織因子（TF）有關。血小板活化后釋放二硫化物異構酶引起TF構象變化，促進TF和（或）凝血因子Ⅶa復合物與凝血因子Ⅴa結合，從而促進凝血[20]。整合素αⅡbβ3可能也參與PDMP的促凝過程[21]。此外，Tian等[6]發現，腦源性微粒（BDMP）可以與血小板結合，使血小板表面磷脂酰絲氨酸（PS）的表達增加；PS作為一種催化劑，可提供高負電荷表面，結合凝血酶原、凝血因子Ⅹa和凝血因子Ⅴa，將血小板活化和凝血酶生成兩個過程聯系起來，促進外源性凝血途徑的激活。
有研究發現，冠心病患者和多發性硬化患者血液中內皮細胞來源微粒和PDMP含量增高[22, 23]；動脈粥樣硬化斑塊中存在單核細胞來源微粒（MDMP）和淋巴細胞來源微粒（LMP）[24]；類風濕關節炎患者的滑膜液中微粒的含量也明顯增高[25]。這些都提示微粒具有一定的促炎活性。微粒既可以通過介導細胞間受體的轉移，也可以通過激活補體發揮促炎作用。體外研究發現，凋亡Jurkat細胞來源的微粒可以和C1q結合，引起C3、C4在微粒表面沉積，激活經典補體途徑發揮促炎作用。微粒參與炎癥的另一個機制可能是黏附作用。不僅PMP有促炎活性，多核細胞來源的微粒也可以誘導內皮細胞產生白細胞介素-6（IL-6）和單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）等促炎因子的釋放[26-28]。
體內體外實驗均證實，腫瘤細胞釋放微粒的數量與腫瘤細胞的侵襲性密切相關[29, 30]。Poste和Nicolson[31]將具有高度轉移性的小鼠B16黑色素瘤細胞（F10）與轉移性較低的小鼠B16黑色素瘤細胞（F1）共培養后，發現F1細胞獲得了一定的侵襲性。腫瘤細胞來源的微粒參與腫瘤進展可能與微粒促進致癌受體轉移使腫瘤細胞獲得侵襲性癌細胞表型，促進新生血管形成和腫瘤生長，為腫瘤細胞生長和轉移提供有利的微環境及逃避免疫監視等多種機制有關[32]。
3 微粒在眼底疾病的研究進展
多種病理過程都可以引起細胞活化或者凋亡而產生微粒，眼部的細胞凋亡可以引起視力損傷甚至致盲。因此研究微粒的生物學功能及其作用機制在眼科也是非常重要的。
3.1 糖尿病視網膜病變（DR）
增生型DR（PDR）致視力嚴重損傷的主要原因是視網膜微血管進行性改變，導致血視網膜屏障破壞、病理性新生血管形成，引起玻璃體視網膜出血或牽拉性視網膜脫離[33, 34]。Chahed等[7]用流式細胞術測定了104例糖尿病患者玻璃體和血漿樣本中各個細胞來源微粒的水平。研究發現，PDR組玻璃體內PDMP、內皮細胞來源的微粒、表達PS的微粒都顯著高于非PDR組和對照組，其中內皮細胞來源的微粒在糖尿病患者玻璃體內含量最多。激光光凝治療和玻璃體腔注射抗血管內皮生長因子（VEGF）藥物治療可以控制甚至消退視網膜新生血管[35, 36]。研究者發現激光治療后PDR患者玻璃體樣本中內皮細胞來源的微粒明顯下降；而手術前抗VEGF藥物治療后PDR患者玻璃體中內皮細胞來源的微粒明顯下降，PDMP完全消失[7]。提示PDR患者玻璃體中的微粒可以誘導內皮細胞增生遷徙以及新生血管的形成，從而促進PDR患者病理性新生血管的形成，加速DR的進展。
