通過靶向PML-RARα融合基因的小干擾RNA(siRNA)的體外干擾,研究其對急性早幼粒細胞白血病細胞NB4活性的影響。設計合成5對靶向PML-RARα融合基因的siRNA,轉染NB4細胞,采用MTT比色法、軟瓊脂細胞集落形成實驗檢測siRNA對NB4細胞的增殖抑制作用,用流式細胞術測定細胞的凋亡,結果顯示siRNA顯著抑制了NB4細胞的增殖并有效誘導細胞凋亡。靶向PML-RARα融合基因的siRNA有望成為治療急性早幼粒細胞白血病的有效方法。
目的:研究丹參酮ⅡA(Tan ⅡA)對急性早幼粒細胞白血病(APL)細胞株NB4細胞誘導的血管內皮細胞株(ECV304)促凝活性(PCA)的影響,并對其機制作初步探討。方法:(1)分別用1.0μg/mL TanⅡA、0.3μg/mLATRA、0.01%DMSO、PRMI1640處理NB4細胞24、48和72h,取其上清液作為條件培養基(hNB4-CM)。將這些CM分別與ECV304細胞在37oC共同孵育0、4、8和12h,用反復凍融法制備ECV304細胞裂解液,采用一期凝血法測定其PCA;采用ELISA法測定條件培養基中的TNF-α 。(2)ECV304細胞與1.0μg/mL TanⅡA及TanⅡA 72h-NB4-CM 在37oC共同分別孵育6、12、24和48h,并以ATRA和DMSO分別作為陽性和陰性對照,用上述相同方法測定ECV304細胞裂解液的PCA。結果:(1)1.0 μg/mL Tan ⅡA可以誘導NB4細胞分化,其作用NB4細胞的培養基有一定的升高ECV304細胞PCA的作用,該作用在孵育4h時達高峰,之后ECV304細胞PCA逐漸下降。與0.3μg/mL ATRA的作用無統計學差異(Pgt;0.05)。(2)1.0 μg/mL的TanⅡA對TanⅡA72h-NB4-CM促ECV304細胞PCA有抑制作用,其強度隨作用時間增加而增加,與1.0μmol/L ATRA比較,Pgt;0.05。(3)TanⅡA作用NB4細胞的培養基中TNF-α濃度,在作用前7h內隨作用時間增加而增加,與0.3μg/mL ATRA比較無差異(Pgt;0.05)。結論:Tan ⅡA能誘導NB4細胞分化,后者在分化過程中釋放的TNF-α可能與ECV304細胞PCA活性升高有關;Tan-ⅡA又能抑制Tan-ⅡA-NB4-CM增強ECV304細胞PCA的作用。