目的探討B7CD28/細胞毒T淋巴細胞相關蛋白4（CTLA4）共刺激通路在胰島移植中的重要作用。方法采用文獻回顧的方法對該共刺激通路的分子結構、功能以及有關動物實驗的資料進行綜述。結果B7CD28/CTLA4共刺激通路是T淋巴細胞活化、增殖的信號傳導通路之一，若缺乏共刺激信號，則會導致T淋巴細胞呈克隆無反應狀態。CTLA4Ig通過阻斷CD28介導的共刺激通路，使胰島移植物在受者體內長期存活。結論通過對B7CD28/CTLA4共刺激通路的研究，有助于了解移植胰島存活的免疫機理。
目的構建含抗腫瘤相關抗原TAG72單鏈抗體及CD28胞內區及跨膜區融合基因的哺乳細胞表達載體，為制備消化道腫瘤靶向性嵌合錨定T細胞，并探討其對消化道腫瘤的殺傷活性。方法應用PCR法，將抗TAG72單鏈抗體(single chain variable fragment,scFv)克隆入哺乳細胞表達載體pcDNA3.0，在5′端及3′端分別引入相應酶切位點； 用RTPCR法從正常人外周血T細胞克隆CD28胞內區及跨膜區的cDNA，然后將其克隆于scFv的下游，并在5′端及3′端引入相應的酶切位點。結果抗TAG-72 scFv cDNA片段為729 bp，與已知的序列相符； CD28胞內區及跨膜區的cDNA片段為240 bp，與Genebank公布的序列一致。重組的表達載體經酶切瓊脂糖電泳測序加以證實。結論完成了抗腫瘤相關抗原TAG72 scFv及CD28胞內區及跨膜區融合基因scFvCD28pcDNA3.0的構建，為制備消化道腫瘤靶向性嵌合錨定T細胞奠定了實驗基礎。
為探討CD28單克隆抗體在移植免疫中的作用，以混合淋巴細胞培養和大鼠同種異體甲狀旁腺移植為模型，觀察mAbCD28在體外和體內實驗中的作用。結果：mAbCD28在體外可以抑制淋巴細胞的增殖，在體內可以延長甲狀旁腺移植物的存活時間。本實驗結果提示：mAbCD28可以阻斷CD28-B7之間共刺激信號的傳遞，并在同種異體大鼠甲狀旁腺移植中起到免疫抑制作用。
目的 構建含有由抗腫瘤相關糖蛋白72(anti-TAG72)單鏈抗體片段(single chain variable fragment,scFv)及CD28胞內區及跨膜區的融合基因anti-TAG72 scFv-CD28的重組綠色熒光表達載體pEGFP-C3-anti-TAG72 scFv-CD28，并轉染獲得嵌合錨定T淋巴細胞。方法 將anti-TAG72單鏈抗體及CD28胞內區及跨膜區基因的嵌合錨定融合分子克隆入綠色熒光蛋白真核表達載體pEGFP-C3，獲得pEGFP-C3-anti-TAG72 scFv-CD28表達載體。用卡那霉素篩選陽性克隆，經酶切和測序鑒定。將上述重組質粒pEGFP-C3-anti-TAG72 scFv-CD28以脂質體法瞬時轉染外周血單核細胞(PBMC)，以獲得嵌合錨定T淋巴細胞，用熒光顯微鏡檢測嵌合分子anti-TAG72 scFv-CD28在PBMC中的表達，并檢驗嵌合錨定融合分子anti-TAG72 scFv-CD28的表達。結果 重組綠色熒光表達載體pEGFP-C3-anti-TAG72 scFv-CD28中anti-TAG72 scFv-CD28片段為1 002 bp，與已知的序列相符。酶切、測序結果表明，嵌合錨定融合分子基因片段anti-TAG72 scFv-CD28被正確插入pEGFP-C3載體； 轉染后anti-TAG72 scFv-CD28片段及綠色熒光物質表達于嵌合錨定T淋巴細胞胞膜表面及胞漿中，為綠色熒光顯色。結論 完成了綠色熒光表達載體pEGFP-C3-anti-TAG72 scFv-CD28的構建，并成功在PBMC瞬時表達。