單核細胞和血小板在DR早期病理過程的發生中起著重要作用[37, 38]。Ogata等[8]發現，DR患者循環血中PDMP和MDMP明顯高于未發生DR的糖尿病患者，并且外周血中PDMP和MDMP的含量與DR病情嚴重程度呈正相關。伴有毛細血管閉塞的糖尿病患者玻璃體內MDMP明顯高于不伴毛細血管閉塞者。由此說明，糖尿病患者血小板的激活增加導致PDMP水平增高，而PDMP和活化的血小板可以激活單核細胞并且促進MDMP的產生，活化的單核細胞結合血管內皮細胞引起微血管的閉塞，促進新生血管形成。
3.2 老年性黃斑變性（AMD）
氧化應激是AMD發生視網膜色素上皮（RPE）細胞死亡的重要原因[39]。RPE可以更新光感受器細胞外節，這一生理功能需要較強的抗氧化能力和修復功能。當這些功能喪失時，可以引起RPE細胞功能失調、炎癥甚至死亡[40-42]。Carver和Yang[43]利用H2O2體外處理RPE細胞誘導氧化應激模型，發現H2O2處理后RPE細胞凋亡明顯增多，并且H2O2可以呈時間、劑量依賴性的促進RPE細胞釋放微粒。這些由RPE細胞釋放的微粒表面不僅表達磷脂酰絲氨酸和磷脂酰乙醇胺，還攜帶膜補體調節蛋白膜補體調節蛋白（mCRP）；相應的，RPE細胞表面的mCRP減少[43]。經硫醇抗氧化劑處理的氧化應激組RPE細胞表面mCRP的丟失明顯減少，同時mCRP陽性微粒的釋放也受到抑制。而mCRP與玻璃膜疣的產生密切相關。表明氧化應激誘導RPE細胞產生的表達mCRP的微粒可能與AMD中玻璃膜疣形成有一定關系。對基因敲除小鼠的最新研究發現，在敲除P2X7受體的氧化應激小鼠模型中，AMD的病理改變明顯減輕的同時微粒在RPE-Bruch膜下聚積也明顯減少[44]。
病理性脈絡膜新生血管（CNV）是AMD病理過程中的重要改變，在CNV的形成過程中，巨噬細胞具有潛在的促血管形成作用。Tahiri等[45]發現，體外共培養LMP和巨噬細胞能夠有效抑制巨噬細胞增生；調節巨噬細胞向M1型極化。基因表達分析和定量逆轉錄聚合酶鏈反應結果證實，LMP通過調節巨噬細胞中的血管生成相關基因的表達來調節其釋放血管生成因子的含量，包括下調VEGFa和成纖維細胞生長因子的表達，上調色素上皮衍生因子和血小板反應蛋白1的表達。證實LMP可以改變巨噬細胞中血管生成相關因子的基因表達模式，發揮重要的抗血管形成作用。
3.3 孔源性視網膜脫離（RRD）
視網膜脫離是影響視力的重要原因之一，神經上皮層與RPE層的分離能夠引起光感受器細胞的死亡[46]。微粒是細胞死亡、凋亡和活化的重要標記，且呈數量相關。Tumahai等[9]對49只RRD患眼的玻璃體樣本進行研究，發現RRD患眼玻璃體內光感受器細胞來源的微粒、表達PS的微粒和光感受器細胞來源表達PS的微粒都高于對照組。提示RRD患眼玻璃體樣本中光感受器細胞來源的微粒含量明顯上升，可能反應了RRD患眼光感受器細胞的死亡情況。此外，可溶性促炎因子MCP-1和IL-6的含量也高于對照組。而Nakazawa等[47]研究證實，促炎因子MCP-1介導了光感受器細胞的死亡過程。
3.4 視網膜母細胞瘤（RB）
RB是一種起源于視網膜胚胎性核層細胞的惡性腫瘤，是嬰幼兒最常見的眼內惡性腫瘤之一[48]。研究發現，RB與原癌基因和脾臟酪氨酸激酶（SYK）的上調有關。體外共培養LMP和RB細胞發現，LMP可以降低RB細胞活性，抑制SYK基因表達和上調p53及p21；而利用特異性抗體阻斷LMP后，RB細胞活性改變，SYK基因表達下調和p53及p21的上調受到顯著的抑制。提示LMP主要通過下調SYK的基因表達和上調p53及p21，最終激活半胱天冬酶-3，從而誘導RB細胞的凋亡[49]。這些發現可能為RB的進一步治療提供了新的思路。
