目的 觀察氣道平滑肌細胞經哮喘致敏血清刺激后嗜酸粒細胞趨化因子( Eotaxin) 的表達變化, 并探討其可能的機制。方法 貼壁法體外培養大鼠氣道平滑肌細胞。建立大鼠哮喘模型,采血收集致敏血清。用致敏血清刺激體外培養的氣道平滑肌細胞, 或同時予以致敏血清和地塞米松干預。采用酶聯免疫吸附法測定培養液上清中Eotaxin 水平, 放射免疫法測定細胞內環磷酸腺苷( cAMP) 表達, 逆轉錄聚合酶鏈反應半定量檢測細胞中Eotaxin mRNA 表達。結果 致敏血清干預后,細胞培養上清Eotaxin 水平和細胞內Eotaxin mRNA 表達均較正常對照組顯著升高[ ( 107. 09 ±7. 12) ng/L比( 0. 63 ±0. 56) ng/L, P lt;0. 05; 1. 39 ±0. 04 比0. 05 ±0. 01, P lt;0. 05] , 細胞內cAMP表達顯著降低[ ( 17. 58 ±3. 62) ng/L 比( 32. 39 ±3. 36) ng/L, P lt;0. 05] 。地塞米松與致敏血清同時干預后, 上清中Eotaxin 水平[ ( 64. 18 ±4. 04) ng/L] 和胞內Eotaxin mRNA( 0. 77 ±0. 19) 表達較哮喘組顯著降低, 細胞內cAMP 表達顯著升高[ ( 58. 99 ±5. 94) ng/L] ( P lt; 0. 05) 。上清Eotaxin 水平與胞內cAMP 水平呈負相關( r= - 0. 788, P lt;0. 01) 。結論 氣道平滑肌細胞在致敏狀態下Eotaxin 基因和蛋白表達均顯著增強, 可能作為炎性自分泌細胞分泌炎癥因子, 通過cAMP 信號途徑參與哮喘的發生。
目的 探討哮喘大鼠肺臟、鼻腔、腸道黏膜免疫的相互關聯和變化規律。方法 將20只Wistar 大鼠分為對照組和哮喘組, 各10 只。采用卵白蛋白致敏和激發的方法制作哮喘模型。應用免疫組化和原位雜交技術檢測大鼠肺組織、鼻黏膜、腸黏膜中的CD4 + 、CD8 + 淋巴細胞數量, eotaxin蛋白及其mRNA 表達。取大鼠支氣管肺泡灌洗液( BALF) 、鼻咽沖洗液、腸黏液上清液, 通過酶聯免疫吸附試驗檢測sIgA 含量。結果 哮喘組肺組織、鼻黏膜、腸黏膜中CD4 + 和CD8 + 表達較對照組增高( P lt;0. 05) , 肺組織中eotaxin 蛋白及mRNA、鼻咽沖洗液中sIgA、腸黏膜eotaxin 蛋白表達較對照組增高( P lt;0. 05) 。其余指標兩組間水平無顯著差異。對照組大鼠eotaxin 蛋白表達在肺組織和鼻黏膜呈負相關( r= - 0. 572, P =0. 008) , 在腸黏膜和鼻黏膜呈正相關( r =0. 638, P =0. 002) ; eotaxin mRNA表達在肺組織和鼻黏膜呈正相關( r =0. 502, P = 0. 024) , 在腸黏膜和鼻黏膜呈正相關( r =0. 594, P =0. 006) 。在哮喘組, 除了eotaxin 蛋白表達在肺組織和腸黏膜呈負相關( r = - 0. 448, P = 0. 048) , 其余指標間無顯著相關性。結論 在正常生理狀態下, 肺、鼻、大腸之間的黏膜免疫功能可能保持密切的關系或動態平衡。但是在哮喘發病過程中, 這種平衡被破壞。
目的 分析空氣污染物的柴油廢氣顆粒( DEP) 吸入對哮喘模型大鼠的氣道嗜酸粒細胞趨化因子表達的影響。方法 以SD 雄性大鼠為實驗動物, 利用卵白蛋白( OVA) 制備哮喘模型, 之后再給予霧化吸入DEP各1、2 及3 周。每只大鼠均于最后一次吸入結束后次日處死, 取支氣管組織和肺泡灌洗液, ELISA 法和定量PCR 分別檢測CCL11、CCL24、CCL26 的基因和蛋白表達水平。結果 隨著DEP吸入時間的延長, CCL24 和CCL26 的基因和蛋白表達均逐漸上升, 與對照組相比差異有統計學意義。而CCL11 的基因和蛋白表達在DEP吸入后無明顯變化。結論 柴油DEP吸入加重哮喘大鼠的氣道高反應性, 與DEP 刺激CCL24 和CCL26 趨化因子表達部分相關。