3.5 早產兒視網膜病變（ROP）
Yang等[50]利用高氧誘導視網膜病變建立ROP動物模型，玻璃體內注射熒光標記的LMP和VEGF后用伊凡斯蘭染色發現，LMP抑制VEGF誘導的視網膜微血管滲漏。體外共培養LMP和人視網膜內皮細胞（HREC）發現，LMP呈劑量依賴性地抑制HREC的生長和增生，并且抑制VEGF誘導HREC的遷移作用。提示LMP可能參與VEGFa信號調節通路，從而發揮了有效的抗血管生成作用。敲低低密度脂蛋白受體（LDLR）后，HREC對LMP的攝取減少，LMP對VEGFa的表達和HREC的影響也明顯減弱。表明LDLR在LMP抗血管生成作用過程中發揮了重要作用。Tahiri等[45]新近研究發現，LMP可以顯著抑制小鼠模型中角膜新生血管的形成。
3.6 Beh?et病
Beh?et病是一種多系統炎癥性疾病，以有炎癥性眼病史的年輕男性患者最為常見。10%～40%的Beh?et病患者可能發生靜脈血栓，這是導致疾病進展的重要原因。Mejía等[51]比較了72名健康者和88例Beh?et病患者血漿中微粒含量，發現Beh?et病患者血漿中TF+微粒含量較健康者顯著增高；Beh?et病患者中有血栓史者較無血栓史者的TF通道抑制劑（PI）+微粒/TF+微粒值顯著降低。提示TFPI+微粒和TF+微粒之間的失衡可能是Beh?et病患者易于發生血栓的原因之一，而TFPI+微粒/TF+微粒值有希望用于Beh?et病患者血栓形成風險的評估。Khan等[52]研究結果也證實，Beh?et病患者血漿中具有促凝作用的微粒明顯高于對照組。
4 問題與展望
眾多研究表明，微粒在多種疾病發生發展過程中發揮了重要作用，但是目前微粒在各種疾病尤其是眼底疾病中的研究尚屬起步階段。如何將微粒應用于臨床防治眼底疾病是我們面臨的一大難題。未來應進行眼底其他疾病方面的微粒研究，得出微粒在眼底疾病發生進展過程中的作用機制；同時研究如何通過對微粒的作用，以達到預防或治療眼底疾病的效果。相信隨著研究的進一步深入，微粒在眼底疾病中的應用會越來越廣泛。
微粒是存在于活化血小板周圍的具有促凝作用的“塵埃”樣物質[1]。其本質是直徑為100～1000 nm的細胞膜碎片。微粒因為表面表達多種膜受體和黏附因子以及攜帶豐富的細胞因子、趨化因子、酶和信號蛋白而具有多種生物學功能[2-4]。微粒因其在促進凝血、炎癥反應和腫瘤生長等方面的作用，已成為近年來的研究熱點；而它在糖尿病視網膜病變（DR）、老年性黃斑變性（AMD）等眼底疾病中的作用和相關機制也日益受到人們的關注。現就微粒的生物學功能及其在眼底疾病中的應用研究現狀及進展作一綜述。
1 微粒概述
微粒是細胞凋亡或者受刺激后以出芽方式產生的細胞膜碎片，其表面富含磷脂和其來源細胞的特異性表面抗原[5]。目前主要按照微粒的細胞來源對其進行分類（表1）[6-10]。
表1
常見微粒的特異性表面抗原
雖然根據所檢測樣本的不同，微粒分離檢查方法在操作細節上有所差異，但實驗方法基本一致。目前常用的檢測方法是流式細胞術。收集血液、關節液和玻璃體液等待測樣本，經多次高速離心將樣本中的細胞成分除去，從而制備無細胞樣本進行流式細胞術檢測。在流式細胞術檢測時，首先利用標準微粒確定所檢測微粒的大小范圍并對其進行“圈選”，然后利用標記特異性表面抗原的方法實現定性、定量分析[10]。
微粒的形成與釋放過程可由多種生物學行為誘導產生，包括細胞活化、衰老和凋亡等。研究顯示，同一種細胞在活化和凋亡過程中所形成的微粒在表型和數量上也不盡相同，這可能與微粒形成的機制有關[11]。細胞凋亡過程中微粒的形成機制主要依賴于Rho-相關激酶（ROCKI），ROCKI在細胞凋亡過程中經胱天蛋白酶切割后活化，活化的ROCKI可以觸發細胞骨架重排和凋亡微粒的釋放[12]。細胞活化過程中微粒釋放的機制則與鈣離子內流密切相關。細胞活化后胞內鈣離子濃度上升，一方面在氨基磷脂轉位酶、觸發酶和爬行酶的作用下，局部細胞膜上磷脂酰絲氨酸從細胞膜內側轉移至細胞膜外側，發生磷脂不對稱性的重排[13]。另一方面，胞內鈣離子濃度上升引起鈣蛋白酶和凝溶膠蛋白等鈣敏感酶活化，促進了脫落的膜蛋白轉變為細胞骨架從而實現微粒的形成。此外，不同的刺激因素引起細胞活化過程所產生的微粒也有所不同，主要表現為活化微粒表面組分的差異[14]。總之，微粒的形成與釋放是一個較為復雜的生物學過程，微粒的來源、引起微粒釋放的激動因素和微粒形成時的微環境共同決定了微粒表面的組分和生物學功能。
2 微粒的生物學功能
微粒不僅存在于血液中，而且存在于可以發生炎癥、細胞活化和凋亡的其他組織中[15, 16]。研究證實，微粒具有多種生物學功能，包括促進凝血、參與炎癥反應和促進腫瘤進展等[5, 12]。
微粒具有促凝作用[17, 18]。Sinauridze等[19]發現，血小板來源微粒（PDMP）的促凝活性是活化血小板的50～100倍。這種促凝活性可能與PDMP表面表達組織因子（TF）有關。血小板活化后釋放二硫化物異構酶引起TF構象變化，促進TF和（或）凝血因子Ⅶa復合物與凝血因子Ⅴa結合，從而促進凝血[20]。整合素αⅡbβ3可能也參與PDMP的促凝過程[21]。此外，Tian等[6]發現，腦源性微粒（BDMP）可以與血小板結合，使血小板表面磷脂酰絲氨酸（PS）的表達增加；PS作為一種催化劑，可提供高負電荷表面，結合凝血酶原、凝血因子Ⅹa和凝血因子Ⅴa，將血小板活化和凝血酶生成兩個過程聯系起來，促進外源性凝血途徑的激活。
有研究發現，冠心病患者和多發性硬化患者血液中內皮細胞來源微粒和PDMP含量增高[22, 23]；動脈粥樣硬化斑塊中存在單核細胞來源微粒（MDMP）和淋巴細胞來源微粒（LMP）[24]；類風濕關節炎患者的滑膜液中微粒的含量也明顯增高[25]。這些都提示微粒具有一定的促炎活性。微粒既可以通過介導細胞間受體的轉移，也可以通過激活補體發揮促炎作用。體外研究發現，凋亡Jurkat細胞來源的微粒可以和C1q結合，引起C3、C4在微粒表面沉積，激活經典補體途徑發揮促炎作用。微粒參與炎癥的另一個機制可能是黏附作用。不僅PMP有促炎活性，多核細胞來源的微粒也可以誘導內皮細胞產生白細胞介素-6（IL-6）和單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）等促炎因子的釋放[26-28]。
體內體外實驗均證實，腫瘤細胞釋放微粒的數量與腫瘤細胞的侵襲性密切相關[29, 30]。Poste和Nicolson[31]將具有高度轉移性的小鼠B16黑色素瘤細胞（F10）與轉移性較低的小鼠B16黑色素瘤細胞（F1）共培養后，發現F1細胞獲得了一定的侵襲性。腫瘤細胞來源的微粒參與腫瘤進展可能與微粒促進致癌受體轉移使腫瘤細胞獲得侵襲性癌細胞表型，促進新生血管形成和腫瘤生長，為腫瘤細胞生長和轉移提供有利的微環境及逃避免疫監視等多種機制有關[32]。
3 微粒在眼底疾病的研究進展
多種病理過程都可以引起細胞活化或者凋亡而產生微粒，眼部的細胞凋亡可以引起視力損傷甚至致盲。因此研究微粒的生物學功能及其作用機制在眼科也是非常重要的。
3.1 糖尿病視網膜病變（DR）
增生型DR（PDR）致視力嚴重損傷的主要原因是視網膜微血管進行性改變，導致血視網膜屏障破壞、病理性新生血管形成，引起玻璃體視網膜出血或牽拉性視網膜脫離[33, 34]。Chahed等[7]用流式細胞術測定了104例糖尿病患者玻璃體和血漿樣本中各個細胞來源微粒的水平。研究發現，PDR組玻璃體內PDMP、內皮細胞來源的微粒、表達PS的微粒都顯著高于非PDR組和對照組，其中內皮細胞來源的微粒在糖尿病患者玻璃體內含量最多。激光光凝治療和玻璃體腔注射抗血管內皮生長因子（VEGF）藥物治療可以控制甚至消退視網膜新生血管[35, 36]。研究者發現激光治療后PDR患者玻璃體樣本中內皮細胞來源的微粒明顯下降；而手術前抗VEGF藥物治療后PDR患者玻璃體中內皮細胞來源的微粒明顯下降，PDMP完全消失[7]。提示PDR患者玻璃體中的微粒可以誘導內皮細胞增生遷徙以及新生血管的形成，從而促進PDR患者病理性新生血管的形成，加速DR的進展。
單核細胞和血小板在DR早期病理過程的發生中起著重要作用[37, 38]。Ogata等[8]發現，DR患者循環血中PDMP和MDMP明顯高于未發生DR的糖尿病患者，并且外周血中PDMP和MDMP的含量與DR病情嚴重程度呈正相關。伴有毛細血管閉塞的糖尿病患者玻璃體內MDMP明顯高于不伴毛細血管閉塞者。由此說明，糖尿病患者血小板的激活增加導致PDMP水平增高，而PDMP和活化的血小板可以激活單核細胞并且促進MDMP的產生，活化的單核細胞結合血管內皮細胞引起微血管的閉塞，促進新生血管形成。
3.2 老年性黃斑變性（AMD）
氧化應激是AMD發生視網膜色素上皮（RPE）細胞死亡的重要原因[39]。RPE可以更新光感受器細胞外節，這一生理功能需要較強的抗氧化能力和修復功能。當這些功能喪失時，可以引起RPE細胞功能失調、炎癥甚至死亡[40-42]。Carver和Yang[43]利用H2O2體外處理RPE細胞誘導氧化應激模型，發現H2O2處理后RPE細胞凋亡明顯增多，并且H2O2可以呈時間、劑量依賴性的促進RPE細胞釋放微粒。這些由RPE細胞釋放的微粒表面不僅表達磷脂酰絲氨酸和磷脂酰乙醇胺，還攜帶膜補體調節蛋白膜補體調節蛋白（mCRP）；相應的，RPE細胞表面的mCRP減少[43]。經硫醇抗氧化劑處理的氧化應激組RPE細胞表面mCRP的丟失明顯減少，同時mCRP陽性微粒的釋放也受到抑制。而mCRP與玻璃膜疣的產生密切相關。表明氧化應激誘導RPE細胞產生的表達mCRP的微粒可能與AMD中玻璃膜疣形成有一定關系。對基因敲除小鼠的最新研究發現，在敲除P2X7受體的氧化應激小鼠模型中，AMD的病理改變明顯減輕的同時微粒在RPE-Bruch膜下聚積也明顯減少[44]。
病理性脈絡膜新生血管（CNV）是AMD病理過程中的重要改變，在CNV的形成過程中，巨噬細胞具有潛在的促血管形成作用。Tahiri等[45]發現，體外共培養LMP和巨噬細胞能夠有效抑制巨噬細胞增生；調節巨噬細胞向M1型極化。基因表達分析和定量逆轉錄聚合酶鏈反應結果證實，LMP通過調節巨噬細胞中的血管生成相關基因的表達來調節其釋放血管生成因子的含量，包括下調VEGFa和成纖維細胞生長因子的表達，上調色素上皮衍生因子和血小板反應蛋白1的表達。證實LMP可以改變巨噬細胞中血管生成相關因子的基因表達模式，發揮重要的抗血管形成作用。
3.3 孔源性視網膜脫離（RRD）
視網膜脫離是影響視力的重要原因之一，神經上皮層與RPE層的分離能夠引起光感受器細胞的死亡[46]。微粒是細胞死亡、凋亡和活化的重要標記，且呈數量相關。Tumahai等[9]對49只RRD患眼的玻璃體樣本進行研究，發現RRD患眼玻璃體內光感受器細胞來源的微粒、表達PS的微粒和光感受器細胞來源表達PS的微粒都高于對照組。提示RRD患眼玻璃體樣本中光感受器細胞來源的微粒含量明顯上升，可能反應了RRD患眼光感受器細胞的死亡情況。此外，可溶性促炎因子MCP-1和IL-6的含量也高于對照組。而Nakazawa等[47]研究證實，促炎因子MCP-1介導了光感受器細胞的死亡過程。
3.4 視網膜母細胞瘤（RB）
RB是一種起源于視網膜胚胎性核層細胞的惡性腫瘤，是嬰幼兒最常見的眼內惡性腫瘤之一[48]。研究發現，RB與原癌基因和脾臟酪氨酸激酶（SYK）的上調有關。體外共培養LMP和RB細胞發現，LMP可以降低RB細胞活性，抑制SYK基因表達和上調p53及p21；而利用特異性抗體阻斷LMP后，RB細胞活性改變，SYK基因表達下調和p53及p21的上調受到顯著的抑制。提示LMP主要通過下調SYK的基因表達和上調p53及p21，最終激活半胱天冬酶-3，從而誘導RB細胞的凋亡[49]。這些發現可能為RB的進一步治療提供了新的思路。
3.5 早產兒視網膜病變（ROP）
Yang等[50]利用高氧誘導視網膜病變建立ROP動物模型，玻璃體內注射熒光標記的LMP和VEGF后用伊凡斯蘭染色發現，LMP抑制VEGF誘導的視網膜微血管滲漏。體外共培養LMP和人視網膜內皮細胞（HREC）發現，LMP呈劑量依賴性地抑制HREC的生長和增生，并且抑制VEGF誘導HREC的遷移作用。提示LMP可能參與VEGFa信號調節通路，從而發揮了有效的抗血管生成作用。敲低低密度脂蛋白受體（LDLR）后，HREC對LMP的攝取減少，LMP對VEGFa的表達和HREC的影響也明顯減弱。表明LDLR在LMP抗血管生成作用過程中發揮了重要作用。Tahiri等[45]新近研究發現，LMP可以顯著抑制小鼠模型中角膜新生血管的形成。
3.6 Beh?et病
Beh?et病是一種多系統炎癥性疾病，以有炎癥性眼病史的年輕男性患者最為常見。10%～40%的Beh?et病患者可能發生靜脈血栓，這是導致疾病進展的重要原因。Mejía等[51]比較了72名健康者和88例Beh?et病患者血漿中微粒含量，發現Beh?et病患者血漿中TF+微粒含量較健康者顯著增高；Beh?et病患者中有血栓史者較無血栓史者的TF通道抑制劑（PI）+微粒/TF+微粒值顯著降低。提示TFPI+微粒和TF+微粒之間的失衡可能是Beh?et病患者易于發生血栓的原因之一，而TFPI+微粒/TF+微粒值有希望用于Beh?et病患者血栓形成風險的評估。Khan等[52]研究結果也證實，Beh?et病患者血漿中具有促凝作用的微粒明顯高于對照組。
4 問題與展望
眾多研究表明，微粒在多種疾病發生發展過程中發揮了重要作用，但是目前微粒在各種疾病尤其是眼底疾病中的研究尚屬起步階段。如何將微粒應用于臨床防治眼底疾病是我們面臨的一大難題。未來應進行眼底其他疾病方面的微粒研究，得出微粒在眼底疾病發生進展過程中的作用機制；同時研究如何通過對微粒的作用，以達到預防或治療眼底疾病的效果。相信隨著研究的進一步深入，微粒在眼底疾病中的應用會越來越廣泛。
